循经取穴针刺对心肌缺血大鼠模型ATP敏感性钾通道和蛋白激酶相关基因调控作用影响的研究

发布时间：2017-07-18 03:17

  本文关键词：循经取穴针刺对心肌缺血大鼠模型ATP敏感性钾通道和蛋白激酶相关基因调控作用影响的研究

  更多相关文章： 针刺 内关 心肌缺血 钾离子通道 K_(ATP)通道 蛋白激酶 循经特异性

【摘要】：目 的：该实验采用能酸异丙肾上腺素制造心肌缺血大鼠模型,运用RT-PCR检测技术,通过观察针刺不同经脉穴位对心肌缺血大鼠模型心肌细胞ATP敏感钾通道(KATP通道)基因Kir6.1、Kir6.2及其结合蛋白SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2的mRNA表达水平的影响,从ATP敏感钾通道及蛋白激酶基因表达差异角度,探讨电针内关穴抗心肌缺血在细胞膜离子通道基因表达层面的作用机制,求证经穴效应的循经特异性,为临床针刺治疗心肌缺血提供相应的借鉴。材料与方法：72只健康雄性SD大鼠(SPF级),自由摄取饮用矿泉水和普通清洁级饲料,以适应性喂养7天。应用随机数字表法,从72只大鼠中随机抽取10只,作为对照组。其余62只大鼠,连续2天采用皮下多点位注射异丙肾上腺素以建立心肌缺血大鼠模型,对照组10只大鼠在相同位置注射等量的生理盐水,并于造模前、后检测各组大鼠心电图。剔除造模不成功(心电图不合格或死亡者)的22只大鼠,将剩下的40只大鼠随机分为4组,即：模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组10只。在清醒状态下,对内关组、列缺组、非经非穴组大鼠的相应穴位进行电针治疗,每日1次,连续7天。对照组和模型组的大鼠,不施加针刺,但每天都采用同样的抓取和固定,以排除人为的干扰因素。治疗结束后,再次检测各组大鼠心电图。采用断脊法,将各组大鼠处死,开胸以获得心肌组织。采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)技术,检测心肌细胞KATP通道相关基因Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2以及参考基因GAPDH表达的变化,进行统计学处理。结 果：1.治疗前后,各组大鼠左心室肌细胞Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B mRNA表达情况：与对照组比较：模型组的各目的基因(Kir6.1、Kir62、SUR2A、SUR2B) mRNA相对表达量明显升高,具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较：内关组、列缺组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B)的相对表达量明显降低,具有统计学意义(P0.05)；非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相对表达量无明显变化,没有统计学意义(P0.05)。与内关组比较：列缺组、非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相对表达量明显升高,有统计学意义(P0.05)。与列缺组比较：非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、 SUR2B) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P0.05)。2.治疗前后,各组大鼠左心室肌细胞PKA、PKG、PKCβ2mRNA表达情况：与对照组比较：模型组目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较：内关组、列缺组各目的基因(PKA、 PKG、PKCβ2)的相对表达量明显降低,具有统计学意义(p0.05)；非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量无明显变化,没有统计学意义(p0.05)。与内关组比较：列缺组、非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P0.05)。与列缺组比较：非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(p0.05)结 论：1.电针内关穴、列缺穴降低心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表达量的作用较非经非穴明显,表明电针内关穴、列缺穴都具有抗心肌缺血的效果；2.电针内关穴降低心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表达量的作用较列缺穴明显,表明电针内关穴抗心肌缺血的效果优于列缺穴；3.电针手厥阴心包经内关穴抗心肌缺血具有循经特异性；4.电针内关穴降低心肌缺血大鼠心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA基因表达量的结果,与以往文献中成药冠心康干预结果相反,提示电针内关穴抗心肌缺血机理可能是干预启动了机体自我修复的内源性保护机制,促进了机体自身调节机能的良性转归。
【关键词】：针刺 内关 心肌缺血 钾离子通道 K_(ATP)通道 蛋白激酶 循经特异性
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 中文论著摘要4-6
• 英文论著摘要6-9
• 英文缩略语9-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-18
• 实验结果18-21
• 讨论21-28
• 结论28-29
• 参考文献29-33
• 附录 综述33-48
• 参考文献43-48
• 致谢48-49
• 个人简介49

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