补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制
发布时间：2021-05-06 07:36
实验一补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的实验研究目的:观察补肾养血活血中药复方新加苁蓉菟丝子丸（XJCRTSZW）经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的药物疗效。方法:1、从购进的100只健康雌性SD大鼠中筛选出动情周期正常的56只大鼠作为受试动物,随机抽取8只为正常对照组予蒸馏水灌胃,其余48只按照预实验结果,予雷公藤甲素（triptolide,TP）400μg/kg.d的剂量连续灌胃60d构建卵泡发育障碍模型。2、造模后大鼠随机分为6组,每组8只:Triptolide模型组、西药戊酸雌二醇+醋酸甲羟孕酮（EV+DMPA）组、XJCRTSZW低剂量组、XJCRTSZW高剂量组,抑制剂（NVP-BEZ235）组,XJCRTSZW高剂量+抑制剂（NVP-BEZ235）组。西药对照组给予戊酸雌二醇和醋酸甲羟孕酮序贯治疗;中药低、高剂量组分别给予新加苁蓉菟丝子丸低、高剂量浸膏治疗;抑制剂组予NVP-BEZ235灌胃;XJCRTSZW高剂量+抑制剂（NVP-BEZ235）组给予高剂量中药及NVP-BEZ235灌胃;正常对照组和TP模...
【文章来源】：成都中医药大学四川省
【文章页数】：167 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
引言
第一部分 理论研究
1.卵泡发育障碍类疾病的研究进展
1.1 西医认识及研究进展
1.2 中医认识及研究进展
2.卵泡发育障碍相关分子机制研究进展
2.1 细胞凋亡、自噬与卵泡发育、闭锁相关性研究
2.2 中医药经PI3K/AKT/mTOR通路调控细胞凋亡与自噬
3.导师对卵巢功能低下与卵泡发育障碍类疾病的认识
3.1 病因病机
3.2 诊治经验
第二部分 实验研究
本课题研究基础及创新性
1.课题基础
2.课题创新点
实验一 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的实验研究
1.技术路线
2.实验材料
2.1 实验动物及实验条件
2.2 主要药物、试剂及仪器
3.实验方法
3.1 实验模型的构建
3.2 实验分组情况及给药方法
3.3 检测指标与方法
4.统计分析
5.实验结果
5.1 XJCRTSZW对大鼠一般情况的影响
5.2 XJCRTSZW对大鼠血清中性激素的影响
5.3 XJCRTSZW对大鼠血清中ET、NO及ET/NO的影响
5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢湿重、卵巢指数及卵巢组织的影响
5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的影响
6.讨论
6.1 补肾养血活血法对于卵泡发育障碍类疾病的干预
6.2 雷公藤甲素造模
6.3 阳性药物的选择
6.4 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的结果分析
7.结论
实验二 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制
1.技术路线
2.实验材料
2.1 实验动物及实验条件
2.2 主要药物、试剂及仪器
3.实验方法
3.1 大鼠含药血清制备
3.2 大鼠原代颗粒细胞的提取与培养
3.3 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞鉴定
3.4 含药血清培养颗粒细胞分组、TP诱导及其他受试药物的添加
3.5 检测指标与方法
4.统计分析
5.实验结果
5.1 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞形态学观察
5.2 大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定
5.3 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞活力的影响
5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响
5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞上清中性激素分泌的影响
5.6 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬流的影响
5.7 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬小体、自噬溶酶体形成的影响
5.8 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及自噬流相关因子蛋白表达水平的影响
5.9 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞中凋亡及自噬流相关因子的mRNA相对表达量的影响
