缺氧通过HIF-1α-fascin-1环路促进下咽鳞癌侵袭和转移的机制研究
发布时间：2021-01-15 16:48
第一部分 Fascin-1促进下咽鳞癌侵袭和转移的机制研究实验目的:Fascin-1是一种肌动蛋白成束蛋白,主要与F-actin结合并连接成有序、平行的微丝束,参与细胞粘附和细胞迁移的调控,在多种肿瘤呈高表达,并与肿瘤的侵袭转移密切相关。然而fascin-1在下咽鳞癌组织中的表达情况以及fascin-1在下咽癌侵袭和转移中的内在分子机制尚不明确。因此,本实验主要研究以下二个方面的内容:1、探讨fascin-1在下咽鳞癌组织的表达及其与临床病理资料和预后的关系;2、探讨fascin-1表达变化对下咽癌FaDu细胞形态、迁移和侵袭能力的影响以及fascin-1促进下咽癌侵袭和转移的内在分子机制。实验方法:1、以96例下咽鳞癌组织标本为研究对象,采用免疫组织化学法,检测fascin-1蛋白在下咽鳞癌癌组织和癌旁组织的表达情况,并进一步分析其表达与下咽鳞癌临床病理资料（年龄,性别、肿瘤大小、临床分期、病理分级、颈淋巴结转移、肺转移）及预后的关系。2、以下咽癌FaDu细胞系为研究对象,分别应用fascin-1 siRNA和fascin-1过表达质粒转染下咽癌FaDu细胞,沉默或上调fascin-...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．?Ｆａｓｃｉｎ－１蛋白结构??
?山东大学博士学位论文???试验结果??１．?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌组织的表达及其与下咽癌临床病理资料和预后的关系??１．１?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌组织及癌旁组织的表达??为研宂ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌组织的表达情况，应用免疫组织化学ＳＰ法对??９６例下咽鱗癌组织标本进行ｆａｓｃｉｎ－１检测，明确ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌组织??和癌旁组织的表达水平。结果如图１所示：Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌组织和癌旁??组织中均有不同程度的表达，其表达主要位于细胞质和细胞膜。Ｆａｓｃｉｎ－１在下??咽癌癌旁组织中多呈低表达或部分中表达，并且ｆａｓｃｉｎ－１表达主要局限十粘膜??基底层细胞（图ＩＤ）；?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鳞癌癌组织中可呈现低、中、高不同程度??的表达，并且ｆａｓｃｉｎ－１在肿瘤组织侵袭前缘的表达强度明显高于其它区域（图??１Ｈ）。??Ａ?＿＿°????癌旁组织??ｘｉｂａ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂｏ?＂?■?？?ｘ２〇ｏ??Ｅ？??／Ｆ?＼????癌姐织■，舞：ｐ．＇；?ｆｃ：ｖ?？??％?ｖ??Ｌ?Ｌ?Ｉ??ｘｉｂｕ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂａ?＂?－?ｉｘ２〇ｏ??图１免疫组织化学检测ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌组织的表达Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁??组织（Ａ，?Ｂ，Ｃ和Ｄ）和癌组织（Ｅ，Ｆ，?Ｇ和Ｈ）的表达；Ｂ，?Ｄ，Ｆ和Ｈ分别为Ａ，?Ｃ，?Ｅ和??Ｇ中框内区域的高倍镜下表现；Ａ，?Ｂ，?Ｅ和Ｆ显示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁组织和癌??组织的阴性表达；Ｃ，?Ｄ，?Ｇ和Ｈ显示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁组织和癌组织的阳性??表达（Ｘ１００，Ｘ２００）。??进一
ｎ－１??？?一?Ｕ??—？?＇Ｎｅｇａｔｉｖｅ??＿｜４ｎ?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ??—ｉ—?Ｎｅｇａｔｉｖｅ－ｃｅｎｓｏｒｅｄ??ｑ?ｇ－?—｜Ｐｏｓｉｔｉｖｅ－ｃｅｎｓｏｒｅｄ??＾?Ｐ?二?０．３６５??■§?＿?￣？￣＇￣—??匕?０．６－??＞??＞??ｗ?０．４－??１??ａｉ??＞??Ｏ??０．２－??ｏ．ｏ－??Ｉ?ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２０?４０?６０?８０??Ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｔｉｍｅ?（ｍｏｎｔｈｓ）??图２?Ｆａｓｃｉｎ－１表达与下咽癌患者预后关系采用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法统计分析??ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌组织的表达与下咽癌患者３年生存率的关系，结果显示??Ｐ＝０．?３６５，两者无明显相关。??２．?Ｆａｓｃｉｎ－１表达变化对下咽癌ＦａＤｕ细胞侵袭和迁移能力的影响??２．１转染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ或质粒ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ可下调或上调下咽癌ＦａＤｕ细??