AXL在去势抵抗性前列腺癌多西他赛耐药中的作用及机制研究

发布时间：2017-12-29 19:27

本文关键词：AXL在去势抵抗性前列腺癌多西他赛耐药中的作用及机制研究　出处：《南京医科大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:中晚期前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者往往在内分泌治疗一段时间后逐渐对激素产生非依赖而发展为去势抵抗前列腺癌(castration resistant prostate cancer,CRPC),多西他赛化疗是CRPC重要治疗手段,但由于获得性耐药的发生,严重影响了其临床治疗效果,目前CRPC多西他赛耐药的机制尚不明确。AXL是近年来发现的一种受体酪氨酸激酶,有研究表明,AXL在肿瘤耐药中发挥了重要作用,但其在CRPC多西他赛耐药中的作用尚不清楚。本研究的目的是探索AXL在CRPC多西他赛耐药中的作用及机制研究。方法:通过间断递增浓度的多西他赛刺激CRPC细胞株PC3和DU145,建立耐药株PC3-DR和DU145-DR,应用western-blotting(WB)首先检测细胞株耐药前后的AXL蛋白表达变化,应用配体Gas6刺激亲本和耐药细胞,观察AXL蛋白表达变化。分别应用MTT(或CCK8)、流式细胞仪和Transwell法检测AXL抑制(干扰或抑制剂)单独或联合多西他赛对耐药细胞增殖、凋亡和迁移侵袭能力的影响;其次,通过DU145-DR注射裸鼠皮下,建立耐药荷瘤鼠模型,观察AXL抑制剂单独或联合多西他赛对耐药瘤体生长的影响。再次,应用WB和免疫荧光体内外检测AXL表达变化单独或联合多西他赛对CRPC细胞EMT标志物、ABCB1和Bcl2蛋白表达水平的影响。结果:AXL在耐药株的表达水平明显高于亲本细胞(P0.05),但其配体Gas6在前者中的表达明显低于后者(P0.05)。AXL过表达可促进细胞耐药,抑制AXL表达可逆转耐药(P0.05),AXL表达下降可明显抑制耐药细胞增殖和迁移侵袭,促进细胞凋亡(P0.05),且和多西他赛联用后的效应明显高于单一处理(P0.05)。AXL抑制剂可明显降低耐药瘤体的生长(P0.05),且和多西他赛联用抑制作用更强(P0.05)。AXL表达下降可明显抑制耐药细胞EMT、ABCB1和Bcl2表达(P0.05),且和多西他赛联用后对上述相关蛋白的抑制作用明显高于单一处理(P0.05)。AXL抑制剂MP470可致耐药细胞G2/M期细胞百分数升高,MP470和多西他赛联合处理组的G2/M期细胞百分数明显高于单独处理组(P0.05)。结论:AXL表达上调在CRPC多西他赛耐药中发挥重要作用,且AXL在耐药细胞中是以Gas6非依赖性方式激活的。抑制AXL表达可降低耐药性。AXL在耐药中的作用可能和其促进细胞EMT,ABCB1、Bcl2表达上调及细胞G2/M期百分数上调有关。
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【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.25

【参考文献】