甜瓜果实发育相关miRNA的鉴定与功能研究
发布时间：2021-08-13 23:06
甜瓜（Cucumis melo L.）是世界各地广泛栽培的园艺作物,具有重要的经济价值。甜瓜生长期相对较短,基因组相对较小,依其果实成熟时呼吸特性不同,可分为呼吸跃变型和非呼吸跃变型两类,这些特点使得甜瓜适宜作为研究果实发育和性别分化的模式植物。microRNA（miRNA）是一种广泛存在于动植物中的非编码小RNA调控分子。在植物中,miRNA通常长20-24nt,其前体由RNA聚合酶Ⅱ转录形成。miRNA在植物生长发育、生物和非生物胁迫耐受以及信号转导等过程中发挥着重要作用,然而miRNA在果实发育、成熟过程中的作用的研究还相对较少。因此更深入的了解miRNA在果实成熟过程中的作用有助于加深我们对果实发育成熟过程的认识,从而更好的提高果实的品质和经济价值。为此,本研究以甜瓜品种河套蜜瓜为实验材料,河套蜜瓜为内蒙古自治区巴彦淖尔市特产,获得全国农产品地理标志。实验以河套蜜瓜自交系果实为材料,利用二代测序技术、瞬时表达技术、构建过表达和基因编辑的稳定遗传转化植株等方法对甜瓜果实中的miRNA进行了分析、鉴定和功能的研究,主要的结果与结论如下:（1）以甜瓜果实四个发育时期（生长期（18 D...
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：134 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
miRNA的生物合成（引自Tzuu-fenLeeetal.，2012）
10图1.2miRNA在果实生长发育中的作用（引自Chenetal.2018）Figure1.2theroleofmiRNAinfruitgrowthanddevelopment(fromChenetal.2018)1.2.2果实生长发育中miRNA与其靶向的植物激素信号途径相关基因植物生长素在植物的生长、发育等过程中起到重要的作用。ARFs是植物生长素信号途径的下游应答的转录因子，在生长素信号途径中起到重要作用。植物中miR160、miR167和miR390负调节不同ARF的表达。拟南芥中miR160的靶向三个ARF基因（ARF10、ARF16和ARF17），拟南芥miR160a的表达受到生长素的正向调节，同时还发现在miR160a基因上游有三个生长素应答元件（AuxRE），这三个元件的受损会导致不正常的miR160a的表达，进而出现异常的胚、种子和花的发育，但是生长素是如何与miR160a作用进而调节拟南芥生长的还需要进一步的研究[61]。而在番茄中低表达miR160会出现不正常的梨形的果实形态。提
21图2.1果实采后呼吸速率测定结果9-1—9-5：授粉后40天果实样品。Figure.2.1Post-harvestrespirationrateoffruit9-1-9-5:40daysafterpollinationfruitsamples.2015年，仅对18DAP和36DAP的果实样品进行了测序；2016年测定了呼吸跃变期果实，同时采集了生长期（18DAP，G)、成熟期（36DAP，R）、呼吸跃变期（Climacteric，C，约40DAP）和呼吸跃变后期（Post-climacteric，P，约42DAP）的果实样品并随后进行测序。两次测序均采用相同的实验方法和测序公司进行测序。后续的分析结果以2016年测序结果为主，2015年测序结果作为对2016年实验的验证分析。2.1.2实验试剂TRIzonReagent（康为世纪，CW0580M）,DNaseI（Takara，2270A），RNase-freeWater（Takara，9012），氯仿、异丙醇、无水乙醇、TRIS碱、冰醋酸、Na2EDTA等均为进口或国产分析纯试剂。
本文编号：3341295
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：134 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
miRNA的生物合成（引自Tzuu-fenLeeetal.，2012）
10图1.2miRNA在果实生长发育中的作用（引自Chenetal.2018）Figure1.2theroleofmiRNAinfruitgrowthanddevelopment(fromChenetal.2018)1.2.2果实生长发育中miRNA与其靶向的植物激素信号途径相关基因植物生长素在植物的生长、发育等过程中起到重要的作用。ARFs是植物生长素信号途径的下游应答的转录因子，在生长素信号途径中起到重要作用。植物中miR160、miR167和miR390负调节不同ARF的表达。拟南芥中miR160的靶向三个ARF基因（ARF10、ARF16和ARF17），拟南芥miR160a的表达受到生长素的正向调节，同时还发现在miR160a基因上游有三个生长素应答元件（AuxRE），这三个元件的受损会导致不正常的miR160a的表达，进而出现异常的胚、种子和花的发育，但是生长素是如何与miR160a作用进而调节拟南芥生长的还需要进一步的研究[61]。而在番茄中低表达miR160会出现不正常的梨形的果实形态。提
21图2.1果实采后呼吸速率测定结果9-1—9-5：授粉后40天果实样品。Figure.2.1Post-harvestrespirationrateoffruit9-1-9-5:40daysafterpollinationfruitsamples.2015年，仅对18DAP和36DAP的果实样品进行了测序；2016年测定了呼吸跃变期果实，同时采集了生长期（18DAP，G)、成熟期（36DAP，R）、呼吸跃变期（Climacteric，C，约40DAP）和呼吸跃变后期（Post-climacteric，P，约42DAP）的果实样品并随后进行测序。两次测序均采用相同的实验方法和测序公司进行测序。后续的分析结果以2016年测序结果为主，2015年测序结果作为对2016年实验的验证分析。2.1.2实验试剂TRIzonReagent（康为世纪，CW0580M）,DNaseI（Takara，2270A），RNase-freeWater（Takara，9012），氯仿、异丙醇、无水乙醇、TRIS碱、冰醋酸、Na2EDTA等均为进口或国产分析纯试剂。
本文编号：3341295
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