基于肿瘤相关巨噬细胞的极化探讨雷公藤内酯醇对耐顺铂上皮性卵巢癌抑制机制的研究
发布时间：2020-12-03 21:50
研究背景和目的:耐顺铂人上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌的治疗已成为目前临床医师治疗上棘手问题,寻找安全有效的抗耐顺铂化疗药物的卵巢癌中药意义重大。我们前期工作发现雷公藤内酯醇（TP）对耐顺铂药物的人上皮性卵巢癌有抑制作用,并研究了其相关抑制机制。肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）可诱导恶性肿瘤的生长,TAMs的极化在恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用,而PI3K/Akt/NF-κB信号通路在TAMs极化扮演着重要的角色。我们前期工作也发现,TP可阻断PI3K/AKT信号通路进而抑制耐顺铂人上皮性卵巢癌生长。据此提出假设:TP可通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路促进TAMs向M1型巨噬细胞极化,抑制其向M2型巨噬细胞极化,从而促进卵巢癌细胞凋亡。因此,本实验从分子水平、细胞水平、组织以及动物水平等多层次探讨了TP作用于耐药上皮性卵巢癌后TAMs极化情况及PI3K/AKT/NF-κB信号通路相关蛋白的变化,从而验证了TP通过对PI3K/AKT/NF-κB信号通路调节及调控肿瘤微环境进而发挥抗肿瘤作用。这个新视点为TP为耐顺铂化疗药物的上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌患者的治疗提供实验依据和理论基础。方...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
八P13K/Akt/NF-κB信号通路及其下游因子示意图
在PI3K/Akt信号通路中,Akt(也称为PKB)是PI3K最显著的效应物,由Akt1、Akt2、Akt3组成,可调节细胞活性、增殖、分化和中间代谢等。研究显示PI3K/Akt信号通路在TAMs极化中起到重要作用。Akt1激酶对巨噬细胞极化的影响有差异,敲除Akt1基因引起了M1极化,而敲除Akt2导致M2极化,调节巨噬细胞的生存。NF-κB是调节巨噬细胞诱导的炎症细胞因子和免疫应答中重要的转录因子,在PI3K/Akt信号通路中也是一个关键信号因子,NF-κB激活可导致M1极化,促进炎性细胞因子分泌[88-90]。PI3K/AKT信号通路又参与了巨噬细胞的极化。如图十九。本实验结果显示,DDP和TP分别单独和联合作用于A2780/DDP细胞成瘤裸鼠后,各组AKT及P65蛋白表达一致,无明显差异;而P-AKT及P-P65蛋白表达存在差异。DDP、TP及联合组中P-P65和P-AKT蛋白表达低于对照组,而联合组中P-P65和P-AKT蛋白表达低于DDP和TP单独组。PI3K/AKT信号通路是条生存通路,耐药肿瘤细胞中AKT及NF-κB蛋白未发生磷酸化,故肿瘤细胞生长旺盛。当化疗药物或其他药物干预后,信号通路相关蛋白发生磷酸化后,M1极化增加,M2极化减少。促凋亡作用机制可能与下调P-AKT及磷酸化NF-κB蛋白表达有关,从而抑制PI3K/AKT/κB信号生存通路,促进肿瘤凋亡。
镜下观察见THP-1细胞培养24小时后,细胞形态均一圆形悬浮生长,分布均匀,折光度良好,无颗粒,形态典型,细胞分裂生长明显,细胞数量增多,成对数期生长。随培养时间延长,细胞数目过多、生长空间及营养物质的相对不足,导致THP-1细胞生长逐步停止,之后细胞数量下降,细胞分裂消失。如图一。3.1.2 佛波酯诱导THP-1 细胞结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇对PC-3/MDR细胞耐药的体外逆转作用[J]. 杨瑜,陈明,朱伟东,张光远. 中成药. 2018(12)
[2]雷公藤内酯醇-聚乙烯亚胺-环糊精对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/Taxol逆转作用的研究[J]. 王桂芬,李健林,王慧慧,朱益民. 中华普通外科学文献(电子版). 2017(03)
[3]p-AKT、FOXO3a、Bim在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义[J]. 胡晓静,李红雨,余亚南,刘星烁,韩会会,曹蒙. 中国妇幼保健. 2017(06)
[4]猪苓多糖诱导M2亚型巨噬细胞向M1巨噬细胞转化[J]. 江泽波,赵晋,李思明,胡金萍,曾星. 中国免疫学杂志. 2015(08)
[5]中医药逆转肿瘤多药耐药的策略及研究进展[J]. 徐叶峰,刘云霞,沈敏鹤,阮善明. 中国中西医结合杂志. 2015(07)
[6]雷公藤内酯醇洗脱支架对小型猪冠状动脉内膜增生及细胞分裂周期基因2、基质金属蛋白酶2表达的影响[J]. 胡德喜,陆东风,林刚毅. 中国临床保健杂志. 2014(04)
[7]雷公藤内酯醇联合紫杉醇对COC1/DDP细胞凋亡的影响及其对PI3K/AKT/GSK3β信号通路的调控[J]. 刘斐,谭布珍. 现代妇产科进展. 2013(12)
