杜仲种质资源及其果实质量评价
发布时间：2021-09-05 23:56
本研究在系统地收集杜仲种质资源的基础上,对其遗传多样性进行分析,并初步构建了杜仲核心种质库;从种子活力、油脂组成、药用价值和杜仲胶含量等方面对杜仲果实的质量进行评价,主要结果如下:1、种质资源收集:从全国13个省市收集杜仲种质资源共66份,其中包括闫雌、大叶、巨叶、大果、短枝和小叶六个种内变异类型,以及华仲二号、华仲三号和华仲四号三个优良无性系。2、ISSR及SRAP体系优化及引物筛选:通过对影响PCR反应的5因素（d NTPs,引物,Taq酶,Mg2+,模版DNA）进行4水平L16（45）正交试验设计,建立了杜仲ISSR和SRAP分子标记技术的优化体系。从100条/对ISSR和SRAP引物中分别筛选出8条/对ISSR和SRAP引物。用8条ISSR分子标记扩增总条带数为65,其中50条具有多态性（76.9%）。用8对SRAP引物组合共扩增出244个片段,其中163个具有多态性（66.8%）。3、杜仲种质资源遗传多样性分析:采用ISSR和SRAP分子标记分析17个全国不同产地的杜仲居群,两种标记均指出杜仲在物种水平上有较高遗传多样性,而在居群水平上遗传多样性较低。对ISSR分子标记和SR...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：143 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 杜仲的研究进展
1.1.1 杜仲种质资源分布
1.1.2 杜仲引种情况
1.1.3 杜仲各部位化学成分研究
1.1.4 杜仲药理学研究进展
1.2 杜仲产业开发利用现状
1.2.1 杜仲的开发利用历史
1.2.2 杜仲在园林观赏中的应用
1.2.3 杜仲在食品药品保健品开发中的应用
1.2.4 杜仲胶的开发利用研究
1.2.5 杜仲果实的开发利用价值
1.3 药用植物种质资源
1.3.1 药用植物核心种质的构建
1.3.2 药用植物遗传多样性分析
1.4 中药材质量评价及质量标准研究
1.4.1 中药材质量评价
1.4.2 药用植物质量标准的研究
1.5 本研究的目的与意义
第二章 种质资源的收集
2.1 试验材料的来源
2.1.1 全国范围内的主要产区的样品。
2.1.2 不同种内变异类型及优良无性系的样品
2.1.3 主产区内不同树龄和不同立地条件的样品
2.1.4 略阳主产区内行政区域的样品
2.2 产地地理气候因子
第三章 杜仲种质资源遗传多样性研究及核心种质的构建
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 基因组DNA的提取与检测
3.1.3 PCR反应及正交试验设计
3.1.4 引物的设计和筛选及PCR扩增
3.1.5 扩增结果检测及数据处理分析
3.2 结果与分析
3.2.1 基因组DNA检测结果
3.2.2 正交试验结果及分析
3.2.3 引物筛选结果
3.2.4 分子标记的多态性
3.2.5 全国不同产地杜仲遗传多样性及种群结构分析
3.2.6 不同基因型杜仲遗传多样性
3.2.7 略阳杜仲遗传多样性分析
3.3 讨论
3.3.1PCR扩增体系优化与引物筛选
3.3.2 不同产地杜仲遗传多样性
3.3.3 不同基因型杜仲遗传多样性
3.3.4 略阳县不同产区杜仲遗传多样性
第四章 杜仲核心种质库的构建
4.1 材料与方法
4.2 结果与分析
4.2.1 聚类分析
4.2.2 杜仲核心种质构建及其评价
4.3 讨论
第五章 杜仲种子检验规程及质量标准研究
5.1 杜仲种子质量分级标准
5.1.1 试验材料的来源
5.1.2 种子检验流程图
5.1.3 扦样
5.1.4 净度分析
5.1.5 发芽测定
5.1.6 真实性鉴定
5.1.7 含水量测定
5.1.8 生活力的测定
5.1.9 重量测定
5.1.10分级标准制定
5.2 结果与分析
5.2.1 杜仲种子质量分析结果
5.2.2 相关性分析
5.2.3 聚类分析及种子质量分级标准的制定
5.3 讨论
第六章 杜仲种子油脂的产量与质量评价
6.1 试验材料、试剂、仪器
6.1.1 试验材料
