血脂异常肝肾阴虚、气滞血瘀、阴虚阳亢三证的代谢组学研究

发布时间：2018-01-01 09:03

本文关键词：血脂异常肝肾阴虚、气滞血瘀、阴虚阳亢三证的代谢组学研究　出处：《北京中医药大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的1.通过观察血脂异常不同中医证候单核细胞趋化蛋白1(Monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)、巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)、乳脂球表皮生长因子8(milk fat globule EGF factorⅧ,MFG-E8)的特点及其与证候评分的相关性,旨在发现中医证候的严重程度与炎症因子的关系,为中医证候的标准化、客观化辨证提供一定的依据。2.研究血脂指标、血浆致动脉硬化指数(atherogenic index of plasma,AIP)在血脂异常不同中医证候间的特点,并进一步研究他们与证候评分的相关性,旨在发现中医证候的严重程度与动脉粥样硬化的关系(AS),为中医辨证论治治疗血脂异常和AS提供一定的临床依据。3.运用代谢组学手段研究血脂异常不同中医证候间代谢模式的差别,探寻血脂异常不同中医证候间的差异代谢物,得到代谢图谱,进而分析不同证候间差异代谢通路,可以反映不同证候间代谢网络的变化,丰富证候的科学内涵,丰富证治代谢体系,拓展证候辨识体系提供依据,为中医辨证防治血脂异常提供坚实的科学依据。分析血脂异常患者和健康对照患者的代谢模式的差别,探讨血脂异常发生的标志代谢物和代谢通路。方法1.不同证候血脂异常患者血清炎症因子的研究:采用流行病学横断面研究方法,应用酶联免疫吸附法(Elisa)测定120例不同中医证候患者的MCP-1、MIF、MFG-E8的浓度,并完成中医证候评分,分析不同证候患者MCP-1、MIF、MFG-E8的特点,并对MCP-1、MIF、MFG-E8指标与中医证候积分进行相关性分析。2.不同证候血脂异常患者血脂指标、AIP的研究:采用流行病学横断面方法研究120不同中医证候血脂异常患者,于本院检验科行血脂检测(TC、TG、HDL、LDL),同时对中医证候进行评分,研究不同中医证候间血脂指标、AIP的特点,并对血脂指标、AIP与中医证候积分进行相关性分析。3.不同中医证候血脂异常患者血清代谢组学研究:采用流行病学横断面的研究方法,纳入54例血脂异常患者,其中肝肾阴虚证、气滞血瘀证、阴虚阳亢证患者各18例,10例健康体检者作为对照组;进行血清样品采集后,应用气相色谱质谱(GC-MS)方法,应用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(GC-TOFMS),用SIMCA软件进行多元数据分析,应用通过PCA(principal component analysis)分析,正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等分析方法获得不同证候间的血清代谢轮廓;并绘制载荷图,然后进行差异化合物筛选和鉴定,再经过层次聚类分析,筛选采用KEGG数据库,代谢通路分析通过MetaboAnalySt3.0代谢通路分析,最后再进行代谢通路拓扑分析。结果1.不同中医证候与炎症因子的相关性:①实验组与对照组比较,实验组炎症因子明显高于对照组,且P0.05;②实验组不同中医证候间炎症因子有差异:MCP-1的浓度比较:阴虚阳亢组肝肾阴虚组气滞血瘀组;MIF的浓度比较:阴虚阳亢组肝肾阴虚组气滞血瘀组;MFG-E8的浓度在不同组间的比较:气滞血瘀组肝肾阴虚组阴虚阳亢组;③不同中医证候积分与炎症因子的相关性:a.肝肾阴虚证证候积分同MCP-1(r=0.322,P=0.043)、MFG-E8(r=0.322,P=0.043)呈正相关 b.阴虚阳亢组证候评分与MCP-1(r=0.324,P=0.042)、MFG-E8(r=0.321,P=0.043)呈正相关 c.气滞血瘀组证候积分同MIF(r=0.366,P=0.020)呈正相关;2.不同中医证候间血脂指标、AIP的相关性研究:①血脂指标研究:a.实验组与对照组比较,实验组的TC、TG、HDL、LDL的水平均高于对照组,且有统计学差异,P0.05;b.