蓬松蛋白的DNA甲基化修饰调控骨髓间充质干细胞成骨分化的研究

发布时间：2021-04-12 22:24

　　骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）在机体内具有潜在的多方向分化能力,可作为种子细胞参与生物体的组织构建与再生,然而怎样调控骨髓间充质干细胞向特定的功能细胞分化仍然存在许多不确定因素,只有充分阐明间骨髓充质干细胞诱导分化明确的分子调节机制,才能对其的诱导分化方向进行特定性地干预。研究表明转录调节因子是现阶段传统的调控手段,其中表观遗传修饰在骨髓间充质干细胞诱导分化调控的进程中起着至关重要的作用,研究中常用的表观遗传方式的调控主要是蛋白DNA的甲基化修饰。蓬松蛋白（Dishevelled）是涉及典型和非典型Wnt信号通路的蛋白质家族。蓬松蛋白是直接作用于卷曲受体下游的细胞质磷蛋白,其在胚胎和成年人之间都发挥重要作用,影响着从细胞分化和细胞极性到社会行为的整个过程。研究目的:本论文通过构建人骨髓间充质干细胞成骨诱导分化模型,利用特异性的DNA甲基化抑制剂（5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶）来研究蓬松蛋白中DNA启动子区CpG岛的甲基化修饰对骨髓间充质干细胞成骨诱导分化的进程影响和调控作用,并探讨甲基化修饰对差异表达性基因表达水平的影... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

通过茜红素染色检测人骨髓间充质干细胞在诱导培养基中的诱导分化状态，时间分别为0、7、10、14、21天

蓬松蛋白的DNA甲基化修饰调控骨髓间充质干细胞成骨分化的研究31图1-2.BMSCs成骨分化过程中AKP检测，时间分别为0、7、10、14、21天。1.3.2骨髓间充质干细胞中蓬松蛋白的表达在4组骨髓间充质干细胞在成骨培养基中分别诱导分化培养0、7、14和21天后，通过逆转录酶-聚合酶链反应检测细胞分化过程中蓬松蛋白基因的mRNA表达水平，蛋白印迹法用来检测蓬松蛋白中蛋白的表达量（图1-3），实验结果显示随着骨髓间充质干细胞的分化程度不断加深，其细胞内的蓬松蛋白的表达水平随着成骨诱导分化的过程加深而升高，并且在干细胞分化的第21天达到表达的峰值。图1-3.RT-PCR和蛋白印迹法检测BMSCs成骨诱导分化过程中蓬松蛋白基因的表达水平，检测时间分别为0,7,14,21天。

蓬松蛋白的DNA甲基化修饰调控骨髓间充质干细胞成骨分化的研究31图1-2.BMSCs成骨分化过程中AKP检测，时间分别为0、7、10、14、21天。1.3.2骨髓间充质干细胞中蓬松蛋白的表达在4组骨髓间充质干细胞在成骨培养基中分别诱导分化培养0、7、14和21天后，通过逆转录酶-聚合酶链反应检测细胞分化过程中蓬松蛋白基因的mRNA表达水平，蛋白印迹法用来检测蓬松蛋白中蛋白的表达量（图1-3），实验结果显示随着骨髓间充质干细胞的分化程度不断加深，其细胞内的蓬松蛋白的表达水平随着成骨诱导分化的过程加深而升高，并且在干细胞分化的第21天达到表达的峰值。图1-3.RT-PCR和蛋白印迹法检测BMSCs成骨诱导分化过程中蓬松蛋白基因的表达水平，检测时间分别为0,7,14,21天。


本文编号：3134084