真菌多糖的抗结直肠癌机理活性研究
发布时间：2021-01-05 21:55
真菌多糖主要存在于真菌子实体、菌丝体和发酵液中,研究表明真菌多糖具有抗肿瘤、免疫增强、抗病毒等多种生物活性,尤其在抗肿瘤方面,真菌多糖可通过直接或间接途径来抑制肿瘤细胞增殖并诱导其发生凋亡,引起广大学者的关注。结肠癌是世界排名第三的消化道恶性肿瘤,随着人们生活方式和饮食习惯的改变,中国结肠癌的发病率和死亡率逐年上升。目前,治疗结肠癌的主要方式是手术切除、辅以化疗为主,但患者通常预后不良,出现严重的毒副作用。因此,寻找治疗或辅助治疗结肠癌的新型、无毒副作用的药物是必要的。拟康氏木霉（Trichoderma kanganensis）是本实验室从玉米秸秆中分离到的一株菌株,经鉴定,属于真菌类半知菌亚门、丝胞纲、木霉属,前期研究发现拟康氏木霉具有抑菌作用,但是并未对该菌的其它活性进行深入研究。黑根霉（Rhizopus nigricans）是一种接合菌丝状真菌,本课题组前期从其发酵液中提取分离到一种分子量为9,682 Da的活性多糖EPS1-1,证实EPS1-1具有免疫增强活性,可诱导人结肠癌细胞HCT-116和小鼠结肠癌细胞CT26凋亡,抑制S180荷瘤和CT26移植瘤小鼠肿瘤的生长和转移以及...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：158 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１拟康氏木霉菌丝体多糖的发酵及形态
?山东大学博士毕业论文???交换柱进行初步分离，可见在〇－〇．５ＭＮａＣｌ缓冲液处有组分被洗脱出来，根据洗??脱曲线的峰形收集洗脱下来的组分（图２．２Ａ）；对上述得到的多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－??１００凝胶层析柱进一步纯化，可得到单一且对称的峰，将组分进行收集（图２．２Ｂ）；??最后将上述得到的多糖再经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ?Ｓ－３００ＨＲ进一步纯化，呈现单一的洗脱峰??（图２．２Ｃ），透析后冷冻千燥，并命名为ＴＰＳ。??Ｉ?ＨＵ－ｙ??１?ｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ?ｋａｎｇａｎｃｎｓｉｓ?Ｌｉｑｕｉｄ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｍｙｃｅｌｉａ?Ｍｙｃｃｌｉａ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ??图２．１拟康氏木霉菌丝体多糖的发酵及形态。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｍｏｑ３ｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｍｙｃｅｌｉａ?ｏｆ?Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ??ｋａｎｇａｎｅｎｓｉｓ．??Ａ?Ｂ?Ｃ??ｉ?＇丨厂?—?．?］?Ｉ??！?＇?Ｌｌ?Ｉ；?Ｉ??｜?／?「ｆ?Ｉ?Ｉ＂＇?＇?！；??＇ｉ＇ＵＬ—１?ｕ＼—??￣?０?２０?４０?６０?ＨＯ?－■??、ｕｍｂｅｒ?ｏｒｉｕｂｅＭ＾ｔｍｌｌｕｂｅｔ?Ｎ〇ｍｌ？？ｒ?ｎｆ?ｌｕｂｅ?（ｉ．ｆｍＭｕｂｒ）??＼ｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｌｕｂｔ－?（３ｍｌ＇ｌｕｈｃ）??图２．２拟康氏木霉菌丝体粗多糖的分禺纯化。（Ａ?）?ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｉｏｗ层析图；??（Ｂ）?ＳｅｐｈａｄｅｘＧ＿１００?层析图；（Ｃ）?ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００?ＨＲ?层析图。??Ｆｉｇ．
