海水浸泡大鼠坐骨神经损伤的实验研究

发布时间：2017-01-11 14:00

  本文关键词：海水浸泡大鼠坐骨神经损伤的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

《安徽医科大学》 2015年

海水浸泡大鼠坐骨神经损伤的实验研究

王海峰  

【摘要】：周围神经损伤常导致不同程度的永久性的功能障碍。周围神经损伤后神经纤维内环境随之变化,各种局部因素(包括细胞、细胞因子)可影响这种微环境,直接或间接影响周围神经的损伤反应和再生反应。相对于人体的体液,海水是一种高渗、高钠和高碱的环境。既往研究结果表明海水浸泡能加重人体多种器官组织的损伤。肢体开放性损伤所造成的受损神经组织直接与海水发生接触,海水浸泡在某种程度上可能参与并影响神经损伤后的病理生理发展过程。本实验建立一种大鼠坐骨神经钳夹伤合并海水浸泡伤动物模型,观察海水浸泡对大鼠坐骨神经损伤后神经运动功能的影响、电生理学变化、腓肠肌湿重恢复率及病理形态学变化：观察早期使用甲基强的松龙对复合海水浸泡坐骨神经损伤的治疗作用；通过检测损伤局部神经组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-1β(IL-ip)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)含量的变化,探讨海水浸泡加重坐骨神经继发性损伤的机制及早期使用甲基强的松龙的保护作用机制,为下一步有针对性的进行临床治疗提供了重要的理论基础。本研究共分为两部分。在实验一中,我们取234只雄性健康清洁级SD大鼠,随机分成：假手术组(A组)、钳夹损伤对照组(B组)和钳夹损伤+海水浸泡组(C组),每组各78只。分别于术前、术后1d、1w-6w采用坐骨神经功能指数评分(sciatic functional index, SFI)评定神经运动功能；术后6周通过复合肌肉动作电位(compound muscle action potentials, CMAP)观察电生理学变化；苏木精-伊红(hematoxylin and eosin, HE)染色法、镀银染色法及坚固蓝染色法观察病理形态变化；分别于术前、术后2h、6h、4h、48h、1w采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测大鼠坐骨神经组织中ROS、MDA含量,实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测iNOS mRNA表达,免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)检测iNOS蛋白质表达。结果发现：A组大鼠术后坐骨神经功能指数无变化,C组大鼠术后坐骨神经功能指数在各时间点均低于B组,差异有统计学意义(p0.05)。C组的复合肌肉动作电位与其他两组相比,潜伏期延长、振幅和神经传导速度减小,各组间比较差异有统计学意义(p0.05)。HE染色、镀银染色及坚固蓝染色显示C组神经纤维再生劣于B组。A组各时间点ROS、MDA含量无明显变化,B组、C组坐骨神经ROS、MDA含量伤后随时间延长逐渐升高,在术后48h达到高峰,C组在术后各时间点含量均高于其他两组,各组间比较差异有统计学意义(p0.05)。A组坐骨神经中iNOS mRNA及iNOS蛋白表达在各时间点都较低,B组、C组坐骨神经组织中iNOS mRNA及iNOS蛋白表达随时间延长逐渐升高,在术后48h到达高峰,组间各时间点比较有统计学差异(p0.01)。实验结果提示：大鼠坐骨神经损伤合并海水浸泡后,神经损伤程度进一步加重,神经功能恢复劣于单纯坐骨神经损伤,其机制可能与海水浸泡使损伤的神经组织内活性氧、活性氮增加,从而引起神经组织氧化应激、硝化应激加重有关。在实验二中,我们取192只健康清洁级SD大鼠,随机分成：假手术组(A组),损伤对照组(B组),损伤+海水浸泡组(C组),甲基强的松龙治疗组(D组)。每组各48只。分别于术后3d、1w、2w、4w,采用坐骨神经功能指数评定神经运动功能；计算腓肠肌湿重的恢复率来评定肌肉重新获得坐骨神经支配而减轻肌肉萎缩的程度；HE染色观察神经病理形态变化；实时荧光RT-PCR检测IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达；免疫组织化学法检测IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白表达；并对结果进行分析、比较。结果发现：A组坐骨神经功能指数在各时间点无变化,B、C、D组在3d、 1w、2w、4w功能指数逐渐升高,且C组低于B组、D组高于C组,差异有统计学意义(p0.05)；A组腓肠肌湿重的恢复率在各时间点差异无统计学意义,腓肠肌肌肉湿重恢复最好的是B组,D组次之,C组最差。术后3天、1周D组同A、B、C组比较,差异无统计学意义,术后2周、4周D组同A、B、C组比较,差异有统计学意义。HE染色结果显示B、C、D组均有呈不规则圆环状的神经纤维再生,粗细不等,密度和数量不同。C组神经纤维密度较B、D组稀疏且紊乱,形态也不一致,D神经纤维密度高于C组。A组坐骨神经中IL-1β、IL-6、 TNF-α mRNA表达在各时间点都较低；B、C、D组IL-1β、IL-6 mRNA表达量在3d、1w、2w、4w逐渐下降,各组3d、1w、2w表达比较有统计学差异(p0.05),在4w时各组表达比较无统计学差异(p0.05); B、C、D组TNF-α mRNA表达量在3d、1w、2w逐渐下降,各组3d、1w表达比较有统计学差异(p0.05),在2w、4w时各组表达比较无统计学差异(p0.05)。A组坐骨神经中IL-1β IL-6、TNF-α蛋白表达的阳性产物平均积分光密度值最低。B、C、D组在3天、1周时IL-1β、IL-6、 TNF-α蛋白表达阳性产物平均积分光密度值最高；2周时IL-1β、IL-6蛋白表达平均积分光密度值降低,TNF-α蛋白表达最低,术后4周IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达呈低水平。实验结果提示：海水浸泡增加了损伤的坐骨神经组织中IL-1β、IL-6和TNF-α基因和蛋白质的表达,导致炎症反应加重,阻碍了神经功能恢复。甲基强的松龙促进海水浸泡大鼠坐骨神经的再生,可能是通过抑制炎性反应起作用。综上所述,大鼠坐骨神经损伤合并海水浸泡后,神经损伤程度进一步加重,神经功能恢复更差。其机制之一可能与海水浸泡使损伤的神经组织内活性氧、活性氮增加致氧化应激、硝化应激加重有关；机制之二可能与海水浸泡增加了损伤的坐骨神经组织IL-1β、IL-6和TNF-α基因和蛋白质的表达,导致炎症反应加重有关。早期使用甲基强的松龙能促进海水浸泡大鼠坐骨神经的再生,其可能是通过抑制炎症反应起作用的。

