星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx30/Cx43与谷氨酸转运蛋白EAAT1在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

发布时间：2021-06-11 16:54

　　[背景和目的]脑缺血再灌注损伤（Ischemia-reperfusion injury,I/R）是脑组织经缺血后,血供恢复,过量的自由基导致的组织内的细胞损伤。减轻脑I/R损伤,对改善脑缺血性疾病患者预后非常重要。脑I/R损伤的确切机制有待进一步深入研究。星形胶质细胞是脑和脊髓中特有的星形神经胶质细胞。星形胶质细胞的功能包括:对形成血脑屏障的内皮细胞的生物支持,向神经组织提供营养,维持细胞外离子平衡,以及对脑损伤后脑和脊髓的修复和瘢痕形成的作用。星形胶质细胞通过缝隙连接相连,形成电耦合胞体与其邻近细胞通过间隙连接对远离原始星形胶质细胞的其他星形胶质细胞的活动产生影响。构成脑缝隙连接的连接蛋白（Connexins,Cxs）能够调控脑内离子和小分子的细胞间扩散。Cx43、Cx30在脑星形胶质细胞中表达量最高,在调节神经系统损伤程度中起到重要作用。大脑主要的兴奋性递质谷氨酸可通过缝隙连接扩散,而高浓度的谷氨酸能够诱导神经元损伤和死亡。缺血/再灌注损伤及其诱导的炎症反应能够激活星形胶质细胞半通道,促进细胞释放钙离子、谷氨酸、炎症因子到细胞外。谷氨酸转运蛋白与谷氨酸相关受体调控谷氨酸的细胞外浓度... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：85 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图３大鼠星形胶质细胞经过不同时间的氧糖剥夺再灌注后ＣＣＫ８的细胞活力测定

第一部分?星形胶质细胞缝隙连接蛋白Ｃｘ３０／Ｃｘ４３与谷氨酸转运蛋白ＥＡＡＴ１在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研宄??ＯＧＤ／Ｒ培养液上清处理的神经元结果类似，氧糖剥夺８ｈ再灌注１２ｈ的细胞状态较??仅氧糖剥夺８ｈ的变化更为显著??Ａ?ＤＡＰＩ?Ｍａｐ２?Ｍｅｒｇｅ??ＯＧＤ??Ｂ?ＤＡＰＩ?ＧＦＡＰ?Ｍａｐ２?Ｍｅｒｇｅ??丨ｕｂＳＳＨＭ＾Ｓ??，■■■國??■■＿＿??图４大鼠星形胶质细胞经氧糖剥夺再灌注对神经元的影响。Ａ）星形胶质细胞培养液上??清加至神经元，荧光显微镜观察荧光标记的神经元Ｍａｐ２蛋白表达定位；Ｂ）大鼠星形胶质细??胞与神经元共培养经氧糖剥夺再灌注（ＯＧＤ／Ｒ），荧光显微镜观察荧光标记的神经元ＭａＰ２及??ＧＦＡＰ蛋白表达定位。??１８??

第一部分?星形胶质细胞缝隙连接蛋白Ｃｘ３０／Ｃｘ４３与谷氨酸转运蛋白ＥＡＡＴ１在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研究??６．＼￥６５（６１＊１１１）丨〇１检测大鼠星形胶质细胞０００／只后￡＼３０，￡＼４３，￡入入丁１蛋白表??达结果??新生大鼠星形胶质细胞（？３），〇〇〇８１１／１１１２１１后以￡５１６１１＾１〇１检测〇＼３０，＆４３，￡八八丁１??蛋白表达水平，结果见图６。与正常条件下培养的细胞相比，氧糖剥夺（ＯＧＤ）?８ｈ的??细胞以及再灌注１２ｈ的细胞内Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１蛋白表达水平显著升高（ＰＵＪ），??Ｃｘ３０表达显著降低；氧糖剥夺再灌注（〇ＧＤ８ｈ／Ｒｉ２ｈ）组细胞Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１蛋白表??达水平与氧糖剥夺组（〇ＧＤ８ｈ）相比差异显著升高（户＜０．０５）。结果提示，氧糖剥夺??再灌注对星形胶质细胞Ｃｘ４３和ＥＡＡＴ１基因蛋白表达的影响作用高于仅氧糖剥夺处??理的细胞。??Ａ?Ｂ??ＥＡＡＴｌＩ?＞?＊＊ｍｍ＿＞?嫺＿—？?６０ＫＤ?Ｉ?１＇５＇??議—４３ｋｄ?！ｌ１－０＂?＿?丨；丨?二??－—＾?二細?ｉｆｉ?ｉ?§??ＧＡＰＤＨ｜?—?—?——?３６ＫＤ?｜?ｊ?攀攀圍??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ??Ｃ?Ｄ??＃??§?２５１?二?ｇ?２．０－１?＊＊??Ｐｊｌ?ａｌｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤｇｈ?ＯＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ８ｈ?〇ＧＤ８ｈ／Ｒ１２ｈ??图６?Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ检测星形胶质细胞经ＯＧＤ／Ｒ处理后细胞内Ｃｘ３０，?Ｃｘ４３和ＥＴＴＡｌ的蛋??白表达。Ｂ）?Ｃｘ３０蛋白表达


本文编号：3224921