内质网应激介导非酒精性脂肪肝细胞凋亡及运动饮食干预研究

发布时间：2020-10-29 21:40

　　 目的：探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞凋亡的内质网应激(ERS)介导机制,观察运动和饮食干预对NAFLD的影响。方法：90只SD成年大鼠分为9组：8周、16周对照组(C1、C2)、8周、16周运动预防组(E1、E2)、8周、16周模型组(M1、M2)、运动组(EM)、饮食组(FM)和运动饮食组(EFM)。C1、C2组普通饲料,其它组高脂饲料。E1和E2组分别进行8周和16周有氧游泳运动。C1、E1和M1组在第8周取材,其余组在第16周取材。FM和EFM组在第8周造模后,改为普通饲料；M2、E2和EM组继续高脂饲料。EM、FM口EFM组在第8周造模后分别给予游泳运动、普通饲料和二者联合干预8周。观察肝组织病理形态学变化；检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)水平；观测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、真核细胞起始因子2a(eIF-2a)、跨膜蛋白激酶1(IRE-1)、X盒结合蛋白(XBP-1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、C-Jun氨基末端激酶(JNK)、Caspase-12蛋白表达,CHOP、JNK、Caspase-12的阳性表达率和肝细胞凋亡情况。结果：(1)M1组肝细胞可见弥漫性大泡样脂肪变性,有橘红色脂滴充填,NAFLD发生率80%,与C1组比较,上述血清生化指标和蛋白表达升高,肝细胞凋亡指数增加；M2组NAFLD发生率100%,各指标水平显著高于C2组；肝细胞脂肪变性程度较M1组明显加重,各指标值高于M1组。(2)E1组NAFLD发生率44%,肝脏脂肪沉积较M1组轻,各指标值较低；E2组NAFLD发生率67%,较E1组各指标水平升高,但其增幅显著低于M2组。(3)与M2组比较,EM、FM和EFM组肝脏脂肪沉积较轻,各指标水平较低,以EFM组最为明显。结论：8周高脂饮食可诱发NAFLD,且随时间延长,NAFLD病变程度加重；运动对NAFLD发生有一定的预防作用；运动和饮食调整在一定程度上对NAFLD具有良性干预作用,其联合作用效果更佳；内质网应激介导了NAFLD的细胞凋亡过程,参与了NAFLD的发生与发展；运动和饮食调整可减轻NAFLD的肝细胞ERS及其所介导细胞凋亡程度。
【学位单位】：北京体育大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2015
【中图分类】：R575.5
【文章目录】：
中文摘要
abstract
1 前言
    1.1 概述
    1.2 研究设想
        1.2.1 研究设想一
        1.2.2 研究设想二
    1.3 研究内容
        1.3.1 研究一 运动对NAFLD形成的ERS及其介导细胞凋亡影响研究
        1.3.2 研究二 运动和饮食调整对NAFLD发展的ERS及其介导细胞凋亡影响研究
    1.4 研究技术总路线
2 文献综述
    2.1 综述一 内质网应激与非酒精性脂肪肝的关系研究
        2.1.1 ER与ERS
        2.1.2 ERS与NAFLD关系
        2.1.3 结论
    2.2 综述二 运动对非酒精性脂肪肝作用的研究进展
        2.2.1 NAFLD的发病机制
        2.2.2 运动对NAFLD的作用
        2.2.3 结论
3 实验研究一 运动对NAFLD形成的ERS及其介导细胞凋亡影响研究
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要实验仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要试剂配方
    3.2 实验方法
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 饲料与配方
        3.2.3 实验分组及喂养
        3.2.4 运动方法
        3.2.5 样本采集与处理
        3.2.6 测试指标与方法
        3.2.7 实验统计方法
    3.3 结果
        3.3.1 各组大鼠一般情况变化
        3.3.2 各组大鼠体重与肝指数变化
        3.3.3 各组大鼠肝脏病理形态学变化
        3.3.4 各组大鼠血液生化指标变化
        3.3.5 各组大鼠肝细胞凋亡数变化
        3.3.6 各组大鼠肝组织GRP78蛋白表达变化
        3.3.7 各组大鼠肝组织PERK、eIF-2a蛋白表达变化
        3.3.8 各组大鼠肝组织IRE-1、XBP-1蛋白表达量变化
        3.3.9 各组大鼠肝组织CHOP、JNK、Caspase-12蛋白表达变化
        3.3.10 各组大鼠肝组织CHOP、JNK、Caspase-12平均光密度变化
    3.4 讨论与分析
        3.4.1 NAFLD动物模型的建立
        3.4.2 血脂紊乱与NAFLD
        3.4.3 ALT、AST水平与NAFLD
        3.4.4 ERS蛋白表达与NAFLD
        3.4.5 高脂饮食诱导NAFLD的进程变化
        3.4.6 运动对NAFLD形成的预防作用
        3.4.7 运动对高脂饮食喂养时间延长致NAFLD加重的减缓作用
    3.5 小结
4 实验研究二 运动和饮食调整对NAFLD发展的ERS及其介导细胞凋亡影响研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 饲料及配方
        4.1.3 动物分组
        4.1.4 运动方案
        4.1.5 样本采集处理
        4.1.6 指标测试方法
        4.1.7 实验统计方法
    4.2 结果
        4.2.1 各组大鼠一般情况变化
        4.2.2 各组大鼠体重和肝指数变化
        4.2.3 各组大鼠肝脏病理组织学变化
        4.2.4 各组大鼠血液生化指标变化
        4.2.5 各组大鼠肝细胞凋亡指数变化
        4.2.6 各组大鼠肝组织GRP78蛋白表达变化
        4.2.7 各组大鼠肝组织PERK、eIF-2a蛋白表达变化
        4.2.8 各组大鼠肝脏IRE-1、XBP-1蛋白表达变化
        4.2.9 各组大鼠肝脏CHOP、JNK、Caspase-12蛋白表达变化
        4.2.10 各组大鼠肝组织CHOP、JNK、Caspase-12平均光密度变化
    4.3 讨论与分析
        4.3.1 运动对NAFLD的治疗作用
        4.3.2 饮食调整对NAFLD的治疗作用
        4.3.3 运动与饮食调整对NAFLD治疗的交互作用
    4.4 小结
5 总结
6 创新性与不足
致谢
参考文献
附录
个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果

【参考文献】

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本文编号：2861492