雷公藤甲素抑制前列腺肿瘤细胞增殖能力的分子机制研究

发布时间：2017-12-21 09:26

  本文关键词：雷公藤甲素抑制前列腺肿瘤细胞增殖能力的分子机制研究　出处：《西北农林科技大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 雷公藤甲素 castration-resistant前列腺癌 enzalutamide XPB 异种移植

【摘要】：Enzalutamide是用于治疗去势抵抗性前列腺癌(Castration-resistant Prostate Cancer,CRPC)的第二代雄激素受体(Androgen Receptor,AR)拮抗剂。但很遗憾,AR的功能性紊乱意味着患者最终会对enzalutamide产生耐药性。这种功能性紊乱包括AR基因扩增,AR剪接突变体以及AR点突变等,因此急需开发新的药物来治疗这种难治性疾病。雷公藤甲素(Triptolide,TPL)是一种从中药雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook F.)中提取的主要活性化合物,由于其表现出抑制炎症、囊肿、免疫抑制等多种生物活性,特别是TPL的抗肿瘤活性,使其成为药物研究领域的研究热点。已有研究表明TPL在前列腺癌细胞中具有抗癌活性。然而,TPL对CRPC细胞的影响和潜在机制仍处于未知阶段。因此,本文主要以CRPC细胞为模型,研究TPL的抗癌活性以及作用机制,主要取得以下结果:1.通过Qg源和外源性报告基因实验,结果表明低浓度TPL可以抑制AR-FL和AR-Vs(AR-V7和AR-V567es)的转录活性而不改变其蛋白质水平。通过实时定量PCR以及western bloting技术,检测AR以及AR-Vs下游靶基因的mRNA水平以及PSA蛋白含量。结果表明TPL可以显著抑制AR以及AR-Vs下游靶基因的表达,并能下调PSA的蛋白质水平。2.通过使用CDK7选择性抑制剂BS-181和染色质免疫共沉淀技术分析TPL在AR S515磷酸化的作用机制。结果表明TPL下调pAR S515的蛋白质水平,而对CDK7,XPB等一系列蛋白无影响。TPL可以显著抑制AR结合到PSA启动子以及RNA pol II,从而抑制AR转录活性。通过RNA干扰技术敲降XPB,发现其效果与TPL的作用相似。这些结果揭示TPL抑制AR转录活性是通过CDK7/XPB途径抑制AR S515磷酸化得以实现。3.通过多种CRPC细胞模型检测低浓度TPL的细胞毒性,结果表明低浓度TPL可以降低表达AR或AR-Vs的前列腺癌细胞的增殖能力,并诱导细胞凋亡。4.通过MTT实验,细胞克隆形成实验以及Western bloting实验检测TPL和enzalutamide的联合作用效果。结果表明低浓度TPL与enzalutamide具有协同效应,在体外可以抑制CRPC细胞的增殖和克隆形成能力,诱导PARP和Caspase 3的切割。制作22Rv1异种移植瘤模型检测两者的体内效果,发现在CRPC异种移植瘤模型中TPL提高了enzalutamide的抗癌效果。综上所述,本研究的结果表明,TPL通过CDK7/XPB途径抑制AR S515磷酸化从而抑制AR-FL和AR-Vs的转录活性。体内和体外的实验证实TPL是一个治疗CRPC的潜在药物,并可结合enzalutamide来治疗CRPC。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.25

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 饶毅,魏惠珍,席毅,欧阳辉,吕爱平,杨世林;毛细管气相色谱法测定雷公藤中雷公藤甲素[J];中草药;2005年10期

2 刘明星,董静,杨亚江,杨祥良,徐辉碧;雷公藤甲素的研究进展[J];中国中药杂志;2005年03期

3 郑家润;;雷公藤应用研究存在的问题[J];中国中西医结合杂志;2009年02期

4 莫玉洁;朱建华;;雷公藤甲素抗雄性生育作用研究进展[J];科技信息;2013年02期

5 贾力;;雷公藤甲素注射液的稳定性试验[J];中国药学杂志;1985年10期

6 郭晓庄;雷公藤研究新进展——全国第二次雷公藤学术研讨会概况报道[J];综合临床医学;1991年05期

7 张亮,张正行,盛龙生,安登魁;毛细管气相色谱法测定不同产地雷公藤中雷公藤甲素的含量[J];中国药科大学学报;1992年03期

8 李爱群,周蓓,何羿婷;雷公藤甲素透皮吸收特性的初步研究[J];数理医药学杂志;2002年01期

9 毕秀芹,陶君彦,毕晓黎;雷公藤根皮及地上部分的研究进展[J];湖北中医杂志;2004年01期

10 翁小满,Atkinson S,Gorak-Stolinska P,Dockrell H.M;雷公藤免疫调节的体外研究[J];中华微生物学和免疫学杂志;2004年12期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 周祖山;;雷公藤的研究与临床应用[A];全国有毒中药在风湿病治疗中的应用与研究进展学习班讲义[C];2010年