6.1.2 主要试剂
6.1.3 试验仪器
6.2 试验方法
6.2.1 种子千粒重
6.2.2 杜仲种子油脂的提取
6.2.3 杜仲种子油脂的脂肪酸甲酯化
6.2.4 脂肪酸组成及相对含量测定
6.3 结果与分析
6.3.1 不同产地杜仲种子千粒重、出油率及杜仲种子油脂脂肪酸相对含量比较
6.3.2 不同基因型杜仲种子千粒重、出油率及脂肪酸相对含量比较
6.3.3 略阳不同产区杜仲种子千粒重、出油率及脂肪酸相对含量比较
6.3.4 脂肪酸相对含量间的相关性分析
6.4 讨论
第七章 杜仲种粕HPLC指纹图谱的建立与化学成分分析
7.1 试验仪器
7.2 试剂
7.3 试验样品
7.4 方法
7.4.1 色谱条件
7.4.2 提取方法
7.4.3 专属性试验
7.4.4 精密度试验
7.4.5 重复性试验
7.4.6 稳定性试验
7.4.7 加样回收率试验
7.5 杜仲种粕HPLC指纹图谱的建立
7.6 化学成分含量的测定
7.6.1 标准曲线的绘制
7.6.2 化学成分含量的测定
7.7 讨论
第八章 杜仲种粕体外抗氧化活性试验
8.1 仪器与试剂
8.1.1 仪器
8.1.2 试剂
8.1.3 试验样品
8.2 试验方法
8.2.1 Trolox标准溶液的配制
8.2.2 样品溶液的制备
8.2.3 DPPH自由基清除法（DPPH）
8.2.4 ABTS自由基清除法（ABTS法）
8.2.5 还原抗氧化能力的测定（FRAP法）
8.2.6 总酚估计法（FC）
8.2.7 总黄酮含量测定
8.3 结果
8.3.1 不同产地杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.2 不同基因型杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.3 略阳县不同产区杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.4 HPLC指纹图谱共有峰,抗氧化特性与产地地理气候因子相关性分析
8.4 讨论
第九章 基于谱效关系的杜仲种粕药用价值评价
9.1 试验方法
9.1.1HPLC指纹图谱方法和共有峰峰面积数据提取
9.1.2 抗氧化试验
9.2 杜仲种粕谱效相关药用价值评价模型的建立
9.2.1 选取BP网络的参数
9.2.2 具体步骤
9.3 PCA主成分分析
9.4 结论
第十章 杜仲果皮中杜仲胶含量比较
10.1 仪器与试剂
10.2 试验材料
10.3 试验方法
10.4 数据分析
10.5 结果
10.5.1 不同来源杜仲翅果果皮中杜仲胶含量
10.5.2 不同来源杜仲翅果资源的果实特征及与杜仲胶含量相关性分析
10.6 讨论
第十一章 结论与展望
11.1 主要结论
11.2 创新点
11.3 有待于进一步解决的问题
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]蔬菜核心种质研究进展[J]. 陈学军,雷刚,周坤华,方荣. 江西农业大学学报. 2015(01)
[2]基于SRAP和SNP分子标记的国内穿心莲遗传多样性分析[J]. 陈蓉,王晓云,宋毓宁,朱云峰,王鹏良,李敏,钟国跃. 中国中药杂志. 2014(23)
[3]杜仲雄花中三萜类化学成分研究[J]. 丁艳霞,王腾宇,张耀文,黄玉梅,马琳,李冬冬,窦德强,李钦. 中国中药杂志. 2014(21)
[4]太子参种子品质检验方法及质量分级标准研究[J]. 肖承鸿,周涛,江维克,陈敏,熊厚溪,廖明武. 中国中药杂志. 2014(16)
[5]传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究[J]. 任风鸣,胡开治,刘燕琴,焦雁翔,刘杰,罗敏,全健. 中国中药杂志. 2014(12)
[6]中药“质效代关联”研究方法与理论的建立[J]. 王晶娟,刘洋,赵保胜,汪国鹏,郭怡祯,张雷,隗丽,杨文宁,武亚楠. 中草药. 2014(11)
[7]杜仲雌雄株叶高效液相色谱指纹图谱和次生代谢产物的含量比较[J]. 叶东旭,李钦,杜红岩,杜兰英,付建敏. 时珍国医国药. 2014(05)