胞中ｆａｓｃｉｎ－１的表达??为了进一步研究ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌侵袭和转移中的作用，我们利用??ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ?和?ｆａｓｃｉｎ－１?质粒（ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ）转染下咽癌?ＦａＤｕ?细胞，??分别沉默和过表达ｆａｓｃｉｎ－１，并应用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测转染效率。为了验证转??染效率，通过设置２４?ｈ、４８?ｈ和７２?ｈ三个时间梯度，应用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测??ｆａｓｃｉｎ－１蛋白在转染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮＡ或ＧＶ１４４－ｆａｓｃｉｎ－ｌ的下咽癌ＦａＤｕ细胞中??表达变化。结果如图３Ａ所示：在转染ｆａｓｃｉｎ－１?ｓｉＲＮ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Fascin promotes the motility and invasiveness of pancreatic cancer cells[J]. Yan-Feng Xu, Shuang-Ni Yu, Zhao-Hui Lu, Jian-Ping Liu, Jie Chen, Department of Pathology, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Tsinghua University, Beijing 100730, China. World Journal of Gastroenterology. 2011(40)
本文编号：2979169
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．?Ｆａｓｃｉｎ－１蛋白结构??
?山东大学博士学位论文???试验结果??１．?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌组织的表达及其与下咽癌临床病理资料和预后的关系??１．１?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌组织及癌旁组织的表达??为研宂ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌组织的表达情况，应用免疫组织化学ＳＰ法对??９６例下咽鱗癌组织标本进行ｆａｓｃｉｎ－１检测，明确ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌组织??和癌旁组织的表达水平。结果如图１所示：Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鱗癌癌组织和癌旁??组织中均有不同程度的表达，其表达主要位于细胞质和细胞膜。Ｆａｓｃｉｎ－１在下??咽癌癌旁组织中多呈低表达或部分中表达，并且ｆａｓｃｉｎ－１表达主要局限十粘膜??基底层细胞（图ＩＤ）；?Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽鳞癌癌组织中可呈现低、中、高不同程度??的表达，并且ｆａｓｃｉｎ－１在肿瘤组织侵袭前缘的表达强度明显高于其它区域（图??１Ｈ）。??Ａ?＿＿°????癌旁组织??ｘｉｂａ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂｏ?＂?■?？?ｘ２〇ｏ??Ｅ？??／Ｆ?＼????癌姐织■，舞：ｐ．＇；?ｆｃ：ｖ?？??％?ｖ??Ｌ?Ｌ?Ｉ??ｘｉｂｕ?ｘ２〇ｏ?ｘｉｂａ?＂?－?ｉｘ２〇ｏ??图１免疫组织化学检测ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌组织的表达Ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁??组织（Ａ，?Ｂ，Ｃ和Ｄ）和癌组织（Ｅ，Ｆ，?Ｇ和Ｈ）的表达；Ｂ，?Ｄ，Ｆ和Ｈ分别为Ａ，?Ｃ，?Ｅ和??Ｇ中框内区域的高倍镜下表现；Ａ，?Ｂ，?Ｅ和Ｆ显示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁组织和癌??组织的阴性表达；Ｃ，?Ｄ，?Ｇ和Ｈ显示ｆａｓｃｉｎ－１在下咽癌癌旁组织和癌组织的阳性??表达（Ｘ１００，Ｘ２００）。??进一
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Fascin promotes the motility and invasiveness of pancreatic cancer cells[J]. Yan-Feng Xu, Shuang-Ni Yu, Zhao-Hui Lu, Jian-Ping Liu, Jie Chen, Department of Pathology, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Tsinghua University, Beijing 100730, China. World Journal of Gastroenterology. 2011(40)
本文编号：2979169
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