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不结球白菜开花相关基因的鉴定及功能分析

发布时间:2021-08-30 03:25
  白菜类作物属于十字花科(Cruciferae)芸薹属(Brassica),其中不结球白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)原产于中国,起源于长江下游太湖地区,栽培历史悠久,是我国广泛种植的蔬菜作物之一。不结球白菜有着丰富的遗传资源,国内外广泛引种和杂交选育,又形成了许多新的变异类型,使其遗传背景变得更加复杂。不结球白菜不同品种的开花时间存在广泛变异。例如,同样在9月播种,‘五月慢’在5月开花而‘四九菜心’在11月开花。不结球白菜不同品种开花时间必须进行调整,以保证它们相互匹配。本研究分离了三个不结球白菜基因BcMAF1、BcMAF2和BcFLC2,分析了它们的组织定位及亚细胞定位,利用转基因拟南芥和不结球白菜沉默植株研究了功能,利用酵母单杂、双荧光素酶试验结合定量PCR结果筛选了各自的下游基因。同时,利用sRNA测序技术挖掘不结球白菜春化相关的miRNA。研究结果如下:1采用同源克隆方法从不结球白菜中克隆得到BcMAF1的cDNA全长。分别在拟南芥和不结球白菜中对该基因进行功能描述。亚细胞定位和序列分析表明BcMAF1是一个核定位蛋白,包含了一个保守的MADS-... 

【文章来源】:南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:146 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

不结球白菜开花相关基因的鉴定及功能分析


图1-2?“禹氏三角”模型图(Cheng?etal.,2017)??Figure?1-2?The?model?of?“triangle?of?U”(Cheng?et?al.,2017)??

编码序列,蛋白,细胞,过表达


?第二章不结球白菜抑制开花基因&的分离和功能分析???35S?GFP?^?CaMV35s"^|?HygR?||?NOS?U?CaMV35S?)| ̄?GFP?f|?NOS?j-??LB?RB??35S?BCMAF1-GFP?^?CaMV35s"^|?HygR?)|?NOS?UTaMV35S?)TbcM>AFY?|?GFP?[)?NOs"|i??LB?^?RB??B?DAP?I?Florescence?Bright?field?Merge??图2-3?BcMAFl蛋白的亚细胞定位??八.35&心/7?和^551:价从4/7-(^75的载体结构;8.烟草中瞬时表达355*.心/:7)(标尺长度为50叫11)和??办S:&M4F/-G/rP融合蛋白(标尺长度为20?pm)??Figure?2-3?Subcellular?localization?of?BcMAFl?protein??A.?35S.?GFP?and?35S:BcMAFl-GFP?construct;?B.?Transient?expression?of?35S.?GFP?(Scale?bars?=?50?^im)?and??35S:BcMAFl-GFP?fusion?protein?(Scale?bars?=?20?jim)?in?tobacco?leaves??3.3拟南芥过表达导致晚开花??首先在拟南芥中过表达ScMAF/来研究其在开花调控中的作用。在6个T3转基??因株系(#1、#4、#8、#11、#16和#23)中扩增到597?bp的片段(5cM4F/编码序列),??说明5cM4F/已转入这6个株系(图2-4A)。在4个株系(#8、#11、

拟南芥,转基因,过表达,转基因植株


er?Control?#1?#4?#8?#11?#16?#23??looo?bp【?-mh、???7物?^?597?bp??500?bp?^^2';:??B?35S:BcMAF1-GFP?35S:BcMAF1-GFP??#1?#4?Marker?#8?#11?#16?#23??.一^?疆—5。咖??C?DAPI?Florescence?Bright?field?Merge??35S?BcMAFl-GFP?I?1?L?卜:.:一?D,:.V^?S??图2-4?T3转基因植株鉴定??A.?T3转基因拟南芥过表达空载(对照)和5cA以f7?(#1、#4、#8、#11、#16和#23)的PCR检测。扩增片段是??万cM4f7的编码区(597?bp)?;?B.转基因拟南芥一65161*1^丨〇1检测&从4/;7-(^:7?融合蛋白。融合蛋白约501^^。??marker的条带是50kDa;?C.掰、#/6和#23幼苗的GFP荧光观察??Figure?2-4?Identification?of?T3?transgenic?Arabidopsis?plants??A.?PCR?analysis?of?T3?transgenic?Arabidopsis?plants?overexpressing?empty?vector?(control)?and?BcMAFl?(#1.?#4.?#8.?#11.??#16.?and?#23).?The?amplified?fragments?were?the?BcMAFl?coding?sequence?without?termination?codon?(597?bp):?B

【参考文献】:
期刊论文
[1]不结球白菜育种研究新进展[J]. 侯喜林.  南京农业大学学报. 2003(04)



本文编号:3371962

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