复方芪参提取物调控TGF-β/Smad信号及miR-145、miR-21表达发挥抗肝纤维化—肝细胞癌作用

发布时间：2021-03-01 14:08

　　背景肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）死亡率高,是威胁人类健康的重大疾病之一。多数HCC均由慢性肝脏炎症和肝纤维化发展而来,深入研究HCC的发病机制,寻求特异的药物作用靶点,开发新的药物,阻断慢性肝炎-肝纤维化-HCC的发展过程是防治HCC的重要途径。TGF-b信号通路是迄今研究最为深入、与肝脏慢性炎症-纤维化-HCC转化关系最为紧密的信号通路之一,在抗肝纤维化-HCC药物的机制研究中受到特别关注。TGF-β1通过Ⅰ型TGF-b受体（TGF-btypeⅠreceptor,TbRⅠ）磷酸化Smad2、Smad3的C末端（C-terminal region,C）,另一方面活化促分裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路,包括细胞外信号调节激酶（Extracellular signal-regulated kinase,ERK）通路、c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）通路和p38通路,磷酸化Smad2、Smad3的连接区（Linker region,L）,... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：124 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英文缩略词表（ABBREVIATION）
中文摘要
ABSTRACT
1 前言
2 材料和方法
    2.1 动物
    2.2 细胞
    2.3 药品与试剂
        2.3.1 药品
        2.3.2 主要试剂
        2.3.3 主要试剂配制
    2.4 主要仪器
    2.5 实验方法
        2.5.1 动物分组及处理
        2.5.2 组织芯片制作
        2.5.3 免疫组化SP法检测Smad4、PAI-1 蛋白表达
        2.5.4 Western blot法检测肝脏组织中Smad4、Smad7、PAI-1、Imp7、Imp8
        2.5.5 qRT-PCR检测肝脏组织中miR-145和miR-21表达
        2.5.6 细胞培养分组和处理
        2.5.7 qRT-PCR检测HepG2细胞中miR-145和miR-21表达
    2.6 统计分析
3 结果
    3.1 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中SMAD4表达的影响
        3.1.1 第12周肝纤维化期CASE对Smad4表达的影响
        3.1.2 第16周肝癌期CASE对Smad4表达的影响
    3.2 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中PAI-1 表达的影响
        3.2.1 第12周肝纤维化期CASE对PAI-1 表达的影响
        3.2.2 第16周肝癌期CASE对PAI-1 表达的影响
    3.3 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中SMAD7表达的影响
        3.3.1 第12周肝纤维化期CASE对Smad7表达的影响
        3.3.2 第16周肝癌期CASE对Smad7表达的影响
    3.4 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中IMP7/IMP8表达的影响
        3.4.1 第12周肝纤维化期CASE对Imp7/Imp8表达的影响
        3.4.2 第16周肝癌期CASE对Imp7/Imp8表达的影响
    3.5 实时定量PCR实验结果分析
        3.5.1 实时定量PCR扩增曲线分析
        3.5.2 PCR产物融解曲线分析
    3.6 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中MIR-145表达的影响
        3.6.1 第12周肝纤维化期CASE对miR-145表达的影响
        3.6.2 第16周肝癌期CASE对mi R-145表达的影响
    3.7 CASE对DEN大鼠肝纤维化-肝癌模型肝脏组织中MIR-21表达的影响
        3.7.1 第12周肝纤维化期CASE对miR-21表达的影响
        3.7.2 第16周肝癌期CASE对mi R-21表达的影响
    3.8 HEPG2细胞中CASE对MIR-145表达的影响
        3.8.1 HepG2细胞中TGF-b1对miR-145表达影响的时效关系
        3.8.2 HepG2细胞中CASE对miR-145表达的影响
    3.9 HEPG2细胞中CASE对MIR-21表达的影响
        3.9.1 HepG2细胞中TGF-b1对miR-21表达影响的时效关系
        3.9.2 HepG2细胞中CASE对mi R-21表达的影响
4.讨论
    4.1 CASE对PAI-1 表达的调控作用
    4.2 CASE对SMAD4表达的调控作用
    4.3 CASE对SMAD7表达的调控作用
    4.4 CASE对IMP7和IMP8表达的调控作用
    4.5 CASE对MIR-145和MIR-21表达的调控作用
5 结论
6 下一步研究设想和展望
7 参考文献
附录 一个人简历
附录二 致谢
附录三 综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]孙桂芝教授治疗肝癌常用中药探析[J]. 李川,吕文良,何立丽,孙桂芝.  吉林中医药. 2013(06)
[2]DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌过程中pSmad3L和PAI-1蛋白的表达[J]. 芮文娟,何淑芳,黄先甲,方政,杭欣,李前进,胡敏,杨雁.  中国药理学通报. 2012(10)
[3]黄芪多糖对继发性胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型TGF-β1的影响[J]. 徐方明,过建春,包剑锋,王运发,徐骐.  中华中医药学刊. 2012(05)
[4]Sal B对肝癌细胞株HepG2的促凋亡作用[J]. 李艳,张端莲,王兰,蔡丽华,吴慧芬,王燕舞,桂志祥,梨莉,谈新提.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2012(01)
[5]黄芪总苷对肝癌BEL-7402细胞株的抑制作用[J]. 黄熠,胡火珍.  时珍国医国药. 2011(05)
[6]黄芪多糖对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其机制[J]. 冯涛,张保国.  实用老年医学. 2010(06)
[7]原发性肝癌中医病机初探[J]. 汤秀红.  中医药学报. 2010(06)
[8]OPN和PAI-1在肝纤维化时的表达特征[J]. 张斌,赵莹,陈建杰,王灵台.  世界华人消化杂志. 2010(11)
[9]敲除Smad4基因对小鼠肝纤维化与肝癌发生和发展的影响[J]. 徐新保,何振平,冷希圣,梁志清,彭吉润,张洪义,张宏义,肖梅,张辉,刘承利,张希东.  中华肝脏病杂志. 2010 (02)
[10]注射用黄芪多糖治疗原发性肝癌的疗效观察[J]. 方晓松,周颦.  重庆医学. 2009(08)

博士论文
[1]MAPK通路调控下经TGF-β1/Smad信号途径的肝纤维化—肝癌发病机制研究[D]. 谢雷.安徽医科大学 2014
[2]复方芪参提取物抗瘢痕疙瘩的TGF-β/Smad信号转导及MAPK通路调控机制[D]. 何淑芳.安徽医科大学 2012

硕士论文
[1]复方黄芪提取物抗肝纤维化作用机制的研究[D]. 朱虹.安徽医科大学 2006
[2]复方黄芪提取物抗肝纤维化作用及其机理的研究[D]. 胡秀萍.安徽医科大学 2005



本文编号：3057592