细粒棘球绦虫及驱虫药—吡喹酮和狂犬病弱毒疫苗复合剂的研究

发布时间：2017-05-25 18:17

  本文关键词：细粒棘球绦虫及驱虫药—吡喹酮和狂犬病弱毒疫苗复合剂的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：细粒棘球蚴病(cystic echinococcosis,也称包虫病)是世界性分布的人兽共患寄生虫病,内蒙古自治区是全国包虫病的重点防控地区,但对本病的认识与治理一直没有引起应有的重视,防控效果一直不理想。本研究对内蒙古地区细粒棘球蚴和细粒棘球绦虫(E chinococcus granulosus)的主要宿主进行了流行病学调查,并且对细粒棘球蚴内蒙古株的CO1、ND1基因进行了遗传进化分析。同时研制了细粒棘球绦虫驱虫药—吡喹酮与狂犬病弱毒疫苗的复合制剂。研究结果如下：1.终末宿主-犬体细粒棘球绦虫抗原检测结果表明：内蒙古地区犬细粒棘球绦虫病高发区分别为,乌拉特中旗、东乌旗、西乌旗、四子王旗,锡林浩特市。样品阳性率由高至低分别为20%、13.8%,13.3%、8%、3.8%。2.中间宿主羊,牛,人感染情况结果显示：西乌旗成年羊细粒棘球蚴感染率低；幼年羊与牛均未发现感染细粒棘球蚴病。6名疑似包虫病患者手术摘取包囊后,寄生虫学检测结果证实为细粒棘球蚴感染。3.中国内蒙古地区人株、羊株CO1基因序列长度均为936bp,通过Blastp同源性比对,发现羊株细粒棘球蚴CO1基因序列与蒙古国细粒棘球蚴的CO1基因序列相似性最高,人株细粒棘球蚴CO1序列与伊朗细粒棘球蚴的CO1基因序列相似性最高,相似性均在99%以上,基因型均是G1型。4.内蒙古地区人株、羊株NDl基因序列长度均为895bp,通过Blastp同源比对,证实羊株细粒棘球蚴ND1序列和人株细粒棘球蚴ND1序列完全相同,内蒙古株ND1基因序列与伊朗细粒棘球ND1基因序列相似性为100%,基因型也均为G1型。5.驱虫药和疫苗复合剂研制过程显示,吡喹酮和狂犬病弱毒疫苗在含1%的吐温-80的乳酸乙酯-异丙醇溶液中比较稳定,后者适宜作为前者的复合溶媒。6.利用高效液相色谱法,分别测定了药物溶液和吡喹酮-狂犬病弱毒苗复合剂中的吡喹酮含量均在90%以上,符合要求。上述溶液和制剂置于保存狂犬病疫苗的条件下,无沉淀发生,药物含量、pH值、澄明度都符合要求。7.吡喹酮-狂犬病弱毒苗复合剂小鼠异常毒性实验结果表明：小鼠健康状况良好,无死亡现象；豚鼠局部刺激实验表明：注射部位无明显红肿和充血现象。8.筛选了高效液相色谱法测定家兔血浆中吡喹酮的前处理方法。结果证明,家兔血浆中吡喹酮萃取的理想物质为乙腈；并建立了以乙腈和水对吡喹酮进行梯度洗脱测定吡喹酮含量的HPLC方法。9.实验动物狂犬病弱毒苗-吡喹酮复合剂药代动力学研究显示,血浆中吡喹酮含量的变化趋势与单独吡喹酮溶液给药相比,呈现相似的情形,即给吡喹酮药液或复合剂后,15mmin迅速增加,在1h达到峰值,在4h含量达到低值,此后代谢缓慢,在24h仅能检测到微量吡喹酮成分。
【关键词】：细粒棘球蚴 流行病学 遗传进化 吡喹酮 狂犬病弱毒苗
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S855.9;S859.795
【目录】：