不同中医证候评分与血脂指标间有相关性:肝肾阴虚组证候评分与TC呈正相关(r=0.491);阴虚阳亢组证候评分与HDL呈负相关(r=-0.413),且具有显著意义(P＜0.01);气滞血瘀组证候评分与HDL呈负相关(r=-0.282)。②不同中医证候与AIP的关系:a.浓度比较:气滞血瘀组肝肾阴虚组阴虚阳亢组;b.不同中医证候积分与AIP的相关性,肝肾阴虚证(R=0.459,P=0.003)与气滞血瘀证(R=0.358,P=0.023)与AIP呈正相关,R0.3,P0.05;③血脂异常的发生与年龄、有无稳定职业、体重指数、家族史有关。3.不同中医证候血脂异常患者代谢组学特征分析:①血脂异常组患者与健康对照组患者在代谢模式上有显著差异:a.血脂异常患者的甘油、1,3丙二胺、丙苯氨酸、月桂酸、二十炭-11-烯酸、甘油单油酸脂代谢较正常组比较是上调的;b.血脂异常患者在代谢通路上与健康对照组有差别:ABC转运蛋白、脂肪酸生物合成、β丙氨酸代谢途径。②不同中医证候血脂异常患者代谢模式有差异:a.肝肾阴虚组较健康对照组的差异代谢产物有14种,硬脂酸、核酸糖、甘油、尿酸、苯丙氨酸、二十炭-11-烯酸、单油酸酯、月桂酸、氨基异丁酸、己烯二酸、1,3-丙二胺、N乙酰-β-丙氨12种是上调的,单硬脂酸甘油酯、尿苷2种是下调的;b.气滞血瘀组与健康对照组比较有33种差异代谢物:上调的有尿酸、丙二胺、亚油酸、软脂酸、硬脂酸、甘油、花生四烯酸、羟胺、胱氨酸、十七烷酸、月硅酸、1,2-环己烷二酮、N-乙基甘氨酸2、N-乙酰-β-丙氨酸等16种物质都是上调的,苯基丙酸、丙烯酸、顺式二十碳-11-烯酸、甘油一硬脂酸酯、甘油单油酸酯、葡庚糖,葡萄庚糖、赤藓糖、葡庚糖酸、羟基苯甲酸、羟基正缬氨酸、庚二酸、甘油磷酸、羟基脲、环己基氨基磺酸、苯基乳酸、3-UPA、顺芥子酸等17种物质都是下调的;c.阴虚阳亢组与健康对照组比较有20种差异代谢物:十六酸、棕榈油酸、柠檬酸、甘油、十四酸、葡萄糖-1-磷酸、月桂酸、色氨酸等11种物质是上调的,苯基乳酸、芥子醇、苯丙氨酸、水杨酸等9种物质是下调的。结论1.血脂异常组炎症因子较正常组反应活跃,要在治疗血脂异常时可以配合抗炎治疗。AIP、HDL可以作为血脂异常气滞血瘀证的客观化的指标之一;TC、AIP、MCP-1、MFG-E8可以作为血脂异常肝肾阴虚证的客观化指标;MCP-1、MFG-E8、HDL可以作为血脂异常阴虚阳亢的客观化指标之一。2.代谢组学的研究说明血脂异常不同中医证候是可分的,并且筛选出了差异代谢物和代谢通路;实验组与对照组比较代谢模式有差异,可以尝试将ABC转运蛋白、脂肪酸生物合成、β丙氨酸代谢通路作为血脂异常的识别通路。从代谢层面证明了中医证候的科学性和可辨性,并且为中医证候的客观化、可视化、现代化提供了一定的借鉴。
[Abstract]:Objective 1 . To study the relationship between the severity of TCM syndrome and the relationship between TCM syndromes and the correlation between TCM syndrome differentiation and TCM syndrome differentiation , and to study the relationship between the severity of TCM syndrome and the relationship between TCM syndromes . The serum metabolic profiles of different TCM syndromes were studied by means of PCA ( principal component analysis ) and orthogonal partial least squares - discriminant analysis ( OPLS - DA ) . There was a positive correlation between syndrome score of deficiency - yang hyperactivity group ( r = 0.324 , P = 0.042 ) and blood - stasis syndrome ( r = 0.321 , P = 0.043 ) .

【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R259

【参考文献】