粪便miRNA对结直肠癌的诊断价值
本文选题：结直肠癌 + miRNA ； 参考：《广西医科大学》2017年博士论文
【摘要】：目的:检测结直肠癌患者癌组织、配对癌旁组织及粪便中miRNA的表达情况,评价粪便miRNA对结直肠癌的诊断价值。方法:收集2015年11月至2016年1月广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科收治并手术的40例结直肠癌患者临床资料、术前粪便标本、术中肿瘤组织和相应癌旁组织标本,同时收集20例健康人的粪便作为对照组。分别提取所有组织及粪便中的RNA,经核酸电泳及Nanodrop 1000检测RNA纯度并测定其浓度,经加尾及逆转录。以U6为内参基因,用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各标本中10个目标miRNAs(miRNA17、miRNA18a、miRNA21、miRNA31、miRNA92a、miRNA96、miRNA143、miRNA181b、miRNA221、miRNA222)的表达量。比较结直肠癌组织与相应癌旁组织中各miRNA的表达差异,比较结直肠癌患者与健康人粪便中各miRNA的表达差异,选出差异明显的miRNA,再应用受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)及其曲线下面积(AUC)评估miRNA对结直肠癌的诊断价值。结果:10个目标miRNA在结直肠癌组织、癌旁组织、及粪便样本中均被检测出。癌组织中的miRNA-17、miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-96、miRNA-221的表达高于相应癌旁组织(P0.01);miRNA-143的表达低于相应癌旁组织(P0.01)。结直肠癌患者粪便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a的表达高于健康人粪便(P0.01),miRNA-143的表达低于健康人粪便(P0.05)。相关性分析结果表明,miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143在结直肠癌患者粪便中的表达与癌组织中的表达相关性无统计学意义(P0.05)。根据ROC曲线分析发现:结直肠癌组粪便与健康人粪便相比,miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143两两组合后的AUC均比单个miRNA的AUC高,组合后AUC均大于0.9,miRNA-21+miRNA-143二者组合的AUC达到0.998,敏感度及特异度分别达到了97.5%和95.3%,组间比较差异有统计意义(P0.01)。结论:结直肠癌患者粪便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143的表达与健康人粪便中的表达具有明显差异,可作为结直肠癌诊断的潜在肿瘤标志物,miRNA-21+miRNA-143二者联合检测有望为结直肠癌筛查提供一种无创、敏感性及特异性高的诊断方法。
[Abstract]:Aim: to evaluate the diagnostic value of fecal miRNA in colorectal cancer by detecting the expression of miRNA in adjacent tissues and feces of colorectal cancer patients. Methods: from November 2015 to January 2016, the clinical data of 40 patients with colorectal cancer treated in the first affiliated Hospital of Guangxi Medical University were collected. At the same time, the feces of 20 healthy people were collected as the control group. RNAs from all tissues and faeces were extracted respectively. The purity and concentration of RNA were detected by nucleic acid electrophoresis and Nanodrop 1000, followed by tail and reverse transcription. Using U6 as an internal reference gene, the expression of 10 miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs, miRNAs To compare the expression of miRNA in colorectal cancer tissues and adjacent tissues, and to compare the expression of miRNA in feces of colorectal cancer patients and healthy people. The differential miRNAs were selected and the diagnostic value of miRNA in colorectal cancer was evaluated by using receiver operating characteristic curveroc and its area under the curve. Results: ten target miRNA were detected in colorectal cancer tissues, paracancerous tissues, and stool samples. The expression of miRNA-17 simiRNA-21 mRNA-31mRNA-92aRNA-96mRNA-221 in cancer tissues was higher than that in the corresponding adjacent tissues (P0.01mRNA-143), and the expression of miRNA-143 was lower than that of the corresponding paracancerous tissues (P0.01). The expression of miRNA-21 mRNA-31 miRNA-92a in feces of patients with colorectal cancer was higher than that in feces of healthy people. The results of correlation analysis showed that there was no significant correlation between the expression of miRNA-21 simiRNA-31 simiRNA-92asimiRNA-143 in the feces of patients with colorectal cancer and the expression in cancer tissue (P0.05). According to the analysis of ROC curve, it was found that the AUC of the feces of colorectal cancer group was higher than that of the single miRNA combination after miRNA-21 miRNA-31 miRNA-92a miRNA-143. The AUC of the combination of AUC > 0.9 miRNA-21 miRNA-143 was 0.998, the sensitivity and specificity reached 97.5% and 95.3%, respectively. The difference between the two groups was statistically significant (P 0.01). Conclusion: the expression of miRNA-21 mRNA-31mRNA-92aRNA-143 in feces of patients with colorectal cancer is significantly different from that in healthy human feces. The combined detection of miRNA-21 miRNA-143 and miRNA-21 miRNA-143 may provide a non-invasive method for colorectal cancer screening. A highly sensitive and specific diagnostic method.
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.34
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，本文编号：1781257
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