逍生散治疗干眼的临床研究及实验研究
发布时间：2019-08-06 20:10
【摘要】：干眼是眼科门诊相当常见的疾病之一,其临床表现主要是眼部干燥、异物感、畏光及眼皮沉重紧绷等不适,严重者可引起视功能下降,从而影响工作和生活。祖国医学认为“肝开窍于目”,“肝在液为泪”,肝所受藏的精微物质输送于目,使目受滋养,从而维持正常的视觉功能。逍生散是导师谢立科主任医师临床经验的总结,临床常用于治疗干眼患者证属肝郁阴虚证者。使用疏肝养阴法辨证治疗干眼,前期应用于临床及动物实验均显示一定疗效,本研究旨在进一步探讨逍生散治疗干眼的作用及分子作用机制,为干眼的中医治疗提供新思路和客观依据。目的观察肝郁阴虚型干眼各证候要素的分布;比较三种不同检查方法测量干眼泪膜稳定性的差异及相关性;观察逍生散对肝郁阴虚型干眼治疗前后泪膜稳定性、临床症状评分、泪液分泌试验SchimerI及角膜荧光素染色积分的变化;观察逍生散对干眼角膜上皮细胞损伤模型的干预作用,进一步探讨逍生散治疗干眼的作用及分子作用机制。方法1参照干眼诊断标准和中医辨证标准选取我院门诊干眼患者中证属肝郁阴虚者100例,将各中医证候条目分为无、轻度、中度、重度4级,分别计0、1、2、3分,问诊时准确记录患者信息,根据积分法进行统计分析,进行肝郁阴虚型干眼的临床调研。2用Sirius、RT-7000及FLS三种方法测量干眼患者的泪膜稳定性,分析比较三种方法对泪膜稳定性测量的差异及相关性。3选取我院门诊干眼患者中证属肝郁阴虚者80例,口服中药逍生散治疗连续4周,治疗前和治疗后,观察患者泪膜稳定性、临床症状评分、泪液分泌试验SchimerI及角膜荧光素染色积分的变化。4人角膜上皮细胞加入苯扎氯铵溶液制备得干眼角膜上皮细胞损伤模型,加入低、中、高剂量逍生散含药血清和空白对照血清孵育后,分别于作用24h、48h、72h时用光镜观察角膜上皮细胞形态学改变,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡及RT-PCR检测角膜上皮细胞中IL-1、IL-6、TNF-a、MMP-9细胞因子的表达情况。结果1本研究所纳入患者,平均年龄42.09岁,其中最小18岁,最大60岁;性别方面,男性44人(占44.00%),女性56人(占56.00%);职业方面,工人14人(占14.00%),退休9人(占9.00%),无业5人(占5.00%),学生4人(占4.00%),职员68人(占68.00%);证候要素(除舌脉)所占比例由大到小前三位依次为目珠干燥、刺痛、烦躁易怒。2三种方法测量的泪膜破裂时间差异有统计学意义(P0.05),两两比较结果显示FLS法测量的泪膜破裂时间与Sirius和RT7000相比相对较长,而Sirius和RT7000的泪膜破裂时间测量相对较短且他们之间没有差异。Pearson相关分析结果表明,FLS和Sirius的相关系数为0.39,FLS和RT7000的相关系数为0.41,具有统计学意义(P0.05)。3服用逍生散后三种测量方法的结果均显示泪膜破裂时间变长,且时间增加具有统计学意义(P0.0001),相关性分析结果显示,同一种方法在服用中药前后的测量结果一致性较高,Sirius法服药前后的相关系数达到0.81(P0.0001),RT7000的相关系数为0.83(P0.0001),FLS的测量结果前后一致性稍差,相关系数为0.68(P0.0001);用药后临床症状评分降低,泪液分泌量增加,角膜荧光素染色积分降低,均具有统计学意义(P0.0001)。4苯扎氯胺浓度为1ug/ml时,对角膜上皮细胞毒性较低,可见细胞随时间延长缓慢变大,包浆内空泡逐渐增加,细胞活性相对降低,其作用比较缓和,故选用1ug/ml的BAC浓度作为造模浓度。空白血清浓度不高于10%时,对角膜上皮细胞活性没有影响,故选用10%的空白血清作为对照,2.5%、5%、10%的逍生散含药血清作为中药低、中、高剂量组进行实验。中药中、高剂量组干预角膜上皮细胞损伤模型,能明显抑制细胞体积增大、细胞松解及间隙变大,减少细胞脱壁及溶解、坏死;减少细胞凋亡;CCK-8法检测细胞活性显示,中药中、高剂量的细胞活性值和其他组差异有统计学意义(P0.05);R-TPCR检测IL-1、IL-6、TNF-a及MMP-9的表达,结果显示,中药中、高剂量组的结果相对较低,且呈现随药物浓度增加,抑制效果相对越好的结果,24h、48h和72h时点均出现中药中、高剂量组抑制炎症因子的作用更为明显(P0.05)。结论1肝郁阴虚型干眼患者以女性居多,好发于40岁左右,常见从事职业为职员、工人、退休人员,主要证候有目珠干燥、刺痛、烦躁易怒。