[8]雷公藤内酯醇与非小细胞肺癌研究进展[J]. 王丽,宋勇. 中国肺癌杂志. 2013(07)
[9]PI3K/AKT/GSK3β信号通路在上皮性卵巢癌细胞增殖与耐药中的作用[J]. 刘斐,谭布珍. 天津医药. 2013(06)
[10]糖蛋白抗肿瘤作用及其机制的研究进展[J]. 王慧昀,吴杰连,袁野. 宁夏农林科技. 2012(06)
硕士论文
[1]雷公藤氯内酯醇通过PI3K信号通路诱导肺癌细胞的自噬并增加A549/DDP对顺铂的敏感性[D]. 宋天娇.福建医科大学 2017
[2]雷公藤内酯醇对人多发性骨髓瘤耐药细胞株MM.1R的作用研究[D]. 潘含章.浙江大学 2006
本文编号：2896567
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
八P13K/Akt/NF-κB信号通路及其下游因子示意图
在PI3K/Akt信号通路中,Akt(也称为PKB)是PI3K最显著的效应物,由Akt1、Akt2、Akt3组成,可调节细胞活性、增殖、分化和中间代谢等。研究显示PI3K/Akt信号通路在TAMs极化中起到重要作用。Akt1激酶对巨噬细胞极化的影响有差异,敲除Akt1基因引起了M1极化,而敲除Akt2导致M2极化,调节巨噬细胞的生存。NF-κB是调节巨噬细胞诱导的炎症细胞因子和免疫应答中重要的转录因子,在PI3K/Akt信号通路中也是一个关键信号因子,NF-κB激活可导致M1极化,促进炎性细胞因子分泌[88-90]。PI3K/AKT信号通路又参与了巨噬细胞的极化。如图十九。本实验结果显示,DDP和TP分别单独和联合作用于A2780/DDP细胞成瘤裸鼠后,各组AKT及P65蛋白表达一致,无明显差异;而P-AKT及P-P65蛋白表达存在差异。DDP、TP及联合组中P-P65和P-AKT蛋白表达低于对照组,而联合组中P-P65和P-AKT蛋白表达低于DDP和TP单独组。PI3K/AKT信号通路是条生存通路,耐药肿瘤细胞中AKT及NF-κB蛋白未发生磷酸化,故肿瘤细胞生长旺盛。当化疗药物或其他药物干预后,信号通路相关蛋白发生磷酸化后,M1极化增加,M2极化减少。促凋亡作用机制可能与下调P-AKT及磷酸化NF-κB蛋白表达有关,从而抑制PI3K/AKT/κB信号生存通路,促进肿瘤凋亡。
镜下观察见THP-1细胞培养24小时后,细胞形态均一圆形悬浮生长,分布均匀,折光度良好,无颗粒,形态典型,细胞分裂生长明显,细胞数量增多,成对数期生长。随培养时间延长,细胞数目过多、生长空间及营养物质的相对不足,导致THP-1细胞生长逐步停止,之后细胞数量下降,细胞分裂消失。如图一。3.1.2 佛波酯诱导THP-1 细胞结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇对PC-3/MDR细胞耐药的体外逆转作用[J]. 杨瑜,陈明,朱伟东,张光远. 中成药. 2018(12)
[2]雷公藤内酯醇-聚乙烯亚胺-环糊精对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/Taxol逆转作用的研究[J]. 王桂芬,李健林,王慧慧,朱益民. 中华普通外科学文献(电子版). 2017(03)
[3]p-AKT、FOXO3a、Bim在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义[J]. 胡晓静,李红雨,余亚南,刘星烁,韩会会,曹蒙. 中国妇幼保健. 2017(06)
[4]猪苓多糖诱导M2亚型巨噬细胞向M1巨噬细胞转化[J]. 江泽波,赵晋,李思明,胡金萍,曾星. 中国免疫学杂志. 2015(08)
[5]中医药逆转肿瘤多药耐药的策略及研究进展[J]. 徐叶峰,刘云霞,沈敏鹤,阮善明. 中国中西医结合杂志. 2015(07)
[6]雷公藤内酯醇洗脱支架对小型猪冠状动脉内膜增生及细胞分裂周期基因2、基质金属蛋白酶2表达的影响[J]. 胡德喜,陆东风,林刚毅. 中国临床保健杂志. 2014(04)
[7]雷公藤内酯醇联合紫杉醇对COC1/DDP细胞凋亡的影响及其对PI3K/AKT/GSK3β信号通路的调控[J]. 刘斐,谭布珍. 现代妇产科进展. 2013(12)
[8]雷公藤内酯醇与非小细胞肺癌研究进展[J]. 王丽,宋勇. 中国肺癌杂志. 2013(07)
[9]PI3K/AKT/GSK3β信号通路在上皮性卵巢癌细胞增殖与耐药中的作用[J]. 刘斐,谭布珍. 天津医药. 2013(06)
[10]糖蛋白抗肿瘤作用及其机制的研究进展[J]. 王慧昀,吴杰连,袁野. 宁夏农林科技. 2012(06)
硕士论文
[1]雷公藤氯内酯醇通过PI3K信号通路诱导肺癌细胞的自噬并增加A549/DDP对顺铂的敏感性[D]. 宋天娇.福建医科大学 2017
[2]雷公藤内酯醇对人多发性骨髓瘤耐药细胞株MM.1R的作用研究[D]. 潘含章.浙江大学 2006
本文编号：2896567
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/2896567.html
教材专著