【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R745.4
【目录】：

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1 傅秀军;石有振;方勇;姚敏;王莹;;机械损伤对人皮肤角质形成细胞氧化应激和前列腺素E2分泌的影响[J];上海交通大学学报(医学版);2011年07期

2 孟辉;申洪;卜海激;刘高望;朱天岭;吴正蓉;张鋆歆;;海水中肢体火器伤伤后伤道细菌种类分析[J];西北国防医学杂志;2007年02期

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1 陈肖松;程迅生;;海水浸泡开放性创伤损伤机制及治疗的研究进展[J];安徽医学;2011年10期

2 付勇;苏雪梅;刘振祥;张培谊;赵海华;邹赛英;;低温环境下放射性与火器复合伤后细菌学改变的研究[J];临床军医杂志;2010年06期

3 郭业彬;舒为群;;军事作业环境微生物与战(创)伤感染[J];解放军预防医学杂志;2011年04期

4 王代勇;徐先锋;唐玉娟;王瑜;王烈;张再重;;濒海战创伤动物模型腹腔感染细菌学特点及药敏试验研究[J];中华灾害救援医学;2015年10期

5 韩善桥;虞积耀;王大鹏;刘瑾红;何立东;胡明;;腹部开放伤后海水浸泡动物感染细菌及药敏实验研究[J];实用预防医学;2013年09期

6 孟辉;申洪;李乃斌;卜海激;刘高望;朱天岭;吴正蓉;张鋆歆;;犬海水中火器伤伤后早期血液心肌酶组合的研究[J];医学研究杂志;2009年10期

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1 陈肖松;海水浸泡对兔胫骨开放性骨折愈合进程影响的相关研究[D];安徽医科大学;2011年

2 郭业彬;水中产ESBL大肠埃希菌bla CTX-M耐药基因转移及在烧伤伤口定殖实验研究[D];第三军医大学;2011年

3 于永;海水浸泡兔开放性颅脑损伤的救治研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年

4 王长生;海水浸泡肢体开放性软组织损伤对骨外膜的影响的初步研究[D];安徽医科大学;2010年

【二级参考文献】

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1 程相文;创伤合并海水浸泡与厌氧菌感染[J];创伤外科杂志;2001年01期

2 陈蕾,赖西南,陈志强,张良潮;火器伤合并海水浸泡兔肢体骨骼肌组织脂质过氧化反应[J];第三军医大学学报;2000年09期

3 赵东升,裴国献,魏宽海,罗炳德,王前;高温高湿环境肢体火器伤病理形态学变化[J];第一军医大学学报;2001年02期

4 卜海激,申洪,朱天岭,孟辉,张鋆歆,吴正蓉,陈清;犬海水中火器伤细菌感染定量研究[J];第一军医大学学报;2003年06期

5 韦兴,侯树勋;海水浸泡火器伤的特点与救治原则[J];解放军预防医学杂志;2003年01期

6 张杰敏,廖维宏;大鼠脊髓星形胶质细胞体外划痕损伤模型的建立[J];中华创伤杂志;2005年02期

7 赖西南,陈志强,陈蕾,王丽丽,张良潮,王大田,李兵仓;兔肢体火器伤受海水浸泡后伤道周围骨骼肌Na~+-K~+-ATP酶活性变化[J];中华航海医学杂志;1999年02期

