TIGAR在正常和运动状态下对骨骼肌线粒体生成和功能的调控机制研究

发布时间：2021-05-10 05:10

　　目的:TIGAR作为糖酵解的抑制蛋白,在调节细胞代谢和氧化应激中发挥重要作用,而骨骼肌中TIGAR蛋白高表达。因此,本研究探索骨骼肌中的TIGAR对骨骼肌的功能的影响及可能的机制。方法:我们分离不同部位的骨骼肌检测TIGAR的表达。在骨骼肌相关的生理和病理状态下检测骨骼肌中的TIGAR是否变化。采用负重5%的小鼠力竭游泳模型在TIGAR敲除的小鼠中检测小鼠运动耐力。检测力竭游泳后NADPH、乳酸、糖原和ATP含量的改变。采用代谢笼观察小鼠代谢方式改变。根据HE染色、RT-qPCR实验、Western20blot实验、免疫组化和免疫荧光观察TIGAR对小鼠肌纤维类别的改变。采用电镜、RT-qPCR实验和Western20blot实验检测TIGAR敲除小鼠中线粒体形态数目和功能的改变。采用免疫荧光和CO-IP实验检测SIRT1/PGC1α的功能和活性。在力竭游泳小鼠中免疫荧光观察TIGAR与线粒体的共定位情况。用Western20blot和免疫电镜观察TIGAR向线粒体转位。构建线粒体定位TIGAR。用lipo202000转染TIGAR和线粒体定位TIGAR,观察两者对线粒体生成的影响。采... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：78 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 试剂配制
    2.3 实验动物
    2.4 实验方法
    2.5 统计分析
第三章 实验结果与结论
    3.1 TIGAR在骨骼肌中表达最高
    3.2 GEO分析TIGAR在肌肉生理和病理状态下的变化
    3.3 TIGAR在肌肉不同病理状态下的表达变化
    3.4 TIGAR增加小鼠力竭游泳能力
    3.5 力竭游泳后TIGAR KO小鼠代谢物质的检测
    3.6 TIGAR KO小鼠线粒体功能降低
    3.7 TIGAR促进小鼠type IIA型肌纤维的改变
    3.8 TIGAR增加了线粒体数目
    3.9 TIGAR KO小鼠中SIRT1-PGC1α活性降低
    3.10 TIGAR存在线粒体中
    3.11 力竭游泳能够促进TIGAR与线粒体定位
    3.12 胞浆TIGAR促进SIRTI-PGC1α
    3.13 线粒体TIGAR改善线粒体功能
    结论和下一步研究计划
第四章 讨论
参考文献
综述
    参考文献
英文缩写词表
攻读学位期间发表及在投的论文
攻读学位期间参与的学术会议和研究项目
致谢



本文编号：3178742