5.10 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的的影响
5.11 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路轴相关分子mRNA相对表达量的影响
6.讨论
6.1 颗粒细胞被选为研究对象的原因
6.2 阳性对照药的选择
6.3 自噬诱导剂与凋亡诱导剂的选择
6.4 自噬流的检测
6.5 补肾中药通过细胞信号转导通路调节卵泡发育
6.6 调控细胞凋亡与自噬是中医药发挥药理作用的重要分子机制
6.7 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制
7.结论
问题与展望
致谢
参考文献
附件
附件一 综述
综述一
参考文献
综述二
参考文献
附件二 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性应激对卵巢早衰大鼠血清中E2、FSH、LH及β- EP水平的影响[J]. 阿卜力孜·克热木,阿孜古丽·要力瓦斯,穆拉迪力·约麦尔,玛依热·吐尔哄,纳菲沙·卡德尔,夏米西努尔·伊力克. 中华中医药学刊. 2019(03)
[2]气与细胞自噬的相关性[J]. 颜培正,张庆祥,王诗源,孟庆岩. 中医杂志. 2019(02)
[3]当归化学成分及药理作用的分析[J]. 曹颜冬. 世界最新医学信息文摘. 2019(02)
[4]基于数据挖掘技术的针灸治疗卵巢早衰选穴规律分析[J]. 张晶,孙英霞,黄海量,张永臣,贾红玲,孙振高,卢岩,王世军. 山东中医药大学学报. 2018(06)
[5]菟丝子总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠模型的影响[J]. 苗明三,彭孟凡,闫晓丽. 中国实验方剂学杂志. 2019(05)
[6]中医药通过mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的研究进展[J]. 郜然然,周慧,吴也可,贺宇,吴克明. 中国实验方剂学杂志. 2019(04)
[7]针灸治疗卵巢早衰脾肾阳虚型临床观察[J]. 李文芳,郭钦源,谢丽凤. 实用中医药杂志. 2018(10)
[8]辅助生殖技术在多囊卵巢综合征患者上的应用综述[J]. 雷兰杰,王琪,杨磊,傅文学. 九江学院学报(自然科学版). 2018(03)
[9]细胞自噬与相关中医辨证体系的研究进展[J]. 胡朋言,王伟,梁雪,李蓓蕾,王思超,王仕衍,纪云西,谢博文. 中华中医药学刊. 2018(09)
[10]补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰模型小鼠卵巢PI3K/AKT通路的影响[J]. 黄晋琰,徐珉,王彦彦,温丹婷,林夏静. 中国中西医结合杂志. 2018(10)
博士论文
[1]基于PI3K/Akt信号通路探讨平喘颗粒干预气道上皮细胞自噬与凋亡的机制[D]. 蒋鹏娜.黑龙江中医药大学 2018
[2]基于PI3K/AKT/mTOR信号通路研究补肾活血法调控大鼠卵巢颗粒细胞自噬的分子机制[D]. 白俊.成都中医药大学 2018
[3]补肾活血方通过调控凋亡和自噬抑制慢性肾脏病大鼠血管钙化的作用及机制研究[D]. 石凯峰.中国中医科学院 2017
[4]补肾法改善氧化应激提高重复COS卵母细胞线粒体功能与调控Nrf2信号通路的关系[D]. 范丽洁.河北医科大学 2017
[5]Rictor/mTORC2通路在卵子发生与早发性卵巢功能不全中的作用及其机制研究[D]. 汪丽萍.南方医科大学 2017
[6]二至天癸颗粒对卵泡颗粒细胞Fas通路的影响[D]. 李婷婷.山东中医药大学 2016
[7]基于ATP调控溶酶体探讨自噬通量在卵巢癌顺铂耐药的作用及机制[D]. 马丽伟.吉林大学 2016
[8]基于PI3K/AKT/mTOR信号通路研究补肾活血法修复雷公藤多苷致卵泡发育障碍的分子机制[D]. 陆柳如.成都中医药大学 2016
[9]基于衰老雌鼠模型探讨铁皮石斛“补肾”功效的科学内涵[D]. 梁楚燕.广州中医药大学 2016
[10]基于PI3K/AKT信号通路研究新加归肾丸调节大鼠卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的分子机制[D]. 龙旭.成都中医药大学 2015
硕士论文
[1]白藜芦醇对ox-LDL诱导卵巢颗粒细胞自噬与凋亡的调控作用研究[D]. 李薇薇.郑州大学 2018
[2]白藜芦醇基于自噬流调控的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤研究[D]. 刘梦思.中央民族大学 2018
[3]刘敏如国医大师诊治不孕症学术思想探微[D]. 冯凯.成都中医药大学 2018
[4]左归丸改善顺铂所致的早发性卵巢功能不全的实验研究[D]. 梁嘉丽.暨南大学 2018
[5]一种慢性应激致卵巢早衰大鼠模型的建立及药物干预调控研究[D]. 穆拉迪力·约麦尔.新疆医科大学 2018
