hENT1、CREPT与胰腺癌化疗耐药及预后关系的研究

发布时间：2018-03-31 15:02

  本文选题：胰腺癌　切入点：人平衡核苷转运体1　出处：《北京协和医学院》2017年博士论文

【摘要】：研究背景胰腺癌发病隐匿、进展快、恶性度高、预后极差,发病率和死亡率几乎相同。化疗耐药是目前胰腺癌研究的瓶颈,寻找化疗耐药标记物,预测个体化疗疗效,制定个体化化疗方案是改善胰腺癌患者预后的重要手段。hENT1是吉西他滨进入细胞的主要转运体,有文献报道其可能与胰腺癌化疗耐药性相关。然而,目前关于hENT1与胰腺癌关系的基础研究尚不系统,临床研究方面受患者选择、hENT1检测等影响,结论多不统一。本研究拟通过体外及体内实验系统探索hENT1与胰腺癌细胞表型的关系,并分析肿瘤组织hENT1表达量与胰腺癌患者吉西他滨化疗预后的关系。研究目的探索hENT1与胰腺癌细胞表型的关系,分析肿瘤组织hENT1表达量与胰腺癌患者吉西他滨化疗预后的关系。研究方法检测已有胰腺癌细胞株hENT1表达量。选择hENT1表达量较高的细胞株进行hENT1基因沉默,hENT1表达量较低的细胞株进行hENT1基因过表达,构建稳定过表达/沉默hENT1基因的稳转细胞株及相应阴性对照株。检测hENT1基因对胰腺癌细胞增殖、化疗敏感性、迁移、侵袭的调控作用。构建裸鼠皮下种植瘤模型,进一步检测hENT1对胰腺癌细胞化疗耐药的作用。进行回顾性临床研究,通过免疫组化检测胰腺癌组织hENT1表达量,分析其与胰腺癌患者临床病理学资料的关系。研究结果已有6株胰腺癌细胞中,T3M4细胞hENT1表达量较低,Panc-1细胞hENT1表达量较高。选取T3M4细胞进行hENT1基因过表达,Panc-1细胞进行hENT1基因沉默,构建稳定过表达hENT1基因的T3M4细胞株及其阴性对照株,构建稳定沉默hENT1基因的Panc-1细胞株及其阴性对照株。上调hENT1基因可以增加细胞吉西他滨化疗敏感性,沉默hENT 1基因可以减低细胞吉西他滨化疗敏感性。hENT1基因对于细胞增殖、迁移和侵袭无明显影响。体内实验中发现上调hENT1表达可以增强吉西他滨化疗敏感性。在临床研究方面,44例患者的肿瘤组织hENT1染色均值为119.4。以该均值为分界,定义染色小于或等于120的为hENT1低表达组,染色大于120的为hENT1高表达组。发现肿瘤组织hENT1表达水平和患者预后相关,hENT1高表达患者的无瘤生存时间及总体生存均明显长于hENT1低表达患者(21.75,95%CI 18.45-25.04 VS 12.48,95%CI 10.12-14.85)(15.44,95%CI 11.26-14.85 VS 8.24,95%CI 6.69-9.78)。多因素分析发现hENT1表达量是预后的独立危险因素(HR 0.16 95%CI,0.04-0.59 P=0.006)结论胰腺癌细胞hENT1表达量和胰腺癌吉西他滨化疗预后相关,hENT1有望成为胰腺癌吉西他滨化疗耐药预测指标。研究背景胰腺癌发病隐匿、恶性度高、预后极差。胰腺癌在全部肿瘤死亡原因中排名第四,5年生存率小于5%。除胰腺癌化疗耐药外,缺乏有效的预后指标是困扰胰腺癌临床研究的又一难题。有报道称,CREPT(cell-cycle related and expression-elevated protein in tumor)可能与部分消化道肿瘤预后相关。但CREPT基因与胰腺癌的关系还未见报道,本研究拟通过体外及体内实验,系统探究CREPT对于胰腺癌细胞生物学行为的影响。研究目的探究CREPT对于胰腺癌细胞生物学行为的影响研究方法检测已有胰腺癌细胞株CREPT表达量,构建稳定过表达/沉默CREPT基因的稳转细胞株,检测CREPT对胰腺癌细胞增殖、化疗敏感性、迁移、侵袭的调控作用。通过裸鼠皮下种植瘤实验,检测CREPT基因对胰腺癌细胞体内增殖的影响。研究结果通过检测已有胰腺癌细胞中CREPT表达量,发现T3M4细胞CREPT表达量较高,MIA细胞CREPT表达量较低。通过沉默和上调目标细胞株CREPT基因,构建稳定过表达CREPT基因的MIA细胞株及其对照株,和稳定沉默CREPT基因的T3M4细胞株及其对照株。体外实验中发现:CREPT可以增加胰腺癌细胞吉西他滨化疗耐药性,沉默CREPT基因可以减低细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力。上调CREPT基因对于细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力无明显影响;在体内实验中发现,沉默CREPT基因可以明显减缓小鼠皮下种植瘤生长,上调CREPT基因对于小鼠皮下种植瘤生长无明显影响。结论沉默CREPT基因可以抑制胰腺癌细胞增殖,CREPT可以增加胰腺癌细胞吉西他滨化疗耐药性。CREPT可能成为胰腺癌预后指标。
[Abstract]:The expression of hENT1 gene in pancreatic cancer cells was studied by immunohistochemistry . In vitro and in vivo experiments were carried out to investigate the effect of CREPT on the proliferation of pancreatic cancer cells .

【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.9

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1 肖剑春;hENT1、CREPT与胰腺癌化疗耐药及预后关系的研究[D];北京协和医学院;2017年

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本文编号：1691245