空肠弯曲菌FlhF调节鞭毛合成分子机制及其对细菌毒力的影响分析
发布时间：2021-07-03 06:37
空肠弯曲菌是一种重要的食源性人兽共患病原菌,其可通过动物、食物、水、牛奶等传播给人,并引发以腹泻为主的急性胃肠炎等症状。近年来弯曲菌感染案例在世界各地普遍呈上升趋势,给公共卫生和食品安全带来严重威胁。鞭毛在空肠弯曲菌致病过程中发挥重要作用,其不仅介导细菌运动力,帮助黏附、侵袭细胞,定植宿主,还参与分泌毒力蛋白以及逃避宿主天然免疫应答;另外部分鞭毛因子还被发现可以协同调节该菌其他毒力基因表达,使得鞭毛成为空肠弯曲菌重要的致病因子。FlhF是近年来在极鞭毛细菌中发现调控鞭毛生成数目和定位的关键蛋白,FlhF在不同细菌鞭毛合成过程中发挥不一样的效应;在空肠弯曲菌中,FlhF突变使得细菌完全失去鞭毛结构以及运动力,但其作用机制目前还未阐明。本研究利用表达谱芯片技术在全基因水平分析了 FlhF所影响的代谢通路及其效应,并在鞭毛系统中探究了其所发挥的功能,同时还就FlhF突变对空肠弯曲菌毒力以及致腹泻能力的影响进行了分析;研究结果为深入解析FlhF的作用机制及其与该菌毒力的偶联性提供了依据。1.空肠弯曲菌flhF突变株全基因转录表达谱比较分析应用荧光定量PCR方法评价在不同生长阶段的空肠弯曲菌鞭毛...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：142 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２空肠弯曲菌鞭毛生物合成［５８］??Ｆｉｇ．?２?Ｔｈｅ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ｆｌａｇｅｌｌａ?ｉｎ?Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ?ｊｅｊｕｎｉ＾??
３．５铁离子摄取系统??铁离子是催化多种代谢相关生化反应的关键因子，宿主体内的铁离子一般以血红素、??转铁蛋白或乳铁蛋白的形式存在，而游离的铁离子一般不足以支撑细菌的生长，因此有效??捕获环境中的铁离子，并对其含量进行调控对于细菌存活及其毒力是十分重要的［９１，％］。空??肠弯曲菌一般自身不产生铁载体，但该菌可以利用其他微生物生成的铁载体，例如高铁色??素或含铁肠杆菌素（Ｆｅｒｒｉｃｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｉｎ，?ＦｅＥｎｔ）等来满足自身的铁需求，并且这种能力对于??其定植并感染宿主是十分重要的［９７］。??铁离子摄取系统一般由外膜受体、周质结合蛋白、内膜转运系统组成（图５）?ｔ９６］。目??前在弯曲菌内已发现ＣｈｕＡＢＣＤ与血红素或血红蛋白吸收相关，ＣｈｕＢ可能是一类透膜酶，??ＣｈｕＣ是ＡＴＰａｓｅ，而ＣｈｕＤ是负责与转运系统结合的周质蛋白［９７］。ＣｆｒＡ是含铁肠杆菌素可??能的外膜受体蛋白，其通过与ＴｏｎＢ－ＥｘｂＢ－ＥｘｂＤ蛋白复合体以及ＣｅｕＢＣＤＥ转运系统对??［９７］，
２８?博士学位论文???内运输［９８］。为了避免过度摄取铁离子导致细胞毒性，弯曲菌还需对其铁离子稳态进行调节，??Ｆｍ？就是一类对铁离子摄入含量进行调控的调节蛋白［９９］，Ｆｕｒ发挥功能时形成二聚体结构，??通过与铁离子摄取相关基因的启动子结合，与辅阻遏物Ｆｅ２＋联合对相关基因的转录进行调??控［＿。??ＣｆｒＡ?，?ＣｆｒＢ?（外膜ＦｅＥｎｔ受体），ＣｅｕＥ?（ＦｅＥｎｔ周质结合蛋白），Ｃｊ０１７８?（假定转铁蛋??白），ＦｅｏＢ?（亚铁离子结合蛋白），ＣｔｕＡ?（转铁／乳铁蛋白摄取蛋白）以及Ｆｕｒ?（铁离子摄取??调节子）突变后空肠弯曲菌对鸡的定植能力均明显下降［９Ｉ，９７，１（Ｈ］；同时在肠道环境中可以观??察到血红素以及血红蛋白外膜受体ＣｈｕＡ呈现上调表达这表明铁离子摄取系统对于空??肠弯曲菌的存活以及致病力都是十分重要的。??＿?，?，?Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ／Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ??ｎｔｅｒａｔｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]基因芯片与高通量DNA测序技术前景分析[J]. 滕晓坤,肖华胜. 中国科学（C辑:生命科学）. 2008(10)
[2]弯曲菌多重PCR检测方法的建立及其初步应用[J]. 何蕊,黄金林,许海燕,苏洁,潘志明,焦新安. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2007(01)
硕士论文
[1]肠炎沙门菌转录因子SEN2967和SEN3610调控基因的筛选与鉴定[D]. 陈韵.扬州大学 2017
[2]空肠弯曲菌感染仔兔模型的建立及动物体内诱导基因的筛选[D]. 商宇伟.扬州大学 2014
本文编号：3262075
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：142 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２空肠弯曲菌鞭毛生物合成［５８］??Ｆｉｇ．?２?Ｔｈｅ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ｆｌａｇｅｌｌａ?ｉｎ?Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ?ｊｅｊｕｎｉ＾??