[6]基于TGF-β/Smads通路探讨补肾中药对高龄肾阴虚型IVF患者卵细胞质量的影响[D]. 李冉.山东中医药大学 2017
[7]探讨坤泰胶囊对环境化学物质诱导的卵巢储备功能下降大鼠模型颗粒细胞凋亡机制[D]. 耿利华.南京中医药大学 2017
[8]脑心通/PPARγ信号通路抑制心肌细胞肥大与损伤[D]. 袁舒平.江苏大学 2017
[9]促卵泡刺激素通过调控颗粒细胞分泌干细胞因子促进卵泡发育成熟的研究[D]. 郑梦雪.宁夏医科大学 2017
[10]白藜芦醇与镉诱导HEK 293T细胞自噬与凋亡关系的初步研究[D]. 刘小綪.南京师范大学 2016
本文编号：3171526
【文章来源】：成都中医药大学四川省
【文章页数】：167 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
引言
第一部分 理论研究
1.卵泡发育障碍类疾病的研究进展
1.1 西医认识及研究进展
1.2 中医认识及研究进展
2.卵泡发育障碍相关分子机制研究进展
2.1 细胞凋亡、自噬与卵泡发育、闭锁相关性研究
2.2 中医药经PI3K/AKT/mTOR通路调控细胞凋亡与自噬
3.导师对卵巢功能低下与卵泡发育障碍类疾病的认识
3.1 病因病机
3.2 诊治经验
第二部分 实验研究
本课题研究基础及创新性
1.课题基础
2.课题创新点
实验一 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的实验研究
1.技术路线
2.实验材料
2.1 实验动物及实验条件
2.2 主要药物、试剂及仪器
3.实验方法
3.1 实验模型的构建
3.2 实验分组情况及给药方法
3.3 检测指标与方法
4.统计分析
5.实验结果
5.1 XJCRTSZW对大鼠一般情况的影响
5.2 XJCRTSZW对大鼠血清中性激素的影响
5.3 XJCRTSZW对大鼠血清中ET、NO及ET/NO的影响
5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢湿重、卵巢指数及卵巢组织的影响
5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的影响
6.讨论
6.1 补肾养血活血法对于卵泡发育障碍类疾病的干预
6.2 雷公藤甲素造模
6.3 阳性药物的选择
6.4 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的结果分析
7.结论
实验二 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制
1.技术路线
2.实验材料
2.1 实验动物及实验条件
2.2 主要药物、试剂及仪器
3.实验方法
3.1 大鼠含药血清制备
3.2 大鼠原代颗粒细胞的提取与培养
3.3 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞鉴定
3.4 含药血清培养颗粒细胞分组、TP诱导及其他受试药物的添加
3.5 检测指标与方法
4.统计分析
5.实验结果
5.1 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞形态学观察
5.2 大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定
5.3 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞活力的影响
5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响
5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞上清中性激素分泌的影响
5.6 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬流的影响
5.7 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬小体、自噬溶酶体形成的影响
5.8 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及自噬流相关因子蛋白表达水平的影响
5.9 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞中凋亡及自噬流相关因子的mRNA相对表达量的影响
5.10 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的的影响
5.11 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路轴相关分子mRNA相对表达量的影响
6.讨论
6.1 颗粒细胞被选为研究对象的原因
6.2 阳性对照药的选择
6.3 自噬诱导剂与凋亡诱导剂的选择
6.4 自噬流的检测
6.5 补肾中药通过细胞信号转导通路调节卵泡发育
6.6 调控细胞凋亡与自噬是中医药发挥药理作用的重要分子机制
6.7 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制
