卵巢子宫内膜异位症的尿液蛋白质组学研究

发布时间：2021-05-17 19:56

　　一.研究背景及目的子宫内膜异位症（简称内异症）是妇科常见疾病,大约影响10-15%的生育年龄女性,造成一系列盆腔症状,比如月经紊乱、慢性盆腔痛、性交痛及不孕等。子宫内膜异位症是损害年轻女性生育功能和社会功能的主要原因之一,早期诊断可以提高治疗效果,尽早恢复内异症病人的正常生活。目前诊断的金标准是腹腔镜手术。由于缺少有效的早期诊断手段,内异症常被漏诊,或者诊断延迟。因此急切需要兼具高特异性和敏感性的无创性子宫内膜异位症诊断标志物。尽管有大量关于内异症生物标志物的研究,但没有一个单独标志物或一组标志物有足够的特异性和敏感性可以用于内异症无创性诊断实验。对于内异症标志物的研究主要集中于子宫内膜和血清,只有11%的子宫内膜异位症标志物的研究与尿液有关。蛋白质组学定量技术是疾病标志物筛选的常用技术之一,能够对临床样品中差异变化蛋白质进行高通量筛选和后期验证。串联质量标签（TMT）和平行反应监测（PRM）分别是非靶向和靶向定量蛋白质组学的代表技术。本课题采用TMT-PRM技术筛查策略,对卵巢内异症症的尿液标本进行全面的蛋白质组学分析,通过与正常人、卵巢良性肿瘤、卵巢恶性肿瘤对比,来寻找兼具高特异性... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 基于TMT技术对卵巢子宫内膜异位症尿液标本差异蛋白的筛查
    材料与方法
        一、实验材料
            1. 标本来源
            2. 尿液样本采集和储存
            3. 实验仪器与设备
            4. 主要实验试剂与耗材
        二、实验方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜辅助溶液内蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法测定多肽浓度
            5. TMT定量标记和离线高pH反相高效液相色谱分离
            6. LC-MS/MS分析
            7. 数据分析和生物信息学分析
    实验结果
        一、各组蛋白的定性定量分析
        二、筛选差异蛋白
        三、生物信息学分析
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 基于PRM技术对卵巢子宫内膜异位症尿液标本差异蛋白的验证
    材料与方法
        一、实验材料
            1. 标本来源及样本收集、储存
            2. 实验仪器与设备
            3. 主要实验试剂与耗材
        二、实验方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜辅助溶液内蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法测定多肽浓度
            5. PRM多肽筛选
            6. PRM验证
            7. PRM数据分析
            8. 统计分析
    实验结果
        一、PRM验证结果
        二、ROC曲线结果
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 子宫内膜异位症尿蛋白标志物研究进展(综述)
    1. 可溶性血管内皮生长因子受体-1
    2. 细胞角蛋白19
    3. 尿多肽表达谱
    4. 基质金属蛋白酶
    5. 维生素D结合蛋白
    6. α-烯醇化酶
    7. 血管生成因子
    参考文献
附表
致谢
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【参考文献】：
期刊论文
[1]基于质谱的定量蛋白质组学技术发展现状[J]. 牟永莹,顾培明,马博,闫文秀,王道平,潘映红.  生物技术通报. 2017(09)
[2]定量蛋白质组学分析方法[J]. 钱小红.  色谱. 2013(08)
[3]基于稳定同位素标记的蛋白质组学定量方法研究进展[J]. 周愿,单亦初,张丽华,张玉奎.  色谱. 2013(06)
[4]子宫内膜异位症的研究与设想[J]. 郎景和.  中华妇产科杂志. 2003(08)



本文编号：3192354