骨髓间充质干细胞对2,5-己二酮暴露大鼠脊髓髓鞘再生的促进作用及其机制研究

发布时间：2021-05-08 11:05

　　背景:正己烷作为一种有机溶剂和稀释剂,广泛应用于各个行业,为数百万人的职业健康带来了威胁。流行病学调查显示长期接触正己烷会导致周围神经系统（Peripheral Nervous System,PNS）和中枢神经系统（Central Nervous System,CNS）多发性神经病变。正己烷的神经毒性作用由其神经毒性代谢物2,5-己二酮（2,5-hexanedione,HD）介导。本课题组前期研究发现HD暴露引起异常的神经电生理变化,包括神经传导速度的减慢和远端潜伏期的延长。正己烷中毒可表现出持续和进行性脱髓鞘。髓鞘的主要功能是提供离子绝缘,加速电脉冲的传导速度。因此,CNS中髓鞘的丢失导致传导阻滞或传导减慢。持续性脱髓鞘最终会导致轴索损伤和运动损伤,感觉和自主神经功能障碍,甚至高度残疾。因此,在病理学中,成功的髓鞘再生和增强的少突胶质细胞生成是功能恢复过程中的关键治疗目标。髓鞘的再生不是由幸存的OLs介导的,而是由新的OLs生成的。用于髓鞘修复的新OLs是由成体少突胶质细胞前体细胞（Oligodendrocyte precursor cells,OPCs）产生的,其产生需要成体OPC... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 BMSCs对 HD暴露大鼠脊髓髓鞘再生的促进作用
    前言
    材料和方法
        1.实验动物
        2.主要试剂
        3.主要仪器
        4.大鼠BMSCs的分离、培养和鉴定
        5.动物分组
        6.透射电镜观察髓鞘超微结构
        7.脊髓组织HE染色
        8.脊髓髓鞘LFB染色
        9.脊髓髓鞘SC染色
        10.脊髓组织MBP免疫荧光染色
        11.WesternBlot检测脊髓MBP蛋白表达
        12.统计分析
    结果
        1.透射电镜下观察BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓髓鞘超微结构的影响
        2.HE染色观察BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织的影响
        3.LFB染色观察BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓髓鞘的影响
        4.SC染色观察BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓髓鞘的影响
        5.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织MBP免疫荧光表达的影响
        6.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织MBP蛋白表达的影响
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 BMSCs对 HD暴露大鼠脊髓髓鞘OPCs分化及成熟的促进作用及Hes1 的作用
    前言
    材料和方法
        1.实验动物及分组
        2.主要试剂
        3.主要仪器
        4.BMSC-CM制备
        5.OPCs的分离、培养和处理
        6.qRT-PCR检测Hes1mRNA表达
        7.Western Blot法检测蛋白表达
        8.免疫荧光染色
        9.质粒转染
        10.统计分析
    结果
        1.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓NG2和MBP免疫荧光表达的影响
        2.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织MBP蛋白表达的影响
        3.BMSC-CM对 HD染毒OPCs分化及成熟的影响
        4.BMSC-CM对 HD染毒OPCs MBP蛋白表达的影响
        5.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织Hes1mRNA及蛋白表达的影响
        6.BMSCs移植对HD暴露大鼠脊髓组织MBP和 Hes1 荧光表达的影响
        7.BMSC-CM对 HD染毒OPCs Hes1 蛋白表达的影响
        8.转染后OPCs中 Hes1 mRNA及蛋白的表达
        9.过表达Hes1对BMSC-CM促 HD染毒OPCs成熟的影响
        10.免疫荧光法观察过表达Hes1对HD染毒OPCs MBP表达的影响
        11.过表达Hes1对HD染毒OPCs MBP蛋白表达的影响
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 BMSCs通过TNFα/RelB-Hes1 途径促进HD暴露大鼠脊髓髓鞘再生
    前言
    材料和方法
        1.实验动物及分组
        2.主要试剂
        3.主要仪器
        4.BMSC-CM制备
        5.OPCs的分离、培养和处理
        6.qRT-PCR检测m RNA表达
        7.Western Blot法检测蛋白表达
        8.细胞免疫荧光染色
        9.质粒转染
        10.统计分析
    结果
        1.Notch信号通路在BMSCs促进HD暴露大鼠脊髓髓鞘再生过程中的作用
        2.TNFα/RelB-Hes1 途径在BMSCs促进HD暴露大鼠脊髓髓鞘再生过程中的作用
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]CXCR2在多发性硬化症中的作用和机制研究进展[J]. 王璐,杨瀚宇,臧彩霞,鲍秀琦,张丹.  中国新药杂志. 2018(22)
[2]骨髓间充质干细胞移植对急性脊髓损伤脱髓鞘病变的保护作用[J]. 苟杨,刘丹彦,刘金凤,孙鸿然.  生物工程学报. 2018(05)
[3]肿瘤坏死因子α拮抗剂联合酪氨酸激酶C基因修饰神经干细胞移植治疗脊髓损伤[J]. 王乐,陈宁宁,李婷婷,赵晓阳,魏富鑫,崔尚斌,万勇,刘少喻.  中国组织工程研究. 2017(21)
[4]氯化锂-毛果芸香碱致大鼠海马髓鞘及少突胶质细胞系变化初步研究[J]. 赵亚楠,樊帆,王京,吴旭青,丁晶,汪昕.  中国临床神经科学. 2017(02)
[5]少突胶质前体细胞治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 王凤昌,栾佐,杨印祥,何志旭,朱中康.  现代生物医学进展. 2015(10)
[6]Notch信号通路在神经精神领域的研究进展[J]. 雷蕾,孙宁,杜巧荣,刘志芬,杨春霞,张克让.  中华临床医师杂志(电子版). 2015(05)
[7]CPZ诱导精神分裂症样模型小鼠海马脱髓鞘改变与行为学变化及其相关性的研究[J]. 王芸,李永德,彭超,程国华,陈林,卢伟,孔吉明,肖岚,唐勇.  重庆医科大学学报. 2014(02)
[8]四例化学物中毒性周围神经病患者病理特点及神经电生理分析[J]. 张静波,张巧耘,王勇,孙道远.  中华劳动卫生职业病杂志. 2012 (02)
[9]Notch:神经分化与再生的关键基因[J]. 程凯.  中国医疗前沿. 2011(06)
[10]二黄胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎模型大鼠急性期炎性反应和髓鞘修复的影响[J]. 李康宁,樊永平,陈克龙,周建平,邵燕,刘洪艳,杨文静.  首都医科大学学报. 2011(01)

硕士论文
[1]正己烷慢性外周神经毒性的生物标志研究[D]. 赵乾魁.复旦大学 2011



本文编号：3175228