Notch配体DLL4在手足口病患儿中表达、临床意义和功能分析

  本文关键词：Notch重组配体D1R在促进造血重建中的作用与机理，由笔耕文化传播整理发布。

《苏州大学》 2016年

Notch配体DLL4在手足口病患儿中表达、临床意义和功能分析

柏振江  

【摘要】：手足口病是一种危及全世界儿童健康的急性传染病。在中国,每年至少数百万儿童感染手足口病,并有数百例危重症病例死亡。手足口病可由EV71(肠道病毒71)和CVA16(柯萨奇病毒A16)等病毒感染所致,伴有显著的免疫紊乱,表现为炎症T细胞的异常增殖和分化所导致的异常的炎症因子分泌。Notch信号通路在细胞增殖、分化和凋亡等各种生理、病理状态中发挥着重要的作用。近年来研究发现Notch信号可通过细胞因子非依赖途径调控T淋巴细胞分化。我们希望通过本次研究,阐明Notch信号通路在手足口病发病中的可能机制,为开发手足口病有效预防和治疗策略提供重要理论依据。第一部分Notch配体DLL4在手足口病患儿中表达和临床意义目的:了解Notch信号通路在手足口病发病中的作用。方法:2012年6月~2012年12月苏州大学附属儿童医院感染病房和儿科重症监护病房收住的82例手足口病患儿,设为手足口病组,根据其临床表现和实验室结果分为单纯组和脑炎组,对照组为外科腹股沟斜疝择期手术患儿40例,将其流行病学、临床理化特征、外周血免疫细胞水平和Notch配体水平进行分析比较。结果:1.手足口病组外周血单个核细胞中Notch配体DLL1和DLL4的m RNA表达水平显著高于对照组(P0.05),而Jagged1和Jagged2的表达在两组间差异无统计学意义,四种配体在手足口病单纯组和脑炎组之间表达差异均无统计学意义。2.流式细胞技术测定手足口病组外周血中树突状细胞(DCs)表面DLL4表达水平显著高于对照组(P0.05),健康志愿者外周血DCs表面不表达DLL4。3.手足口病组外周血CD3+细胞、CD3+CD4+细胞和CD3+CD8+细胞水平显著低于对照组,CD3-CD19+细胞水平显著高于对照组(P0.05),手足口病单纯组CD3+细胞、CD3+CD4+细胞水平显著高于脑炎组,CD3-CD19+细胞水平显著低于脑炎组(P0.05),而CD3+CD8+和CD3-CD16+CD56+细胞水平两组差异无统计学意义。4.手足口病组外周血单个核细胞中DLL4的RNA表达水平和CD3+淋巴细胞表达呈负相关(r=-0.23,P=0.00),与CD3+CD8+淋巴细胞表达呈负相关(r=-0.23,P=0.02),与CD3-CD19+淋巴细胞呈正相关(r=0.36,P=0.00),而DLL4表达与CD3+CD4+细胞和CD3-CD16+56+细胞无显著相关。5.手足口病组外周血单个核细胞中DLL4的RNA表达水平与脑脊液中WBC总数呈正相关(r=0.45,P=0.01),与脑脊液总蛋白含量(S-TP)呈正相关(r=0.37,P=0.01)(见图2)。结论:Notch信号通路可能参与手足口病的发病;Notch配体DLL4与外周血CD3+,CD3+CD8+和CD3-CD19+淋巴细胞有较强的相关性,可能通过影响这些免疫细胞的数量和状态从而影响疾病的预后,另DLL4与脑脊液中WBC和总蛋白水平显著相关,可能成为判断手足口病并发脑炎的一个指标第二部分人DLL4+DCs对CD4+T细胞向Th1及Th17分化的调控目的:了解体外炎症环境下DLL4+DCs能否调控CD4+T细胞向Th1及Th17分化。方法:体外采用不同的Toll样受体激动剂刺激从健康志愿者外周血分离获得的PBMCs来模拟体内的炎症环境,测定刺激后树突状细胞(DCs)表达DLL4水平和DCs活化状态。分离纯化健康志愿者外周血DCs经过R848刺激获得DLL4+DCs,与来自不同志愿者的纯化后的CD4+T淋巴细胞以1:10的比例共培养,采用流式细胞技术检测细胞内IFN-a和IL-17等细胞因子表达水平,分析DLL4+DCs对CD4+T淋巴细胞分化的调节作用。结果:1.健康志愿者外周血单个核细胞经过不同Toll受体激动剂Pam3CSK4、LPS和R848刺激24h,均能诱导DCs表达DLL4(18.2%~24.7%)。2.R848刺激显著上调了DCs表面HLA-DR、CD40、CD80、CD83和CD86的表达水平;R848可以诱导DCs表达IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α和IL-6的m RNA显著增加。3.经过R848刺激的DCs和CD4+T细胞以1:10的比例共培养7天,相对于对照组,观察组诱导辅助T细胞表达包括更多IFN-γ和IL-17,提前加入DLL4+特异性中和抗体能够降低IFN-γ和IL-17的水平。结论:体外采用Toll样受体激动剂可诱导人外周血DCs表达DLL4,并活化DCs。DLL4是人DCs诱导CD4+T细胞向Th1及Th17分化的重要分子。

【关键词】：
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.1
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张丽;夏德雨;李国辉;蒋姗姗;谷芳娜;梁英民;;Notch信号在急性早幼粒细胞白血病患者骨髓中的表达[J];第四军医大学学报;2009年24期

2 姜萌;何奔;;Notch信号对血管新生调控作用的研究进展[J];上海交通大学学报(医学版);2010年05期

3 ;Effect of Trastuzumab on Notch-1 Signaling Pathway in Breast Cancer SK-BR3 Cells[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年03期

