单端孢霉烯族毒素在接种及诱抗马铃薯块茎中的积累及T-2毒素对块茎诱抗的蛋白组学分析

发布时间：2022-07-22 15:00

　　干腐病是马铃薯块茎贮藏期间的重要病害,多种镰刀菌与该病有关,其中F.sulphureum,F.sambucinum和F.solani是我国西北地区的主要病原物。干腐病不仅导致块茎贮藏期间的巨大经济损失,而且会在块茎体内积累大量的真菌毒素,其中以单端孢霉烯族类毒素的积累量最大。本文以感病和抗病马铃薯品种（陇薯3号和陇薯6号）为材料,采用超高压液相色谱-三重四级杆质谱（UPLC-MS/MS）技术分析了感病块茎组织中的单端孢霉烯族毒素;研究了马铃薯品种、镰刀菌菌种和贮藏温度对单端孢霉烯族类毒素积累的影响;探讨了硅酸钠、壳聚糖和β-氨基丁酸3种诱抗剂处理对干腐病及单端孢霉烯族毒素的控制效果;通过蛋白组学等方法阐明了T-2毒素在诱导块茎抗干腐病的诱抗机理。结果表明:1.开发的UHPLC-MS/MS方法适合于同时测定F.sulphureum损伤接种块茎中4种单端孢霉烯族毒素（A型:T-2,DAS;B型:3ADON,Fus-X）的定性和定量测定。该法线性回归系数R≥0.9995、回收率113.28-77.97%、精密度RSD≤5.89、检出限（LOD）0.002-0.005μg/g;检出量（LOQ）... 

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【学位级别】：博士

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摘要
SUMMARY
缩写词 Abbreviation
第一章 文献综述及立题依据
    1. 马铃薯块茎干腐病的发生及单端孢霉烯族毒素的积累
        1.1 马铃薯块茎的干腐病
        1.2 单端孢霉烯族毒素的检测与毒性
        1.3 单端孢霉烯族素的代谢及影响因素
    2. 诱抗剂处理对果蔬采后病害的控制及其作用机理
        2.1 壳聚糖
        2.2 硅酸钠
        2.3 β-氨基丁酸
    3 ITRAQ技术及其在果蔬采后研究中的应用
        3.1 iTRAQ技术概述
        3.2 iTRAQ技术在果蔬采后研究中的应用
    4 本研究内容与技术路线
        4.1 当前研究存在的问题与不足
        4.2 本研究的主要内容
        4.3 技术路线
第二章 干腐病马铃薯块茎中单端孢霉烯族毒素的检测
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料与试剂
        2.2 仪器与设备
        2.3 溶液的配制
        2.4 样品的处理
        2.5 UHPLC-MS/MS检测分析
        2.6 方法的验证
        2.7 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 提取与净化
        3.2 选择性
        3.3 准确度和精密度
        3.4 线性和检测限
        3.5 样品分析
    4.讨论
    5 小结
第三章 马铃薯品种、镰刀菌菌种和贮藏温度对块茎体内单端孢霉烯族毒素积累的影响
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 样品分析
        2.4 数据处理与统计
    3 结果与分析
        3.1 不同马铃薯品种和镰刀菌菌种对块茎切片病斑直径的影响
        3.2. 贮藏温度对块茎切片病斑直径的影响
        3.3 马铃薯品种和镰刀菌菌种对单端孢霉烯族毒素积累的影响
        3.4 贮藏温度对单端孢霉烯族毒素积累的影响
        3.5 单端孢霉烯族毒素在干腐病块茎病部及周围健康组织中的分布
    4. 讨论
    5 小结
第四章 三种诱抗剂处理对马铃薯块茎中单端孢霉烯
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 数据处理与统计分析
    3 结果与分析
        3.1 诱抗剂处理对损伤接种块茎病斑直径的影响
        3.2 培养时间对损伤接种块茎体内单端孢霉烯族类毒素积累的影响
        3.3 诱抗剂处理对损伤接种的块茎体内单端孢霉烯族类毒素积累影响
    4 讨论
    5 小结
第五章 蛋白组学方法分析T-2 毒素处理对马铃薯块茎诱导抗性机理
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 数据统计分析
    3 结果与分析
        3.1 T-2 处理对马铃薯块茎切片接种F. sulphureum病斑直径的影响
        3.2 样品总蛋白提取效果比较
        3.3 蛋白质定量与SDS-PAGE鉴定结果
        3.4 iTRAQ鉴定蛋白基本信息
        3.5 iTRAQ鉴定差异蛋白分析
    4 讨论
        4.1 T-2 毒素处理对块茎切片病斑直径的影响
        4.2 马铃薯块茎蛋白提取方法比较
        4.3 T-2 毒素处理对防卫胁迫相关蛋白质积累的影响
        4.4 T-2 毒素处理对蛋白质合成、定向及贮藏相关蛋白质积累的关系
        4.5 T-2 毒素处理对能量代谢相关蛋白质积累的影响
    5 小结
全文总结与创新点
    1 主要结论
    2 本文创新点
参考文献
附表
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]低质量浓度T-2处理对马铃薯块茎苯丙烷代谢活性的诱导[J]. 赵莹,薛华丽,毕阳,唐亚梅,沈科萍.  食品科学. 2015(06)
[2]绝对和相对定量的等量异位标签技术（iTRAQ）在中医药领域的应用[J]. 罗丁,樊小农,石学敏.  辽宁中医杂志. 2014(08)
[3]硫色镰刀菌（Fusarium sulphureum）体外产毒条件的筛选[J]. 唐亚梅,薛华丽,毕阳,赵莹,沈科萍,王毅.  食品科学. 2014(11)
[4]β-氨基丁酸结合壳聚糖处理对苹果采后青霉病的防治效果与机理[J]. 张维,周会玲,袁仲玉,张春云,温晓红.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(10)
[5]植物UDP-糖基转移酶生化特性和功能研究进展[J]. 姬向楠,何非,段长青,王军.  食品科学. 2013(09)
[6]纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析锦灯笼提取物中的蛋白质[J]. 于海洋,晏嘉泽,郭明,靳艳.  色谱. 2013(04)
[7]不同愈伤时间对低温贮藏期间马铃薯块茎采后病害及品质的影响[J]. 包改红,毕阳,李永才,吴觉天,寇宗红,葛永红,王毅,王蒂.  食品工业科技. 2013(11)
[8]固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中T-2毒素及其主要代谢产物[J]. 赵燕华,林妮妮,郭磊,陈佳,刘万卉,谢剑炜.  分析化学. 2012(12)
[9]麻竹叶片蛋白质双向电泳体系的建立[J]. 杨惠琴,乔桂荣,蒋晶,刘明英,姜彦成,卓仁英.  竹子研究汇刊. 2012(03)
[10]天山雪莲UDP葡萄糖-类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及功能分析[J]. 唐亚萍,原慧,覃建兵.  生物工程学报. 2012(06)

博士论文
[1]壳聚糖和硅酸钠对马铃薯块茎干腐病的控制及其机理研究[D]. 李永才.兰州大学 2007

硕士论文
[1]基于蛋白质组学的BTH处理对厚皮甜瓜果实成熟衰老的调控机理研究[D]. 李欣.甘肃农业大学 2014
[2]蜡梅脱氢抗坏血酸还原酶基因的克隆与功能初步分析[D]. 林静.西南大学 2010



本文编号：3664825