7.结论
问题与展望
致谢
参考文献
附件
附件一 综述
综述一
参考文献
综述二
参考文献
附件二 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性应激对卵巢早衰大鼠血清中E2、FSH、LH及β- EP水平的影响[J]. 阿卜力孜·克热木,阿孜古丽·要力瓦斯,穆拉迪力·约麦尔,玛依热·吐尔哄,纳菲沙·卡德尔,夏米西努尔·伊力克. 中华中医药学刊. 2019(03)
[2]气与细胞自噬的相关性[J]. 颜培正,张庆祥,王诗源,孟庆岩. 中医杂志. 2019(02)
[3]当归化学成分及药理作用的分析[J]. 曹颜冬. 世界最新医学信息文摘. 2019(02)
[4]基于数据挖掘技术的针灸治疗卵巢早衰选穴规律分析[J]. 张晶,孙英霞,黄海量,张永臣,贾红玲,孙振高,卢岩,王世军. 山东中医药大学学报. 2018(06)
[5]菟丝子总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠模型的影响[J]. 苗明三,彭孟凡,闫晓丽. 中国实验方剂学杂志. 2019(05)
[6]中医药通过mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的研究进展[J]. 郜然然,周慧,吴也可,贺宇,吴克明. 中国实验方剂学杂志. 2019(04)
[7]针灸治疗卵巢早衰脾肾阳虚型临床观察[J]. 李文芳,郭钦源,谢丽凤. 实用中医药杂志. 2018(10)
[8]辅助生殖技术在多囊卵巢综合征患者上的应用综述[J]. 雷兰杰,王琪,杨磊,傅文学. 九江学院学报(自然科学版). 2018(03)
[9]细胞自噬与相关中医辨证体系的研究进展[J]. 胡朋言,王伟,梁雪,李蓓蕾,王思超,王仕衍,纪云西,谢博文. 中华中医药学刊. 2018(09)
[10]补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰模型小鼠卵巢PI3K/AKT通路的影响[J]. 黄晋琰,徐珉,王彦彦,温丹婷,林夏静. 中国中西医结合杂志. 2018(10)
博士论文
[1]基于PI3K/Akt信号通路探讨平喘颗粒干预气道上皮细胞自噬与凋亡的机制[D]. 蒋鹏娜.黑龙江中医药大学 2018
[2]基于PI3K/AKT/mTOR信号通路研究补肾活血法调控大鼠卵巢颗粒细胞自噬的分子机制[D]. 白俊.成都中医药大学 2018
[3]补肾活血方通过调控凋亡和自噬抑制慢性肾脏病大鼠血管钙化的作用及机制研究[D]. 石凯峰.中国中医科学院 2017
[4]补肾法改善氧化应激提高重复COS卵母细胞线粒体功能与调控Nrf2信号通路的关系[D]. 范丽洁.河北医科大学 2017
[5]Rictor/mTORC2通路在卵子发生与早发性卵巢功能不全中的作用及其机制研究[D]. 汪丽萍.南方医科大学 2017
[6]二至天癸颗粒对卵泡颗粒细胞Fas通路的影响[D]. 李婷婷.山东中医药大学 2016
[7]基于ATP调控溶酶体探讨自噬通量在卵巢癌顺铂耐药的作用及机制[D]. 马丽伟.吉林大学 2016
[8]基于PI3K/AKT/mTOR信号通路研究补肾活血法修复雷公藤多苷致卵泡发育障碍的分子机制[D]. 陆柳如.成都中医药大学 2016
[9]基于衰老雌鼠模型探讨铁皮石斛“补肾”功效的科学内涵[D]. 梁楚燕.广州中医药大学 2016
[10]基于PI3K/AKT信号通路研究新加归肾丸调节大鼠卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的分子机制[D]. 龙旭.成都中医药大学 2015
硕士论文
[1]白藜芦醇对ox-LDL诱导卵巢颗粒细胞自噬与凋亡的调控作用研究[D]. 李薇薇.郑州大学 2018
[2]白藜芦醇基于自噬流调控的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤研究[D]. 刘梦思.中央民族大学 2018
[3]刘敏如国医大师诊治不孕症学术思想探微[D]. 冯凯.成都中医药大学 2018
[4]左归丸改善顺铂所致的早发性卵巢功能不全的实验研究[D]. 梁嘉丽.暨南大学 2018
[5]一种慢性应激致卵巢早衰大鼠模型的建立及药物干预调控研究[D]. 穆拉迪力·约麦尔.新疆医科大学 2018
[6]基于TGF-β/Smads通路探讨补肾中药对高龄肾阴虚型IVF患者卵细胞质量的影响[D]. 李冉.山东中医药大学 2017
[7]探讨坤泰胶囊对环境化学物质诱导的卵巢储备功能下降大鼠模型颗粒细胞凋亡机制[D]. 耿利华.南京中医药大学 2017
[8]脑心通/PPARγ信号通路抑制心肌细胞肥大与损伤[D]. 袁舒平.江苏大学 2017
[9]促卵泡刺激素通过调控颗粒细胞分泌干细胞因子促进卵泡发育成熟的研究[D]. 郑梦雪.宁夏医科大学 2017
[10]白藜芦醇与镉诱导HEK 293T细胞自噬与凋亡关系的初步研究[D]. 刘小綪.南京师范大学 2016
本文编号：3171526
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