AKT对滤泡辅助性T细胞的调控研究

发布时间：2021-06-13 13:03

　　滤泡辅助性T细胞（T Follicular helper cells,Tfh）是效应T细胞（effector T cells）的一种,由初始T细胞（na?ve T cells）被抗原递呈细胞激活后分化而来。不同于效应T细胞产生不同的白介素发挥效应作用,Tfh主用通过进入滤泡后与抗原特异性的B细胞相互作用,发挥着促进生发中心（germinal center）的形成,浆细胞与抗体的产生,以及记忆B细胞形成的作用。Tfh的发育是多阶段多层次的,由多条信号通路所调控,包括TCR信号,ICOS信号等。AKT又称为蛋白激酶B（PKB）,是一种丝氨酸苏氨酸激酶。同时,AKT具有三种亚型,AKT1,AKT2以及AKT3,它们具有高度相似的蛋白结构,都具有激酶活性,但是在不同的细胞中其表达量有所不同,而不同AKT亚型发挥的功能也有所不同。作为重要的信号转导分子,AKT信号通路处于一个细胞信号通路调控的枢纽地位,例如AKT信号通路参与调控细胞存活,细胞周期与增殖,细胞迁移,肿瘤发生等。研究也已发现,FOXO1,mTORC等AKT的下游调节分子对Tfh的发育分化起着的重要调控作用。因此,我们在此推测AKT是... 

【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院上海巴斯德研究所)上海市

【文章页数】：107 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

AKT信号通路中的底物与功能(ManningandToker,2017)

第三章Tfh发育需要AKT磷酸化27第三章Tfh发育需要AKT磷酸化3.1AKT亚型在Tfh中的表达为解答Akt亚型在Tfh中的表达情况，我们决定在小鼠模型中诱导分化Tfh细胞，检测Akt亚型mRNA表达情况。InfluenzaA/PuertoRico/8/34H1N1(PR8)病毒是小鼠适应株，被应用于多种免疫反应的研究。在PR8感染下小鼠会产生效应CD4+T细胞和杀伤性CD8+T细胞，以及产生抗原特异性抗体来清除病毒，在Tfh分化发育的研究中被多次使用(Yooetal.,2012,Leonetal.,2014,Heetal.,2018)。因此，我们首先使用流感病毒PR8，以滴鼻的方式给小鼠攻毒，以此激活免疫系统，诱导不同阶段的Tfh细胞产生。在小鼠感染后第10～11天(Tfh分化扩增的顶峰)，我们收取小鼠脾脏和肺门引流淋巴结(lungdraininglymphnode)细胞，通过富集CD4+T细胞，并使用抗体染色CD4、CD44、CD62L表面分子来区分naiveCD4+T细胞(CD4+CD44loCD62Lhi)和activatedCD4+T(CD4+CD44hiCD62LloT细胞，从activatedCD4+T细胞中分选小鼠non-Tfh(PD-1loCXCR5lo，pre-Tfh(PD-1miCXCR5mi)和Tfh(PD-1hiCXCR5hi)细胞(图3.1)。图3.1小鼠流感模型中Tfh的圈门策略小鼠淋巴细胞经过富集后，通过FSC与SSC去除粘连细胞；在CD4+T细胞中圈出CD44hiCD62Llo激活的T细胞；从中圈取CXCR5loPD-1lonon-Tfh细胞,CXCR5miPD-1mipre-Tfh细胞,和CXCR5hiPD-1hiTfh细胞。

Tfh和non-Tfh中Akt亚型mRNA的表达


本文编号：3227565