３．５铁离子摄取系统??铁离子是催化多种代谢相关生化反应的关键因子，宿主体内的铁离子一般以血红素、??转铁蛋白或乳铁蛋白的形式存在，而游离的铁离子一般不足以支撑细菌的生长，因此有效??捕获环境中的铁离子，并对其含量进行调控对于细菌存活及其毒力是十分重要的［９１，％］。空??肠弯曲菌一般自身不产生铁载体，但该菌可以利用其他微生物生成的铁载体，例如高铁色??素或含铁肠杆菌素（Ｆｅｒｒｉｃｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｉｎ，?ＦｅＥｎｔ）等来满足自身的铁需求，并且这种能力对于??其定植并感染宿主是十分重要的［９７］。??铁离子摄取系统一般由外膜受体、周质结合蛋白、内膜转运系统组成（图５）?ｔ９６］。目??前在弯曲菌内已发现ＣｈｕＡＢＣＤ与血红素或血红蛋白吸收相关，ＣｈｕＢ可能是一类透膜酶，??ＣｈｕＣ是ＡＴＰａｓｅ，而ＣｈｕＤ是负责与转运系统结合的周质蛋白［９７］。ＣｆｒＡ是含铁肠杆菌素可??能的外膜受体蛋白，其通过与ＴｏｎＢ－ＥｘｂＢ－ＥｘｂＤ蛋白复合体以及ＣｅｕＢＣＤＥ转运系统对??［９７］，
２８?博士学位论文???内运输［９８］。为了避免过度摄取铁离子导致细胞毒性，弯曲菌还需对其铁离子稳态进行调节，??Ｆｍ？就是一类对铁离子摄入含量进行调控的调节蛋白［９９］，Ｆｕｒ发挥功能时形成二聚体结构，??通过与铁离子摄取相关基因的启动子结合，与辅阻遏物Ｆｅ２＋联合对相关基因的转录进行调??控［＿。??ＣｆｒＡ?，?ＣｆｒＢ?（外膜ＦｅＥｎｔ受体），ＣｅｕＥ?（ＦｅＥｎｔ周质结合蛋白），Ｃｊ０１７８?（假定转铁蛋??白），ＦｅｏＢ?（亚铁离子结合蛋白），ＣｔｕＡ?（转铁／乳铁蛋白摄取蛋白）以及Ｆｕｒ?（铁离子摄取??调节子）突变后空肠弯曲菌对鸡的定植能力均明显下降［９Ｉ，９７，１（Ｈ］；同时在肠道环境中可以观??察到血红素以及血红蛋白外膜受体ＣｈｕＡ呈现上调表达这表明铁离子摄取系统对于空??肠弯曲菌的存活以及致病力都是十分重要的。??＿?，?，?Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ／Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ??ｎｔｅｒａｔｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]基因芯片与高通量DNA测序技术前景分析[J]. 滕晓坤,肖华胜. 中国科学（C辑:生命科学）. 2008(10)
[2]弯曲菌多重PCR检测方法的建立及其初步应用[J]. 何蕊,黄金林,许海燕,苏洁,潘志明,焦新安. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2007(01)
硕士论文
[1]肠炎沙门菌转录因子SEN2967和SEN3610调控基因的筛选与鉴定[D]. 陈韵.扬州大学 2017
[2]空肠弯曲菌感染仔兔模型的建立及动物体内诱导基因的筛选[D]. 商宇伟.扬州大学 2014
本文编号：3262075
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