8 孟辉,申洪,谭军,张壅歆,吴正蓉,卜海激;海水中火器伤早期犬血浆氧自由基和NO的变化[J];中国急救医学;2004年03期

9 陈建常 ,严耘 ,史振满 ,彭江 ,季明华 ,许刚 ,李莉 ,刘霞;寒冷干燥环境中肢体火器伤伤道细菌种类分析[J];中国现代医学杂志;2003年04期

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2 王志伟,吴印爱,刘献棠,喻洪涛,罗真东,蒋邦好;腹腔海水浸泡对失血犬的影响[J];中华实验外科杂志;2003年11期

3 谢培增,田辉荣,汤卫球,赵东海,郑良成,唐新平,何强华,朱红胜,王松青,肖现;模拟大批量伤员海水浸泡的实验研究[J];人民军医;2004年08期

4 冯国基,刘景汉,郑长青,欧阳锡林,施庆忠,朱秀美;海水浸泡对保存血液生化指标影响的观察[J];实用医药杂志;2004年12期

5 王大鹏;孙笑非;徐华彪;韩善桥;虞积耀;;烧伤合并海水浸泡后对实验兔肝脏病理形态学的影响[J];海军总医院学报;2006年04期

6 崔振华;陈爱宝;;烧伤合并海水浸泡患者的救治体会[J];中华航海医学与高气压医学杂志;2006年05期

7 潘敏鸿;姜少军;吴波;刘晓红;马恒辉;周航波;章如松;周晓军;;海水浸泡对表皮细胞凋亡和增殖的影响[J];医学研究生学报;2007年09期

8 黄毅然;王志伟;李文红;陈睿;吴会红;娄镇;曹标;古宜沐;;腹腔海水浸泡并淹溺时对犬血浆电解质的影响[J];南方医科大学学报;2010年11期

9 韩善桥;虞积耀;姜涛;王大鹏;;创伤合并海水浸泡动物感染实验研究[J];实用预防医学;2011年08期

10 刘敏;洪建明;;开放外伤海水浸泡后感染及修复的研究进展[J];江西医药;2011年08期

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1 曹令;石冰;;战伤合并海水浸泡组织损伤机制及治疗进展[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

2 李辉;鹿尔驯;虞积耀;孙笑非;王育红;王大鹏;马聪;;早期救治对胸部开放伤后海水浸泡所致肺损伤的影响[A];2001年全国中西医结合急救医学学术会议论文集[C];2001年

3 马军;王甲汉;李志清;易朝辉;;大鼠烫伤合并海水浸泡后机体血栓素和氧自由基含量变化特点及机理探讨[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

4 王长生;程迅生;陈肖松;王海峰;;海水浸泡肢体软组织开放损伤对骨膜TNF-α及TGF-β1表达的影响[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

5 韩善桥;虞积耀;王大鹏;刘瑾红;何立东;胡明;;腹部开放伤后海水浸泡动物感染细菌及药敏实验研究[A];第十二届全国抗生素学术会议论文集[C];2013年

6 易朝辉;王甲汉;马军;李志清;;烫伤合并海水浸泡后创面局部处理措施探讨[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

7 马军;王甲汉;李志清;易朝辉;;大鼠烫伤合并海水浸泡后创面病理学改变的特点[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 王海峰;海水浸泡大鼠坐骨神经损伤的实验研究[D];安徽医科大学;2015年

2 宁浩勇;海水浸泡延迟伤口愈合的机制及救治研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

3 胡晓红;胸部开放伤后海水浸泡致急性肺损伤发病机制和早期干预的实验研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

4 康健;前列地尔对海水浸泡脊髓开放性损伤保护作用的实验研究[D];第二军医大学;2014年

5 沈宏亮;左氧氟沙星羧甲基壳聚糖缓释微球的研制及其对海水浸泡创伤的早期治疗作用[D];第二军医大学;2004年

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1 徐沛;烫伤合并海水浸泡后肠道损伤机制的探讨[D];南方医科大学;2014年

2 曲佳;海水浸泡对血管内皮损伤机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年

3 陆丹;海水浸泡开放性犬颅脑爆震伤影像学变化及机制实验研究[D];第四军医大学;2010年

4 郑四化;不同冲洗液对海水浸泡软组织伤影响的实验研究[D];福建中医学院;2008年

5 王长生;海水浸泡肢体开放性软组织损伤对骨外膜的影响的初步研究[D];安徽医科大学;2010年

6 卢青军;海水浸泡火器伤合并失血性休克伤情特点及温度、渗透压对其的影响[D];第三军医大学;2002年

7 杨芬;封闭负压引流技术在海水浸泡爆炸伤创面治疗中的应用研究（一）[D];大连医科大学;2013年

8 詹刚;海水浸泡烧冲复合伤的伤情特点及早期救治的实验研究[D];第三军医大学;2002年

9 倪云志;延期植皮在海水浸泡爆炸伤和普通外伤的应用研究[D];第四军医大学;2005年

10 刘鹏;海水浸泡兔股动脉火器伤的病理学及外科处理的实验研究[D];第三军医大学;2002年

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本文编号：236135