多能性干细胞和肿瘤的代谢调控研究
发布时间：2021-05-26 13:21
多能性干细胞拥有自我更新同时可以分化为任何类别细胞的能力,因此有着无限的应用前景。近些年来的研究表明,代谢重编程对于多能性干细胞至关重要,多能干细胞拥有一套独特的代谢系统,并且这种独特的代谢体系往往与其状态密切相关,然而有关多能性干细胞中独特的代谢系统目前研究很少,关于这些独特的代谢系统在多能干细胞中是如何被调控的以及发挥的作用是什么也鲜有报道。在本课题中,我们发现多能性干细胞通过表达GLDC进而活化甘氨酸剪切系统,活化的甘氨酸剪切系统一方面帮助多能性干细胞维持一碳单位储备,一方面避免丙酮醛的积累,同时,活化的甘氨酸剪切系统也是体细胞重编程的必要条件。代谢的改变已经成为肿瘤的重要标志之一,例如肿瘤细胞倾向于利用有氧糖酵解而不是相对更加高效的氧化磷酸化的方式产能,虽然对于这方面的研究已经有了许多,但是代谢重编程和肿瘤的关系仍然不是十分清楚。在我们的工作中,我们鉴定出CUEDC2对于肿瘤细胞Warburg效应的促进至关重要。机制上,我们发现CUEDC2通过GLUT3和LDHA来调控肿瘤的Warburg效应。同时我们也在肝癌病人临床样本中发现了CUEDC2与GLUT3和LDHA存在着异常的共...
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：100 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 胚胎干细胞与诱导多能性干细胞
1.2.1 胚胎干细胞研究状况
1.2.2 体细胞重编程
1.2.3 体细胞重编程的研究进展
1.2.4 诱导多能性干细胞的调控研究
1.3 多能性干细胞与代谢
1.3.1 胚胎干细胞的代谢系统及调控
1.3.2 体细胞重编程与代谢
1.3.3 体细胞重编程的代谢调控
1.4 甘氨酸剪切系统的功能及研究
1.4.1 甘氨酸剪切系统
1.4.2 甘氨酸剪切系统的研究进展
1.4.3 甘氨酸剪切系统的研究展望
1.5 肿瘤细胞与代谢异常
1.5.1 脂代谢与肿瘤
1.5.2 氨基酸代谢与肿瘤
1.5.3 糖代谢与肿瘤
1.6 CUEDC2与肿瘤
1.6.1 CUEDC2
1.6.2 CUEDC2与肿瘤
1.6.3 CUEDC2与肿瘤代谢的研究展望
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 所用细胞,动物及来源
2.1.2 实验材料与试剂
2.1.3 实验所用引物
2.1.4 实验所用抗体
2.1.5 实验所用仪器
2.1.6 实验所用培养基及缓冲液
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠原代成纤维细胞MEF的制备
2.2.2 滋养层细胞(feeder)制作
2.2.3 小鼠胚胎干细胞/iPS细胞培养
2.2.4 人胚胎干细胞/iPS细胞培养
2.2.5 小鼠体细胞重编程
2.2.6 诱导多能性干细胞的鉴定
2.2.7 Western blot
2.2.8 实时荧光定量PCR实验
2.2.9 分子克隆
2.2.10 细胞系的转染以及建立稳转细胞系
2.2.11 染色质免疫共沉淀实验(ChIP)
2.2.12 荧光素酶双报告基因实验
2.2.13 GC-MS检测相关代谢产物
2.2.14 LC-MS检测相关代谢产物
2.2.15 C14闪烁计数检测甘氨酸剪切系统的活性
2.2.16 RNA免疫沉淀实验
2.2.17 衰老相β-半乳糖苷酶染色
2.2.18 丙酮醛含量检测
第三章 GLDC激活甘氨酸剪切系统促进干细胞生存
3.1 多能性干细胞与体细胞存在着巨大的代谢差异
3.2 Sox2和Lin28A协作促进GLDC表达的激活
3.3 甘氨酸剪切系统促进—碳单位的生成同时防止丙酮醛的积累
3.4 总结与讨论
第四章 CUEDC2促进肿瘤的Warburg效应
