脓毒症复苏中细胞能量衰竭的临床与实验研究

发布时间：2018-03-04 09:35

  本文选题：脓毒症　切入点：细胞能量衰竭　出处：《北京协和医学院》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的在脓毒症患者复苏中,联合PI和Ratio识别乳酸未清除和复苏失协调关系,阐述Ratio在细胞能量复苏中的应用价值;在脓毒症兔模型中研究Panx-1通道蛋白在细胞能量衰竭中的作用机理。方法1.临床部分:前瞻性观察2013年11月-2014年2月北京协和医院重症医学科收治的脓毒症患者,在患者入室(T0)和入室后8小时(T8)分别测量及记录患者血流动力学相关参数、外周灌注指数(PI)、中心静脉血气+动脉血气分析;定义8小时乳酸清除(8h-LC)≥10%为乳酸清除,8h-LC10%为乳酸未清除;另根据T8时的PI值定义:PI≥1.4外周灌注恢复正常组,1.4PI0.6为外周灌注轻度损害组,PI≤0.6为外周灌注严重损害组;2.试验部分:日本大耳白兔随机分四组,对照组(Control)6只、阻断Panx-1对照组(Control + Pro)6只、内毒素组(LPS)6只、阻断Panx-1内毒素组(LPS +Pro)6只。通过静脉注射丙磺舒(Probenecid,Pro)进行阻断Panx-1通道释放ATP。各组动物在0(0h)、T1(1h)、T2(2h)三个时间点分别记录血流动力学参数并行血气分析。T2时间点抽血测血清中ATP、炎症因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)水平,并留取骨骼肌组织测量ATP、ADP、ATP/ADP含量,处死动物后分别留取骨骼肌、心脏、肾脏组织行HE染色病理切片。此外,LPS组在T0和T1抽血行外周血细胞Panx-1蛋白检测、并在对照组和LPS在T2时留取骨骼肌标本行Panx-1含量测定。结果:1.临床部分:前瞻性观察研究共纳入84名脓毒症患者,共进行168对动-静脉血气分析检测:①.复苏后T8时,8h-乳酸清除率于P(v-a)CO2(r=-0.226,P=0.039)、P(v-a)CO2/C(a-v)O2 ratio(r=-0.218,P=0.046)与呈显著负相关,而与PI呈显著正相关(r=0.266,P=0.014),但8h-乳酸清除率与ScvO2、C(a-v)02、MAP和CVP均无显著相关性.②.复苏后在T8时,乳酸清除组(n=50)的P(v-a)CO2gap,P(v-a)CO2/C(a-v)02ratio显著低于乳酸未清除组(n=34),而PI显著高于乳酸未清除组;③.在T8时ScvO2达标(≥70%)的亚组中(n=65),复苏后T8 P(v-a)CO2/C(a-v)02 ratio与8h乳酸清除仍呈显著负相关,复苏后T8 ratio1.23预测8h-LC10%的敏感性为91.7%和特异性为53.7%,相应的ROC曲线下面积为0.769;④.复苏后外周灌注恢复组(PI≥1.4)的乳酸清除人数的比例显著高于外周灌注严重损害组(PI0.6)(71%vs37%,χ2 = 6.591,P=0.01);在外周灌注恢复正常(PI≥1.4)的亚组中(n=45),乳酸清除32例,乳酸未清除13例,乳酸未清除的患者T8 P(v-a)CO2/C(a-v)02 ratio显著高于乳酸清除的患者,而PI、Scv02、MAP、P(v-a)CO2两者间无显著差异;⑤.多因素二元逻辑回归分析,发现P(v-a)CO2/C(a-v)O2 ratio(Eχp(B)2.235,95%CI 1.232-4.055,P=0.008)是乳酸未清除的独立危险因素。2.试验部分:①.LPS组在注射LPS后,外周血细胞的Panx-1蛋白表达较TO时显著增加;LPS组骨骼肌Pan-1蛋白表达较对照组亦显著增加;②.LPS组炎症因子(TNF-a,IL-6,IN-1β)与外周血清中ATP水平较对照组显著增加,而骨骼肌组织ATP含量、ATP/ADP显著下降;炎症因子(TNF-a,IL-6,IL-1β)与外周血清ATP水平呈显著正相关;③.LPS+Pro组炎症因子、外周血清ATP水平、血乳酸水平较LPS组显著下降,而骨骼肌组织中ATP含量、ATP/ADP比率呈显著增加;此外,LPS+Pro组骨骼肌组织、心脏组织、肾脏组织HE染色切片提示病理损害较LPS组减轻。结论:脓毒症复苏时,Ratio和PI与复苏后乳酸未清除相关,联合Ratio和PI可识别复苏后组织灌注失协调关系,为优化乳酸清除提供新的临床思路;Ratio作为反映细胞无氧代谢的指标,有助识别Scv02正常化及PI正常化后的乳酸未清除,是细胞能量复苏的潜在终点。Panx-1异常表达增加介导细胞外排ATP是脓毒症细胞能量衰竭和器官病理损害重要的病理生理机制之一,阻断Panx-1介导细胞外排APT通过有效地降低系统中细胞外ATP水平、减少ATP消耗、减轻炎症反应来改善脓毒症时细胞能量衰竭和器官病理损害,Panx-1可作为未来脓毒症治疗的新位点。
[Abstract]:In the recovery of patients with sepsis, combined with PI and Ratio to identify lactic acid not clear coordination and failure recovery, expounds the application value of Ratio in cellular energy recovery; Study on Mechanism of Panx-1 channel protein in cellular energy failure in rabbit model of sepsis. Methods 1. clinical part: prospective observation of -2014 in November 2013 February 2009 in Peking Union Medical College Hospital ICU patients with sepsis admitted, in patients (T0) and home after 8 hours (T8) were measured and recorded hemodynamic parameters, peripheral perfusion index (PI), vein blood + blood gas analysis center; definition 8 hours lactate clearance (8h-LC) was removed 10% 8h-LC10% lactic acid, lactic acid is not clear; the other is defined according to the T8 PI value: PI = 1.4 peripheral perfusion recovery in normal group, 1.4PI0.6 peripheral perfusion mild damage group, PI = 0.6 for peripheral perfusion damage group; 2. part test :鏃ユ湰澶ц，

本文编号：1565142