[8]杜仲叶化学成分的研究[J]. 杨芳,岳正刚,王欣,张修朋,柴江,崔九成,宋小妹,梅其炳. 中国中药杂志. 2014(08)
[9]3个杜仲品种叶片性状及活性成分质量分数[J]. 朱景乐,杜红岩,李芳东,赵阳,孙志强,王彬. 东北林业大学学报. 2014(03)
[10]杜仲叶总提取物治疗去势大鼠骨质疏松症的实验研究[J]. 饶华,徐贤柱,王曼莹. 江西医药. 2014(02)
硕士论文
[1]BP神经网络的改进研究及应用[D]. 刘天舒.东北农业大学 2011
本文编号：3386317
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：143 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 杜仲的研究进展
1.1.1 杜仲种质资源分布
1.1.2 杜仲引种情况
1.1.3 杜仲各部位化学成分研究
1.1.4 杜仲药理学研究进展
1.2 杜仲产业开发利用现状
1.2.1 杜仲的开发利用历史
1.2.2 杜仲在园林观赏中的应用
1.2.3 杜仲在食品药品保健品开发中的应用
1.2.4 杜仲胶的开发利用研究
1.2.5 杜仲果实的开发利用价值
1.3 药用植物种质资源
1.3.1 药用植物核心种质的构建
1.3.2 药用植物遗传多样性分析
1.4 中药材质量评价及质量标准研究
1.4.1 中药材质量评价
1.4.2 药用植物质量标准的研究
1.5 本研究的目的与意义
第二章 种质资源的收集
2.1 试验材料的来源
2.1.1 全国范围内的主要产区的样品。
2.1.2 不同种内变异类型及优良无性系的样品
2.1.3 主产区内不同树龄和不同立地条件的样品
2.1.4 略阳主产区内行政区域的样品
2.2 产地地理气候因子
第三章 杜仲种质资源遗传多样性研究及核心种质的构建
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 基因组DNA的提取与检测
3.1.3 PCR反应及正交试验设计
3.1.4 引物的设计和筛选及PCR扩增
3.1.5 扩增结果检测及数据处理分析
3.2 结果与分析
3.2.1 基因组DNA检测结果
3.2.2 正交试验结果及分析
3.2.3 引物筛选结果
3.2.4 分子标记的多态性
3.2.5 全国不同产地杜仲遗传多样性及种群结构分析
3.2.6 不同基因型杜仲遗传多样性
3.2.7 略阳杜仲遗传多样性分析
3.3 讨论
3.3.1PCR扩增体系优化与引物筛选
3.3.2 不同产地杜仲遗传多样性
3.3.3 不同基因型杜仲遗传多样性
3.3.4 略阳县不同产区杜仲遗传多样性
第四章 杜仲核心种质库的构建
4.1 材料与方法
4.2 结果与分析
4.2.1 聚类分析
4.2.2 杜仲核心种质构建及其评价
4.3 讨论
第五章 杜仲种子检验规程及质量标准研究
5.1 杜仲种子质量分级标准
5.1.1 试验材料的来源
5.1.2 种子检验流程图
5.1.3 扦样
5.1.4 净度分析
5.1.5 发芽测定
5.1.6 真实性鉴定
5.1.7 含水量测定
5.1.8 生活力的测定
5.1.9 重量测定
5.1.10分级标准制定
5.2 结果与分析
5.2.1 杜仲种子质量分析结果
5.2.2 相关性分析
5.2.3 聚类分析及种子质量分级标准的制定
5.3 讨论
第六章 杜仲种子油脂的产量与质量评价
6.1 试验材料、试剂、仪器
6.1.1 试验材料
6.1.2 主要试剂
6.1.3 试验仪器
6.2 试验方法
6.2.1 种子千粒重
6.2.2 杜仲种子油脂的提取
6.2.3 杜仲种子油脂的脂肪酸甲酯化
6.2.4 脂肪酸组成及相对含量测定
6.3 结果与分析
6.3.1 不同产地杜仲种子千粒重、出油率及杜仲种子油脂脂肪酸相对含量比较
6.3.2 不同基因型杜仲种子千粒重、出油率及脂肪酸相对含量比较
6.3.3 略阳不同产区杜仲种子千粒重、出油率及脂肪酸相对含量比较
6.3.4 脂肪酸相对含量间的相关性分析
6.4 讨论
第七章 杜仲种粕HPLC指纹图谱的建立与化学成分分析
7.1 试验仪器