4.1 CUEDC2在肝癌细胞中促进肿瘤的Warburg效应
4.2 CUEDC2通过GLUT3以及LDHA促进肝癌的Warburg效应
4.3 CUEDC2通过糖皮质激素受体GR调控GLUT3的表达
4.4 CUEDC2通过14-3-3ζ调控LDHA的泛素化降解
4.5 CUEDC2通过GLUT3和LDHA调控肝癌的进程
4.6 GLUT3和LDHA在肝癌临床样本中与CUEDC2存在着共表达
4.7 总结和讨论
参考文献
附录
致谢
在读期间发表的论文与取得的其他成果
本文编号：3206443
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：100 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 胚胎干细胞与诱导多能性干细胞
1.2.1 胚胎干细胞研究状况
1.2.2 体细胞重编程
1.2.3 体细胞重编程的研究进展
1.2.4 诱导多能性干细胞的调控研究
1.3 多能性干细胞与代谢
1.3.1 胚胎干细胞的代谢系统及调控
1.3.2 体细胞重编程与代谢
1.3.3 体细胞重编程的代谢调控
1.4 甘氨酸剪切系统的功能及研究
1.4.1 甘氨酸剪切系统
1.4.2 甘氨酸剪切系统的研究进展
1.4.3 甘氨酸剪切系统的研究展望
1.5 肿瘤细胞与代谢异常
1.5.1 脂代谢与肿瘤
1.5.2 氨基酸代谢与肿瘤
1.5.3 糖代谢与肿瘤
1.6 CUEDC2与肿瘤
1.6.1 CUEDC2
1.6.2 CUEDC2与肿瘤
1.6.3 CUEDC2与肿瘤代谢的研究展望
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 所用细胞,动物及来源
2.1.2 实验材料与试剂
2.1.3 实验所用引物
2.1.4 实验所用抗体
2.1.5 实验所用仪器
2.1.6 实验所用培养基及缓冲液
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠原代成纤维细胞MEF的制备
2.2.2 滋养层细胞(feeder)制作
2.2.3 小鼠胚胎干细胞/iPS细胞培养
2.2.4 人胚胎干细胞/iPS细胞培养
2.2.5 小鼠体细胞重编程
2.2.6 诱导多能性干细胞的鉴定
2.2.7 Western blot
2.2.8 实时荧光定量PCR实验
2.2.9 分子克隆
2.2.10 细胞系的转染以及建立稳转细胞系
2.2.11 染色质免疫共沉淀实验(ChIP)
2.2.12 荧光素酶双报告基因实验
2.2.13 GC-MS检测相关代谢产物
2.2.14 LC-MS检测相关代谢产物
2.2.15 C14闪烁计数检测甘氨酸剪切系统的活性
2.2.16 RNA免疫沉淀实验
2.2.17 衰老相β-半乳糖苷酶染色
2.2.18 丙酮醛含量检测
第三章 GLDC激活甘氨酸剪切系统促进干细胞生存
3.1 多能性干细胞与体细胞存在着巨大的代谢差异
3.2 Sox2和Lin28A协作促进GLDC表达的激活
3.3 甘氨酸剪切系统促进—碳单位的生成同时防止丙酮醛的积累
3.4 总结与讨论
第四章 CUEDC2促进肿瘤的Warburg效应
4.1 CUEDC2在肝癌细胞中促进肿瘤的Warburg效应
4.2 CUEDC2通过GLUT3以及LDHA促进肝癌的Warburg效应
4.3 CUEDC2通过糖皮质激素受体GR调控GLUT3的表达
4.4 CUEDC2通过14-3-3ζ调控LDHA的泛素化降解
4.5 CUEDC2通过GLUT3和LDHA调控肝癌的进程
4.6 GLUT3和LDHA在肝癌临床样本中与CUEDC2存在着共表达
4.7 总结和讨论
参考文献
附录
致谢
在读期间发表的论文与取得的其他成果
本文编号：3206443
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3206443.html
