熊脱氧胆酸在急性呼吸窘迫综合征中的作用及机制研究

发布时间：2021-07-05 09:24

　　目的:利用肾周脂肪和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）分别建立大鼠急性呼吸综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）/急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的模型,检测不同处理组的标志性蛋白及炎性指标的变化;探讨熊脱氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）对两种ARDS大鼠模型的影响及其发挥作用的主要机制。方法:取SPF清洁级健康成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,体重约220³00g,随机进行编号分组。（1）从同种异体SD大鼠提取肾周脂肪,通过尾静脉注射脂肪溶液建立大鼠脂肪栓塞综合征（fat embolism syndrome,FES）模型,探讨脂肪栓塞所致ARDS的各项相关指标的变化,如肺病理组织检查、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、肺湿干（wet/dry,W/D）比、肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）炎性因子水平、动脉血氧分压等;（2）通过尾静脉给予UDCA处理,检测不同... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

大鼠肺组织油红O染色（×100）

上海交通大学博士学位论文21肺组织HE染色表明，Control组肺泡结构正常，光镜下未观察到肺泡腔内红细胞及多形核白细胞浸润、肺泡间隔增厚。FES组可见不同程度的间质水肿、中性粒细胞浸润、出血、肺泡紊乱、肺泡间隔增厚。UDCA预处理后，肺损伤程度明显改善。20mg/kgUDCA比10mg/kgUDCA更能明显缓解FES引起的肺损伤，而20mg/kgUDCA与40mg/kgUDCA无统计学差异。UDCA单独处理与Control组无明显差异（图2A）。肺损伤评分与病理组织学改变结果相一致（图2B）。BALF细胞学结果表明，与Control组相比，FES组BALF中性粒细胞数量明显增加，UDCA预处理能明显降低FES引起的中性粒细胞计数增加（图2C）。MPOmRNA结果提示，与Control组相比，FES组MPO活性明显增高，UDCA预处理降低了FES引起的MPO活性增高（图2D）。此外，ELISA分析BALF内炎性因子水平发现，与Control组相比，FES组炎性因子TNF-α和IL-1β明显升高，而UDCA预处理能够明显降低FES引起的炎性因子水平升高（图2E-F）。UDCA组与Control组相比无统计学差异。图2UDCA在FES引起的肺损伤中的作用。UDCA注射1小时后进行肾周脂肪处理，UDCA及肾周脂肪溶液均通过尾静脉注射，Control组给予等量的生理盐水处理。(A)大鼠肺组织的HE染色结果；(B)各组急性肺损伤评分；(C)BALF中性粒细胞计数；(D)MPOmRNA水平；(E)BALF中TNF-α浓度；(F)BALF中IL-1β浓度。

S相关的生理功能障碍和肺泡毛细血管屏障破坏的影响与此同时，我们还检测了常见的炎症指标。与Control组相比，FES组PaO2及PaO2/FiO2明显降低，UDCA预处理明显改善了FES引起的PaO2及PaO2/FiO2的降低（图3A-B）；另外，BALF总蛋白浓度结果表明，与Control组相比，FES组BALF蛋白浓度明显升高，UDCA预处理明显降低了FES导致的BALF蛋白浓度升高（图3C）；肺组织湿干比结果显示，与Control组相比，FES组湿干比明显增加，UDCA处理后抑制了FES引起的湿干比增加（图3D）。相比之下，UDCA单独处理对健康大鼠上述炎症变化影响不大。图3UDCA明显改善了ALI/ARDS相关的生理功能障碍和肺泡毛细血管屏障破坏。（A）动脉血氧分析结果；（B）PaO2/FiO2比率；（C）BALF蛋白浓度；（D）肺组织湿干比。Figure3UDCAsignificantlyimprovedALI/ARDSassociatedphysiologicaldysfunctionandthedestructionofalveolarcapillarybarrier.(A)Resultsforarterialpressureofoxygenanalysis;(B)PaO2/FiO2ratios;(C)ProteinconcentrationofBALF;(D)LungW/Dratios.Dataaremean±SEM,n=8.*p<0.05.


本文编号：3265810