?山东大学博士毕业论文???根据回归方程Ｙ＝０．００５６ｘ＋０．０９３，相关系数为Ｒ２＝０．９９８６，即可计算出ＴＰＳ的总??糖含量为９９．５２９％。ＴＰＳ中没有检测出蛋白含量。ＴＰＳ的碘－碘化钾反应表现为阴??性，表明ＴＰＳ样品中不含淀粉。对ＴＰＳ进行全波长紫外扫描，在２６０ｎｍ和２８０??ｎｍ处均未见明显的吸收峰，表明ＴＰＳ中不含蛋白质和核酸（图２．３）。??２?５??１：＼??０５?■?＼??〇??■?ｒ?．??????２００?２５０?３００?３５０?４００?４５０?５００??Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ（ｎｍ）??图２．３?ＴＰＳ的紫外全波长扫描图谱??Ｆｉｇ．?２．３?Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ?ｆｕｌｌ?ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ?ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＴＰＳ．??２．３．３?ＴＰＳ的纯度和平均分子童分析??ＨＰＳＥＣ－ＭＡＬＳ可用于分析ＴＰＳ的纯度及分子量分布情况。在ＲＩ信号图谱??中，ＴＰＳ表现出对称且尖锐的峰Ｃ图２．４），而在图２．５中ＴＰＳ分子量分布范围较??窄，表明ＴＰＳ是均一的多糖组分。表２．１中总结了?ＴＰＳ的分析结果。ＴＰＳ的重??均分子量（Ｍｗ）、数均分子量（Ｍｎ）和ｚ－均分子量（Ｍｚ）分别为３．０７４ｅ＞＜１０５Ｄａ、??１．７２８ｅｘｌ〇５Ｄａ?和?３．１６６ｅｘｌ〇６Ｄａ，多分散指数（Ｍｗ／Ｍｎ）为?１．７２５。ＴＰＳ?的重均均??方半径（Ｒｗ）、数均均方半径（Ｒｎ）和Ｚ均均方半径分别为３１．１?ｎｍ、３４．７ｎｍ和??３３．５?ｎｍ。表明ＴＰＳ均一且结构较为紧密，与多糖的分离纯化结果较为一致。??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]香菇多糖联合XELOX方案治疗老年晚期结直肠癌临床观察[J]. 刘阳阳. 泰山医学院学报. 2017(11)
[2]香菇多糖对结肠癌化疗患者免疫功能及外周血中炎症因子水平的影响[J]. 万盟,朱余兵,邱润泽,田星,朱庆贵. 中国医药导报. 2017(12)
[3]基于GC-TOF-MS的结直肠癌代谢组学差异分析[J]. 于斐,刘少壮,仲明惟,黄鑫,焦杰,胡三元,于文滨. 山东大学学报(医学版). 2016(07)
[4]香菇多糖联合XELOX方案化疗对晚期结肠癌临床疗效分析[J]. 刘振海,冯起校,胡翠莲. 吉林医学. 2015(15)
[5]牛磺酸的研究进展[J]. 胡艳丽,李瑞雪,井丽巍. 黑龙江医药. 2015(04)
[6]牛磺酸研究进展[J]. 顾庆南,李吕木,许翔,张民扬. 饲料博览. 2015(05)
[7]香菇多糖注射液联合FOLFOX方案治疗晚期结肠癌的效果观察[J]. 董霞,李欠欠. 实用癌症杂志. 2015(01)
[8]AMPK在非小细胞肺癌发生发展中的研究进展[J]. 熊延路,王明星,卢强,李小飞,朱爱林,赵晋波,韩勇. 现代生物医学进展. 2014(34)
[9]香菇多糖联合化疗对晚期结肠癌患者的临床疗效[J]. 王小红,余新民,沈祝苹,罗聪. 中国医药导报. 2014(17)
[10]鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J]. 王思芦,汪开毓,赵玲,陈德芳,周赵英. 中国药理学通报. 2013(01)
本文编号：2959366
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：158 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１拟康氏木霉菌丝体多糖的发酵及形态
?山东大学博士毕业论文???交换柱进行初步分离，可见在〇－〇．５ＭＮａＣｌ缓冲液处有组分被洗脱出来，根据洗??脱曲线的峰形收集洗脱下来的组分（图２．２Ａ）；对上述得到的多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－??１００凝胶层析柱进一步纯化，可得到单一且对称的峰，将组分进行收集（图２．２Ｂ）；??最后将上述得到的多糖再经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ?Ｓ－３００ＨＲ进一步纯化，呈现单一的洗脱峰??（图２．２Ｃ），透析后冷冻千燥，并命名为ＴＰＳ。??Ｉ?ＨＵ－ｙ??１?ｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ?ｋａｎｇａｎｃｎｓｉｓ?Ｌｉｑｕｉｄ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｍｙｃｅｌｉａ?Ｍｙｃｃｌｉａ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ??图２．１拟康氏木霉菌丝体多糖的发酵及形态。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｍｏｑ３ｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｍｙｃｅｌｉａ?ｏｆ?Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ??ｋａｎｇａｎｅｎｓｉｓ．??Ａ?Ｂ?Ｃ??ｉ?＇丨厂?—?．?］?Ｉ??！?＇?Ｌｌ?Ｉ；?Ｉ??｜?／?「ｆ?Ｉ?Ｉ＂＇?＇?！；??＇ｉ＇ＵＬ—１?ｕ＼—??￣?０?２０?４０?６０?ＨＯ?－■??、ｕｍｂｅｒ?ｏｒｉｕｂｅＭ＾ｔｍｌｌｕｂｅｔ?Ｎ〇ｍｌ？？ｒ?ｎｆ?ｌｕｂｅ?（ｉ．ｆｍＭｕｂｒ）??＼ｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｌｕｂｔ－?（３ｍｌ＇ｌｕｈｃ）??图２．２拟康氏木霉菌丝体粗多糖的分禺纯化。（Ａ?）?ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｉｏｗ层析图；??（Ｂ）?ＳｅｐｈａｄｅｘＧ＿１００?层析图；（Ｃ）?ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００?ＨＲ?层析图。??Ｆｉｇ．
?山东大学博士毕业论文???根据回归方程Ｙ＝０．００５６ｘ＋０．０９３，相关系数为Ｒ２＝０．９９８６，即可计算出ＴＰＳ的总??糖含量为９９．５２９％。ＴＰＳ中没有检测出蛋白含量。ＴＰＳ的碘－碘化钾反应表现为阴??性，表明ＴＰＳ样品中不含淀粉。对ＴＰＳ进行全波长紫外扫描，在２６０ｎｍ和２８０??ｎｍ处均未见明显的吸收峰，表明ＴＰＳ中不含蛋白质和核酸（图２．３）。??２?５??１：＼??０５?■?＼??〇??■?ｒ?．??????２００?２５０?３００?３５０?４００?４５０?５００??Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ（ｎｍ）??图２．３?ＴＰＳ的紫外全波长扫描图谱??Ｆｉｇ．?２．３?Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ?ｆｕｌｌ?ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ?ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＴＰＳ．??２．３．３?ＴＰＳ的纯度和平均分子童分析??ＨＰＳＥＣ－ＭＡＬＳ可用于分析ＴＰＳ的纯度及分子量分布情况。在ＲＩ信号图谱??中，ＴＰＳ表现出对称且尖锐的峰Ｃ图２．４），而在图２．５中ＴＰＳ分子量分布范围较??窄，表明ＴＰＳ是均一的多糖组分。表２．１中总结了?ＴＰＳ的分析结果。ＴＰＳ的重??均分子量（Ｍｗ）、数均分子量（Ｍｎ）和ｚ－均分子量（Ｍｚ）分别为３．０７４ｅ＞＜１０５Ｄａ、??１．７２８ｅｘｌ〇５Ｄａ?和?３．１６６ｅｘｌ〇６Ｄａ，多分散指数（Ｍｗ／Ｍｎ）为?１．７２５。ＴＰＳ?的重均均??方半径（Ｒｗ）、数均均方半径（Ｒｎ）和Ｚ均均方半径分别为３１．１?ｎｍ、３４．７ｎｍ和??３３．５?ｎｍ。表明ＴＰＳ均一且结构较为紧密，与多糖的分离纯化结果较为一致。??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]香菇多糖联合XELOX方案治疗老年晚期结直肠癌临床观察[J]. 刘阳阳. 泰山医学院学报. 2017(11)
[2]香菇多糖对结肠癌化疗患者免疫功能及外周血中炎症因子水平的影响[J]. 万盟,朱余兵,邱润泽,田星,朱庆贵. 中国医药导报. 2017(12)
[3]基于GC-TOF-MS的结直肠癌代谢组学差异分析[J]. 于斐,刘少壮,仲明惟,黄鑫,焦杰,胡三元,于文滨. 山东大学学报(医学版). 2016(07)
[4]香菇多糖联合XELOX方案化疗对晚期结肠癌临床疗效分析[J]. 刘振海,冯起校,胡翠莲. 吉林医学. 2015(15)
[5]牛磺酸的研究进展[J]. 胡艳丽,李瑞雪,井丽巍. 黑龙江医药. 2015(04)
[6]牛磺酸研究进展[J]. 顾庆南,李吕木,许翔,张民扬. 饲料博览. 2015(05)
[7]香菇多糖注射液联合FOLFOX方案治疗晚期结肠癌的效果观察[J]. 董霞,李欠欠. 实用癌症杂志. 2015(01)
[8]AMPK在非小细胞肺癌发生发展中的研究进展[J]. 熊延路,王明星,卢强,李小飞,朱爱林,赵晋波,韩勇. 现代生物医学进展. 2014(34)
[9]香菇多糖联合化疗对晚期结肠癌患者的临床疗效[J]. 王小红,余新民,沈祝苹,罗聪. 中国医药导报. 2014(17)
[10]鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J]. 王思芦,汪开毓,赵玲,陈德芳,周赵英. 中国药理学通报. 2013(01)
本文编号：2959366
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