重组猪α干扰素制备与冻干工艺及体内外抗PRRSV复制作用

发布时间：2021-06-21 17:04

　　α干扰素（IFN-α）是一类具有抗病毒活性、免疫调节活性、抗肿瘤活性的细胞因子,主要来源于浆细胞样树突状细胞（pDCs）。多项研究证实,猪α干扰素（pIFN-α）能在体内和体外抑制多种病毒的增殖,具有良好的疗效。从白细胞分离IFN-α是制备IFN-α常用的一种方法,但存在成本高、安全性低、质量控制不统一、以及疗效不稳定等缺点。开发高活性、低成本、易于规模生产的重组猪干扰素（rPoIFN-α）制剂对防治猪的病毒性疫病具有重要意义。本研究采用毕赤酵母菌KM71表达系统获得rPoIFN-α,并进行了纯化和冻干,体内外试验结果显示其具有较强的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）复制作用,表明rPoIFN-α在猪病毒性疾病防控方面具有重要应用前景。主要内容如下:1.重组猪α干扰素在巴斯德毕赤酵母中的高效发酵表达与纯化采用7L高密度发酵和Do-Stat反馈控制模式,进行毕赤酵母菌KM71培养及诱导表达,建立了毕赤酵母中高效分泌表达rPoIFN-α工艺技术。并依次用亲和层析方法、离子交换方法、分子筛三种柱层析方法进行了纯化,用SDS-PAGE进行纯度检测。结果表明,诱导84h时,rPoIFN-α表... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图２－５不同诱导时间表达ｒＰｏｌＦＮ－ａ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析

图２－６?ｉ＇ＰｏＩＦＮ－ａ的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析??Ｍ：蛋白分子量标准；ＬＫＭ７１对照；?丨：ＫＭ７１对照；２－５：诱导表达时间分别为２４ｈ、??

图２－９不同诱导时间ＫＭ７１表达ｒＰｏＩＦＮ－ｃｔ??Ｍ：蛋白分子量标准；１－４：诱导表达时间分别为１２ｈ、３６ｈ、６０ｈ、８４ｈ??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3241060