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KAI1基因对胃癌细胞体外生长、迁移的影响

发布时间:2023-08-06 13:38
  目的:用转染慢病毒载体的方式改变不同胃癌细胞株中KAI1基因的表达量,探讨KAI1基因对胃癌细胞体外生长与迁移能力的影响。方法:1.将人低分化胃癌细胞BGC823分组,分别为转染KAI1基因过表达慢病毒载体pLenti-EF1a-EGFP-P2A-Puro-CMV-KAI1-3Flag的实验组(BGC823-OE组)、转染空病毒载体pLenti-EF1a-EGFP-F2A-Puro-CMV-MCS的阴性对照组(BGC823-NC组)和未做特殊处理的空白对照组(BGC823-Ctrl组);同时将人高分化胃癌细胞MKN28进行分组,分别为转染KAI1基因慢病毒RNA干扰载体pLKD-CMV-EGFP-2A-Puro-U6-shRNA(KAI1)的实验组(MKN28-siRNA组)、转染空病毒载体pLKD-CMV-EGFP-Puro-U6-shRNA的阴性对照组(MKN28-NC组)以及未做特殊处理的空白对照组(MKN28-Ctrl组),病毒感染72小时后荧光显微镜下观察各组细胞中绿色荧光蛋白EGFP的表达,并通过加药筛选方法建立稳定转染的细胞株。2.应用蛋白印迹实验(Western Blo...

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