肠道微生物刺激组织蛋白酶K分泌介导TLR4依赖的M2巨噬细胞极化并促进结直肠癌转移

发布时间：2021-03-17 10:38

　　研究背景和目的:结直肠癌（CRC）是全球发病率第三的恶性肿瘤,肿瘤微环境在CRC的发生进展尤其是远处转移过程中发挥重要作用。作为微环境的重要组成,肠道微生物群的失衡在CRC的在启动及进展过程中的具体机制仍然未知。本项研究旨在探讨肠道固有菌群失衡与结直肠癌发生侵袭转移的关联,寻求肠道菌群与肿瘤以及肿瘤微环境间潜在作用机制。研究方法:1、四联抗生素处理构建小鼠菌群失衡模型,RT-PCR及mRNA芯片分析筛选菌群失衡相关的肿瘤转移关键蛋白;2、Western Blot和免疫组织化学染色检测人结直肠癌组织中该蛋白的表达,分析其表达与临床参数的关系;3、应用Transwell、划痕和细胞3D培养、CCK8、平板克隆、裸鼠皮下成瘤和尾静脉肺转移模型观察蛋白内源性改变对CRC细胞体内外增殖和转移能力的影响;4、应用巨噬细胞样细胞和小鼠腹腔原代巨噬细胞,与肿瘤细胞建立共培养体系;5、流式细胞术和免疫荧光检测加入外源性重组蛋白后巨噬细胞形态及分型改变,Western Blot及免疫荧光检测巨噬细胞信号通路的变化;6、免疫共沉淀（CO-IP）及免疫荧光共定位筛选分泌型蛋白与巨噬细胞的作用靶点;7、蛋白芯片... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－ｈ四联抗生素构建小鼠模型示意图??

图１－２：?ＣＲＣ组织和相邻非肿瘤组织中脂多糖（ＬＰＳ）的ＩＨＣ分析

图１－４：抗生素处理大肠杆菌失衡模型组（Ｅｘｏｌｉ）与对照组（ＮＣ）原位肿瘤大小

【参考文献】：
期刊论文
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[2]血清IL-10检测在结直肠癌临床诊断及复发评估中的应用[J]. 张秋环,李文靖,刘刚,郝亮.  中国继续医学教育. 2017(29)
[3]巨噬细胞M1/M2极化的信号通路研究进展[J]. 阮静瑶,陈必成,张喜乐,张戎,黄欢捷.  免疫学杂志. 2015(10)
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本文编号：3087012