尖叶假龙胆与乌腺金丝桃配伍对人肺癌A549细胞影响及其作用机制的研究

发布时间：2017-12-12 12:39

  本文关键词：尖叶假龙胆与乌腺金丝桃配伍对人肺癌A549细胞影响及其作用机制的研究

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【摘要】：目的观察尖叶假龙胆与乌腺金丝桃配伍对人肺癌A549细胞的作用及其相关机制。方法制备含药血清,体外培养人肺癌A549细胞。实验分为空白组、尖叶假龙胆组、乌腺金丝桃组、尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组、尖叶假龙胆与乌腺金丝桃1:2配伍组、尖叶假龙胆与乌腺金丝桃1:1配伍组及阳性药组(5-FU)。应用MTT法检测各组含药血清对人肺癌A549细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测各组含药血清对人肺癌A549细胞凋亡率的影响;应用RT-PCR法检测人肺癌 A549细胞内 FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Bcl-2mRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表达的变化;Western Blot方法检测人肺癌A549细胞内Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Bcl-2、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表达的变化。结果1.MTT法检测结果显示,与空白组比较,各药物组含药血清均可显著抑制人肺癌A549细胞增殖,并具有时间-效应关系;与尖叶假龙胆组及乌腺金丝桃组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组抑制人肺癌A549细胞增殖作用最强。2.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示,与空白组比较,各药物组含药血清均可明显诱导人肺癌A549细胞凋亡;与尖叶假龙胆组及乌腺金丝桃组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组诱导人肺癌A549细胞凋亡作用最强。3.RT-PCR结果显示,与空白组比较,各药物组含药血清均可明显的上调 FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表达并下调 Bcl-2mRNA表达;与尖叶假龙胆组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组可明显的上调FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及Caspase-9mRNA表达并下调Bcl-2mRNA表达;与乌腺金丝桃组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组可明显的上调FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表达并下调 BcI-2mRNA表达;尖叶假龙胆与乌腺金丝桃1:1配伍组可明显的上调Caspase-9mRNA及上调 Caspase-3mRNA表达。4.Western Blot检测结果显示,与空白组比较,各药物组含药血清均可明显的上调Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表达并下调Bcl-2蛋白表达;与尖叶假龙胆组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组可明显的上调Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表达并下调Bcl-2蛋白表达;与乌腺金丝桃组比较,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组可明显的上调Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及 Active Caspase-9蛋白表达并下调Bcl-2蛋白表达;尖叶假龙胆与乌腺金丝桃1:1配伍组可上调 Active Caspase-9及Active Caspase-3蛋白表达。结论1.各药物组含药血清可抑制人肺癌A549细胞增殖,能诱导其凋亡,尖叶假龙胆与乌腺金丝桃2:1配伍组作用效果最强。2.各药物组含药血清诱导人肺癌A549细胞凋亡作用的机制与死亡受体及线粒体信号传导通路有关。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

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本文编号：1282551