2三种不同检查方法测量干眼患者的泪膜破裂时间有不同,FLS法测量的时间相对较长,Sirius和RT7000测量的时间相对较短,但三种方法测量的泪膜破裂时间在趋势上有一致性,对干眼的临床诊断和治疗均有一定意义。3逍生散治疗肝郁阴虚型干眼患者后三种测量方法均显示泪膜破裂时间变长,且同一种方法在服用中药前后的测量结果一致性较高;用药后临床症状评分降低,泪液分泌量增加,角膜荧光素染色积分降低,进一步证实了逍生散治疗的有效性。4逍生散含药血清中、高剂量组能明显升高细胞活性;减少细胞凋亡;逍生散可能通过降低IL-1的产生,进而降低产生IL-6、TNF-a等炎症因子以及可能通过降低IL-1的产生,调控MMP-9的数量和活性,发挥保护角膜上皮细胞的作用。
【图文】：
方差分析结果表明，三组之间的泪膜破裂时间差异有统计学意义（Ｐ＜0．0５），两逡逑两比较结果显示ＦＬＳ法测量的泪膜破裂时间与Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００相比相对较长，而逡逑Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００的泪膜破裂时间测量相对较短且他们之间没有差异，见表３、图２。逡逑表３三种方法测量泪膜稳定性比较逦逡逑方法逦Ｎ逦Ｍｅａｎ逦ＳＤ逦Ｍｅｄｉａｎ逦Ｑ１逦Ｑ３逦Ｍｉｎ逦Ｍａｘ逦Ｆ邋Ｐ逡逑３３．０７逦＜．０００１逡逑Ｓｉｒｉｕｓ逦１００逦２．３７逦１．１２逦２．０６逦１．５４逦２．８８逦０．７６逦５．００逦Ｂ逡逑ＲＴ７０００逦１００逦２．２３逦１．８６逦１．６０逦０．５０逦４．４０逦０．１０逦５．００逦Ｂ逡逑ＦＬＳ逦１００逦３．６８逦１．０５逦４．０９逦３．００逦４．３６逦１．３０逦５．００逦Ａ逡逑５１邋ｊ逦＿Ｔ逦Ｔ逡逑４逡逑Ｓ逦ｗ邋＇丨．．．．．二．ｔ逦％＇ｉｊ；逦一￣Ｔ一＂？逡逑ｓ逡逑孩逡逑１逦0逦ｏ逡逑熙２逦逦—逡逑１逡逑ｉ逡逑：邋±逡逑０邋逦逦ｊ逡逑ＳｉｒｉｕＳ＿0逦ＲＴ７０００＿０逦ＦＬＳ＿０逡逑图２三种测量方法泪膜破裂时间差值分布逡逑
３．１用药前后泪膜稳定性比较逡逑结果表明，，用药后三种测量方法均显示泪膜破裂时间变长，且时间X椉泳哂型冲义霞蒲б庖澹ǎ穑迹埃埃埃埃保恚怠ⅲ丁ⅲ芳巴迹场ｅ义媳恚涤靡┣昂螅樱椋颍椋酰蟛饬坷崮の榷ㄐ员冉襄义现副赍畏掷噱斡靡┣板斡靡┖箦瓮臣屏浚ǎ兄担╁义希樱椋颍椋酰箦危五澹ǎ停椋螅螅椋睿纾╁危福埃ǎ埃╁危福埃ǎ埃╁危玻保保埃ㄅ涠藻澹簦校迹埃埃埃埃保╁义希停澹幔睿ǎ樱模╁危玻保常ǎ埃梗埃╁危矗埃担ǎ保常埃╁义希停澹幔铄澹梗担ィ茫慑危ǎ保梗常玻常常╁危ǎ常罚叮矗常矗╁义希停澹洌椋幔铄澹ǎ眩常眩保╁危保梗担ǎ保保福╁危矗埃埃ǎ保叮玻╁义希眩保眩冲危ǎ保矗罚玻叮矗╁危ǎ常保福矗福埃╁义希ǎ停椋睿澹停幔╁危ǎ埃罚叮矗担玻╁危ǎ保玻矗罚埃埃╁义媳恚队靡┣昂螅遥裕罚埃埃安饬坷崮の榷ㄐ员冉襄义现副赍畏掷噱斡靡┣板斡靡┖箦瓮臣屏浚ǎ兄担╁义希遥裕罚埃埃板危危ǎ停椋螅螅椋睿纾╁危福埃ǎ埃╁危福埃ǎ埃╁危保罚福埃ㄅ涠裕簦校
本文编号：2523722
【图文】：
方差分析结果表明，三组之间的泪膜破裂时间差异有统计学意义（Ｐ＜0．0５），两逡逑两比较结果显示ＦＬＳ法测量的泪膜破裂时间与Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００相比相对较长，而逡逑Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００的泪膜破裂时间测量相对较短且他们之间没有差异，见表３、图２。逡逑表３三种方法测量泪膜稳定性比较逦逡逑方法逦Ｎ逦Ｍｅａｎ逦ＳＤ逦Ｍｅｄｉａｎ逦Ｑ１逦Ｑ３逦Ｍｉｎ逦Ｍａｘ逦Ｆ邋Ｐ逡逑３３．０７逦＜．０００１逡逑Ｓｉｒｉｕｓ逦１００逦２．３７逦１．１２逦２．０６逦１．５４逦２．８８逦０．７６逦５．００逦Ｂ逡逑ＲＴ７０００逦１００逦２．２３逦１．８６逦１．６０逦０．５０逦４．４０逦０．１０逦５．００逦Ｂ逡逑ＦＬＳ逦１００逦３．６８逦１．０５逦４．０９逦３．００逦４．３６逦１．３０逦５．００逦Ａ逡逑５１邋ｊ逦＿Ｔ逦Ｔ逡逑４逡逑Ｓ逦ｗ邋＇丨．．．．．二．ｔ逦％＇ｉｊ；逦一￣Ｔ一＂？逡逑ｓ逡逑孩逡逑１逦0逦ｏ逡逑熙２逦逦—逡逑１逡逑ｉ逡逑：邋±逡逑０邋逦逦ｊ逡逑ＳｉｒｉｕＳ＿0逦ＲＴ７０００＿０逦ＦＬＳ＿０逡逑图２三种测量方法泪膜破裂时间差值分布逡逑
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