7.2 试剂
7.3 试验样品
7.4 方法
7.4.1 色谱条件
7.4.2 提取方法
7.4.3 专属性试验
7.4.4 精密度试验
7.4.5 重复性试验
7.4.6 稳定性试验
7.4.7 加样回收率试验
7.5 杜仲种粕HPLC指纹图谱的建立
7.6 化学成分含量的测定
7.6.1 标准曲线的绘制
7.6.2 化学成分含量的测定
7.7 讨论
第八章 杜仲种粕体外抗氧化活性试验
8.1 仪器与试剂
8.1.1 仪器
8.1.2 试剂
8.1.3 试验样品
8.2 试验方法
8.2.1 Trolox标准溶液的配制
8.2.2 样品溶液的制备
8.2.3 DPPH自由基清除法（DPPH）
8.2.4 ABTS自由基清除法（ABTS法）
8.2.5 还原抗氧化能力的测定（FRAP法）
8.2.6 总酚估计法（FC）
8.2.7 总黄酮含量测定
8.3 结果
8.3.1 不同产地杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.2 不同基因型杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.3 略阳县不同产区杜仲种粕体外抗氧化活性
8.3.4 HPLC指纹图谱共有峰,抗氧化特性与产地地理气候因子相关性分析
8.4 讨论
第九章 基于谱效关系的杜仲种粕药用价值评价
9.1 试验方法
9.1.1HPLC指纹图谱方法和共有峰峰面积数据提取
9.1.2 抗氧化试验
9.2 杜仲种粕谱效相关药用价值评价模型的建立
9.2.1 选取BP网络的参数
9.2.2 具体步骤
9.3 PCA主成分分析
9.4 结论
第十章 杜仲果皮中杜仲胶含量比较
10.1 仪器与试剂
10.2 试验材料
10.3 试验方法
10.4 数据分析
10.5 结果
10.5.1 不同来源杜仲翅果果皮中杜仲胶含量
10.5.2 不同来源杜仲翅果资源的果实特征及与杜仲胶含量相关性分析
10.6 讨论
第十一章 结论与展望
11.1 主要结论
11.2 创新点
11.3 有待于进一步解决的问题
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]蔬菜核心种质研究进展[J]. 陈学军,雷刚,周坤华,方荣. 江西农业大学学报. 2015(01)
[2]基于SRAP和SNP分子标记的国内穿心莲遗传多样性分析[J]. 陈蓉,王晓云,宋毓宁,朱云峰,王鹏良,李敏,钟国跃. 中国中药杂志. 2014(23)
[3]杜仲雄花中三萜类化学成分研究[J]. 丁艳霞,王腾宇,张耀文,黄玉梅,马琳,李冬冬,窦德强,李钦. 中国中药杂志. 2014(21)
[4]太子参种子品质检验方法及质量分级标准研究[J]. 肖承鸿,周涛,江维克,陈敏,熊厚溪,廖明武. 中国中药杂志. 2014(16)
[5]传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究[J]. 任风鸣,胡开治,刘燕琴,焦雁翔,刘杰,罗敏,全健. 中国中药杂志. 2014(12)
[6]中药“质效代关联”研究方法与理论的建立[J]. 王晶娟,刘洋,赵保胜,汪国鹏,郭怡祯,张雷,隗丽,杨文宁,武亚楠. 中草药. 2014(11)
[7]杜仲雌雄株叶高效液相色谱指纹图谱和次生代谢产物的含量比较[J]. 叶东旭,李钦,杜红岩,杜兰英,付建敏. 时珍国医国药. 2014(05)
[8]杜仲叶化学成分的研究[J]. 杨芳,岳正刚,王欣,张修朋,柴江,崔九成,宋小妹,梅其炳. 中国中药杂志. 2014(08)
[9]3个杜仲品种叶片性状及活性成分质量分数[J]. 朱景乐,杜红岩,李芳东,赵阳,孙志强,王彬. 东北林业大学学报. 2014(03)
[10]杜仲叶总提取物治疗去势大鼠骨质疏松症的实验研究[J]. 饶华,徐贤柱,王曼莹. 江西医药. 2014(02)
硕士论文
[1]BP神经网络的改进研究及应用[D]. 刘天舒.东北农业大学 2011
本文编号：3386317
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