4 鲁茁壮,王立生,吴祖泽;Notch信号通路研究进展[J];生理科学进展;2004年02期

5 张谦慎;Notch信号与肺发育[J];中国当代儿科杂志;2004年02期

6 孙力,詹启敏,章文华;Notch信号通路与肿瘤[J];国外医学(肿瘤学分册);2004年09期

7 张谦慎,常立文,刘汉楚,容志惠,祝华平,陈红兵,李文斌;Notch信号与大鼠肺发育的关系研究[J];华中科技大学学报(医学版);2004年03期

8 张谦慎,常立文,刘汉楚,容志惠,陈红兵;TEMPORAL EXPRESSION OF NOTCH RECEPTORS DURING LUNG DEVELOPMENT IN RAT[J];Journal of Shanghai Second Medical University;2005年02期

9 吴颖亚;王季石;;Notch及其配体在血液系统中的作用[J];国外医学.输血及血液学分册;2005年05期

10 张谦慎,常立文,刘汉楚,容志惠,陈红兵;Relationship between Notch Receptors and Hyperoxia-induced Lung Injury in Newborn Rats[J];华中科技大学学报(医学英德文版);2005年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张丽;梁英民;夏德雨;李国辉;蒋姗姗;谷芳娜;;Notch信号在急性早幼粒细胞白血病患者骨髓中的表达研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

2 ;Expression profile of Notch-related genes in multi-drug resistant K562/A02 cells compared with parental K562 cells[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

3 ;Notch signaling in lymphopoiesis[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

4 韩骅;;Notch信号途径的功能和作用机理的研究[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（下）[C];2003年

5 赵昱;侯丽宏;马磊;朱正华;朱萧玲;王强;吕岩;陈绍洋;;Electroacupuncture pretreatment induces the tolerance against focal cerebral ischemia through activation of Notch pathway[A];中华医学会第五次全国重症医学大会论文汇编[C];2011年

6 黄佳圆;王锐;陈龙邦;;Expression of Notch-1 and Its Clinical Significance in Different Histological Subtypes of Human Lung Adenocarcinoma[A];2013华东胸部肿瘤论坛暨第六届浙江省胸部肿瘤论坛论文集[C];2013年

7 ;Aberrant expression profile of Notch signaling pathway involved in immune thrombocytopenic purpura patients[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

8 ;Notch induced protein degradation in lymphoid development[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

9 ;The functions of ptrl in Notch and Integrin pathways[A];2012全国发育生物学大会摘要集[C];2012年

10 Yaochun Wang;Guorui Dou;Lin Wang;Hua Han;;Notch signaling:licenses and limits cellular responses to extrinsic stimulations?[A];中国生物化学与分子生物学会第十届会员代表大会暨全国学术会议摘要集[C];2010年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 ;[N];新华每日电讯;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王凯;Notch信号在小鼠创伤性脑损伤后神经元死亡中的作用及机制研究[D];第四军医大学;2015年

2 陈娟娟;Notch重组配体D1R在促进造血重建中的作用与机理[D];第四军医大学;2015年

3 梁燕;Notch3对低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖的作用机制探讨[D];首都医科大学;2014年

4 孙建华;肺癌患者在乏氧条件下VEGF和Dll4/Notch通路分子的异常表达和相互关系[D];山东大学;2015年

5 丁君;缺氧诱导因子1-α和Notch1的关系及其在阿尔茨海默病中的研究[D];华中科技大学;2015年

6 付伟;Notch信号在慢性粒细胞白血病细胞增殖和伊马替尼耐药的调控作用研究[D];第四军医大学;2014年

7 柏振江;Notch配体DLL4在手足口病患儿中表达、临床意义和功能分析[D];苏州大学;2016年

8 田竑;异基因造血干细胞移植治疗难治复发急性髓细胞白血病的临床及实验研究[D];苏州大学;2016年

9 余丽梅;人Notch4基因转录调控的研究[D];重庆医科大学;2006年

10 余惠平;干扰Notch2对神经胶质瘤抑制的研究[D];南方医科大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 陈建伟;Notch2基因在绵羊卵巢表达的研究[D];山西农业大学;2015年

2 张丽柯;Notch1对神经胶质瘤细胞“干性”及多药耐药性的调节[D];福建医科大学;2015年

3 李文琴;Notch1信号通路相关基因mRNA表达与乳腺癌变、进展相关性研究[D];石河子大学;2015年

4 杨慧;Notch-1、Hesr-1在乳腺癌组织中的表达及其意义[D];河北医科大学;2015年

5 曹羿堃;宁夏无果枸杞芽提取物对小鼠胸腺淋巴细胞分化与Notch通路信号因子的作用[D];宁夏医科大学;2015年

6 吴智强;Caspr通过Notch信号通路调控神经细胞在大脑皮层发育过程中产生的时间[D];苏州大学;2015年

7 吴乐乐;Notch 1信号通路对人肝癌SMMC 7721细胞中高纯度CD133~+细胞增殖和凋亡的影响[D];安徽医科大学;2015年

8 雷蕾;首发抑郁症患者Notch通路及相关miRNAs的表达差异研究[D];山西医科大学;2015年

9 王成志;新发家族性阿尔茨海默病早老素-1基因(presenilin-1,PS1)N24S突变对APP和Notch通路作用的硏究[D];广西医科大学;2015年

10 王彦;JQ1诱导SUP-B15细胞凋亡的Notch1通路机制研究[D];山西医科大学;2015年

  本文关键词：Notch重组配体D1R在促进造血重建中的作用与机理，由笔耕文化传播整理发布。