2 田磊磊;谭鹏;李飞;;雷公藤炮制前后雷公藤甲素的含量比较研究[A];2010中药炮制技术、学术交流暨产业发展高峰论坛论文集[C];2010年

3 沈思钰;;雷公藤甲素的研究进展[A];2010年全国中药学术研讨会论文集[C];2010年

4 崔勇;;雷公藤甲素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞释放炎症介质的作用[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

5 黄光照;刘良;韦登明;;雷公藤的毒理病理、临床应用的毒副反应及其拮抗药的研究[A];第四次全国雷公藤学术会议论文汇编[C];2004年

6 叶海英;;雷公藤及其制剂的临床应用研究进展[A];第四次全国雷公藤学术会议论文汇编[C];2004年

7 林娜;刘春芳;贾红伟;肖诚;吴皓;;雷公藤甲素对小鼠胶原性关节炎的抑制作用[A];第四次全国雷公藤学术会议论文汇编[C];2004年

8 黄文华;郭宝林;斯金平;阮秀春;余竞光;孙兰;;雷公藤属3种植物不同群体和个体雷公藤甲素含量研究[A];药用植物研究与中药现代化——第四届全国药用植物学与植物药学术研讨会论文集[C];2004年

9 毕晓黎;周伟雄;黄伟年;杨少强;雷华;倪吉志;;雷公藤根皮及地上部分的研究进展[A];全国中药标准研究学术研讨会论文集[C];2005年

10 沈思钰;;雷公藤甲素的研究进展[A];第5次全国中西医结合男科学术会议论文汇编暨男科提高班讲义[C];2007年

中国重要报纸全文数据库 前6条

1 张美容;泰宁发展雷公藤产业助农增收[N];福建日报;2009年

2 周大彬 通讯员　 蓝云龙 郎卫红;雷公藤产业化发展“底气”足了[N];丽水日报;2006年

3 本报记者 骆志雄;泰宁雷公藤迈入产业化门槛[N];三明日报;2009年

4 本报记者 郑玉容;农业对接项目多[N];福建科技报;2006年

5 张美容;泰宁生物制药产业助农增收[N];三明日报;2009年

6 本报记者 冯磊;中药研究应为临床提供支撑[N];中国中医药报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 沈剑;萃取过程强化的基础研究及在雷公藤甲素分离中的应用[D];浙江大学;2011年

2 李毅;雷公藤甲素对炎性肠病（克罗恩病）肠黏膜免疫系统IL-6/STAT3信号通路的干预机制[D];南京大学;2011年

3 赵飞;雷公藤甲素诱导肿瘤细胞凋亡和自噬的分子机制研究[D];西北农林科技大学;2016年

4 曾嵘;慢性肾脏病—肾间质纤维化易感基因的Meta分析及雷公藤甲素的干预机制研究[D];兰州大学;2016年

5 龙聪;雷公藤甲素对原发性渗出性淋巴瘤细胞的影响及分子机制研究[D];武汉大学;2016年

6 余超;树突状细胞的TLR信号通路在炎症性肠病（克罗恩病）的变化及雷公藤甲素干预机制[D];南京大学;2011年

7 袁凯;雷公藤甲素、雷公藤红素通过调节中性粒细胞活性治疗类风湿关节炎的机制研究[D];北京中医药大学;2017年

8 张伟英;雷公藤甲素联合照射抑制鼻咽癌细胞的作用及机制研究[D];广西医科大学;2017年

9 李如君;去泛素化酶BRCC36对慢性压力超负荷小鼠心脏的保护作用及雷公藤甲素干预的实验研究[D];扬州大学;2017年

10 韩洋洋;雷公藤甲素抑制前列腺肿瘤细胞增殖能力的分子机制研究[D];西北农林科技大学;2017年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 骆锦彬;SRp20蛋白与雷公藤甲素诱导胰腺癌细胞凋亡的相关机制研究[D];福建医科大学;2015年

2 童洋飞;雷公藤甲素对心肌细胞周期抑制因子CDKN1a表达及心肌肥大的影响[D];第三军医大学;2015年

3 樊梅;脒修饰的载雷公藤甲素阳离子脂质体的肾小球靶向给药系统研究[D];成都中医药大学;2015年

4 李猛;雷公藤甲素对人乳腺癌干细胞干性的影响与初步机制研究[D];中国海洋大学;2015年

5 许可嘉;自噬介导的雷公藤甲素肝脏毒性研究[D];北京中医药大学;2016年

6 徐慧慧;雷公藤甲素对Tregs-OC共培养体系中OC分化及骨吸收功能的影响[D];北京中医药大学;2016年

7 周雪;MSCs上清缓解雷公藤甲素损害卵巢颗粒细胞机制的探究[D];南京大学;2014年

8 饶明锦;天然小分子雷公藤甲素抑制Hedgehog信号通路活性研究[D];华东师范大学;2015年

9 付阳;膀胱灌注雷公藤甲素对大鼠膀胱癌的作用及其机制研究[D];东南大学;2015年

10 焦晓琳;雷公藤甲素诱导K562/G01细胞凋亡的MDM2-P53机制研究[D];山西医科大学;2016年

，

本文编号：1315552