• 摘要3-5
• abstract5-13
• 前言13-34
• 1 细粒棘球绦虫概述13-23
• 1.1 细粒棘球绦虫形态特征13-15
• 1.2 棘球绦虫分类与基因型15-16
• 1.3 细粒棘球绦虫病的流行病学16-17
• 1.4 细粒棘球绦虫生活史17-18
• 1.5 细粒棘球绦虫的致病与危害18-19
• 1.5.1 致病作用18-19
• 1.5.2 危害性19
• 1.6 细粒棘球蚴病防治19-21
• 1.7 内蒙古地区细粒棘球绦蚴病流行概况21-23
• 1.7.1 分布21-22
• 1.7.2 流行特征及因素22-23
• 1.7.3 防治23
• 2 狂犬病概况及其在内蒙古地区的流行23-27
• 2.1 流行概况23-26
• 2.2 流行因素及特征26
• 2.3 防治措施26-27
• 3 吡喹酮研究进展27-32
• 3.1 吡喹酮理化性质和结构27-28
• 3.2 吡喹酮药理作用机制28
• 3.3 吡喹酮对机体的作用及检测28-30
• 3.3.1 吡喹酮对机体的作用28-29
• 3.3.2 体内吡喹酮检测技术29-30
• 3.4 吡喹酮的临床应用30
• 3.5 吡喹酮的剂型30-32
• 3.6 吡喹酮的联合用药32
• 4 本研究的目的及意义32-34
• xO究内容34-105
• 一、细粒棘球绦虫的研究34-61
• 研究一 内蒙古地区细粒棘球绦虫病流行病学调查34-44
• 1.1 材料与方法34-37
• 1.1.1 材料34-37
• 1.1.1.1 调查样品34-36
• 1.1.1.2 设备与仪器36
• 1.1.1.3 试剂与药品36-37
• 1.1.2 方法37
• 1.2 结果37-41
• 1.2.1 犬细粒棘球绦虫粪抗原检测结果37-40
• 1.2.2 牛羊细粒棘球绦虫感染调查结果40-41
• 1.3 讨论与小结41-44
• 1.3.1 细粒棘球绦虫终末宿主流行病学调查41-42
• 1.3.2 细粒棘球绦虫中间宿主流行病学调查42-44
• 研究二 细粒棘球绦虫CO1基因与ND1基因序列分子遗传学进化分析44-61
• 2.1 材料与方法44-50
• 2.1.1 材料44-45
• 2.1.2 方法45-50
• 2.2 结果50-59
• 2.2.1 细粒棘球绦虫CO1基因序列相关研究结果50-55
• 2.2.2 细粒棘球绦虫ND1基因序列相关研究结果55-59
• 2.3 讨论与小结59-61
• 二、吡喹酮-狂犬病弱毒苗复合剂的研究61-105
• 研究三 吡喹酮溶液的制备61-73
• 3.1 材料与方法61-64
• 3.1.1 材料61
• 3.1.2 方法61-64
• 3.2 结果64-71
• 3.2.1 复合剂溶媒筛选结果64-67
• 3.2.2 吡喹酮含量测定结果67-69
• 3.2.3 吡喹酮溶液稳定性观察结果69-71
• 3.3 讨论与小结71-73
• 3.3.1 复合剂溶媒的筛选71-72
• 3.3.2 HPLC法对吡喹酮含量的测定72
• 3.3.3 PZQ溶液稳定性的观察72-73
• 研究四 吡喹酮-狂犬病弱毒苗复合剂各组分间相互作用及稳定性研究73-83
• 4.1 材料与方法73-75
• 4.1.1 材料73
• 4.1.2 方法73-75
• 4.2 结果75-81
• 4.2.1 小鼠体内抗体浓度测定结果75-76
• 4.2.2 复合剂中吡喹酮含量测定结果76-79
• 4.2.3 复合剂稳定性实验结果79-81
• 4.3 讨论与小结81-83
• 4.3.1 复合剂给药小鼠体内抗体浓度测定81-82
• 4.3.2 吡喹酮-狂犬病弱毒苗复合剂中PZQ含量测定82
• 4.3.3 复合剂稳定性实验82-83
• 研究五 吡喹酮-狂犬病弱毒疫苗复合剂毒理学试验83-86
• 5.1 材料与方法83-84
• 5.1.1 材料83
• 5.1.2 方法83-84
• 5.2 结果84-85
• 5.2.1 小鼠异常毒性试验结果84
• 5.2.2 豚鼠局部刺激实验结果84-85
• 5.3 讨论与小结85-86
• 研究六 实验动物血浆中复合剂药物成分含量分析86-105
• 6.1 材料与方法86-90
• 6.1.1 材料86
• 6.1.2 方法86-90
• 6.2 结果90-103
• 6.2.1 实验动物血浆中吡喹酮HPLC测定前处理方法筛选结果90-93
• 6.2.2 实验动物血浆中吡喹酮HPLC检测方法建立结果93-97
• 6.2.3 复合剂实验动物吡喹酮血药浓度测定结果97-103
• 6.3 讨论与小结103-105
• 6.3.1 吡喹酮HPLC测定前处理方法筛选103
• 6.3.2 血浆中吡喹酮溶液浓度HPLC检测方法103
• 6.3.3 实验动物吡喹酮血药浓度测定103-105
• 结论105-106
• 本课题创新点106-107
• 致谢107-108
• 参考文献108-118
• 作者简介118

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 焦伟,付承,瞿群,柴君杰,奴尔别克,徐世东,韩新魁,韩玲玲,孙立峰,木汉,也尔夏提;犬用吡喹酮缓释药棒的改进研究[J];地方病通报;2004年03期

2 朱勇;柳建发;;棘球蚴病的免疫学诊断研究进展[J];地方病通报;2007年05期

3 徐雪平;棘球蚴病的流行及控制[J];动物医学进展;2001年03期

4 刘湘新,肖洪波,孙志良;吡喹酮脂质体的制备及包封率测定[J];湖南农业大学学报;1998年03期

5 孙志良,刘湘新,刘进辉,肖洪波,盛忠梅;吡喹酮脂质体对实验动物的毒性作用研究[J];湖南农业大学学报;1998年05期

6 郑新生;姚宝安;王艳蕊;段存争;;高浓度吡喹酮注射剂的研制及对小鼠日本血吸虫病的治疗试验[J];华中农业大学学报;2006年01期

7 贾冬舒,韩继福,马成林,龚倩,马红霞;吡喹酮在绒山羊体内药代动力学的研究[J];吉林农业大学学报;2001年02期

8 刘小红 ,周熙惠 ,刘树强 ,雷春莲;阿苯哒唑和吡喹酮联合剂量递增疗法治疗脑囊虫病11例报告[J];临床儿科杂志;2003年09期

9 熊莉娟,罗端德,曾令兰,蔡淑清;吡喹酮对血吸虫肝纤维化小鼠肝脏TGF-β_1和胶原表达的影响[J];临床内科杂志;2003年04期

10 杨兴民，，倪根珊;吡喹酮的药理与临床[J];中原医刊;1995年08期

  本文关键词：细粒棘球绦虫及驱虫药—吡喹酮和狂犬病弱毒疫苗复合剂的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：394610