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LncRNA MEG3调控血管平滑肌细胞崩解在子宫螺旋动脉重铸中的作用

发布时间:2021-04-10 13:35
  第一部分MEG3调节VSMC功能在螺旋动脉重铸中的作用目的通过研究MEG3在子痫前期胎盘和蜕膜中的表达,同时在基因水平靶向调控MEG3在人主动脉血管平滑肌细胞系HA-VSMC中的表达,探讨MEG3调节VSMC功能在螺旋动脉重铸中的作用。方法1.实验分组:子痫前期组和正常妊娠对照组:收集两组孕妇晚孕期胎盘和蜕膜组织,q RT-PCR检测两组组织中MEG3的表达;2.收集正常孕妇人工流产蜕膜组织,利用原位杂交定位MEG3在螺旋动脉肌层的表达,3.MEG3的调控:(1)上调MEG3:转染MEG3过表达质粒至VSMC(MEG3过表达组);(2)下调MEG3:转染MEG3干扰质粒至VSMC(MEG3抑制组);(3)分别转染相应的空白质粒(阴性对照组);(4)不做处理的VSMC(空白对照组);4.检测转染效率:q RT-PCR检测MEG3 m RNA表达;5.CCK-8法测定转染后各组细胞活性;6.流式细胞术检测转染后各组细胞凋亡水平;7.Transwell模型检测转染后各组细胞的迁移能力;结果1.子痫前期组胎盘和蜕膜组织中MEG3的表达明显低于正常孕妇;原位杂交结果显示MEG3广泛表达于蜕膜间质... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:92 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

LncRNA MEG3调控血管平滑肌细胞崩解在子宫螺旋动脉重铸中的作用


图1-1.两组孕妇标本中MEG3的表达水平子痫前期组胎盘及蜕膜组织中MEG3的表达明显低于对照组

蜕膜,蜕膜组织,原位杂交,胎盘


MEG3 的表达(0.42±0.05 vs. 0.97±0.13)显著低于正常孕妇。图 1-1. 两组孕妇标本中 MEG3 的表达水平 子痫前期组胎盘及蜕膜组织中 MEG3 的表达明显低于对照组。(placenta:胎盘;decidual:蜕膜; *P<0.05; **P<0.01)三、MEG3 在人早孕蜕膜中的定位与表达如图 1-2 所示,原位杂交结果显示,MEG3 在蜕膜 VSMC 呈阳性表达。

过表达,转染,质粒,转染效率


图 1-3. qRT-PCR 检测 MEG3 转染效率 A:转染 MEG3 干扰质粒能显著降低 VSMCMEG3 mRNA 表达水平;B:转染 MEG3 过表达质粒能显著提高 VSMC MEG3 表达。(control 代表空白对照组;shMEG3 代表 MEG3 抑制组;shNC 代表 MEG3 抑制组的阴性对照;H-MEG3 代表 MEG3 过表达组; NC 代表 MEG3 过表达组的阴性对照; *P<0.05;**P<0.01;ns 代表无统计学意义)五、MEG3 对 VSMC 功能的影响1、细胞活性CCK-8 法检测转染后 VSMC 细胞活性情况,如图 1-4 所示,同阴性对照组相比,过表达组活性降低(0.56±0.02 vs. 0.82±0.04, P<0.001),抑制组细胞活性升高(1.25±0.02 vs. 0.71±0.02, P<0.001)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]长链非编码RNA母系印记基因3对人类绒毛发育的作用[J]. 丁海遐,马妍,盛菲,纪逸萱,李文.  第二军医大学学报. 2017(02)
[2]长链非编码RNA HOTAIR调节PE滋养细胞功能的研究[J]. 邹艳芬,孙丽洲.  四川大学学报(医学版). 2015(01)



本文编号:3129730

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