IL-17及其受体通路在氟致小鼠肝脏损伤中的机制研究

发布时间：2021-07-06 00:26

　　肝脏作为机体重要的消化和解毒器官,之前的研究已经报道过量的氟暴露会引起肝脏细胞的自噬和凋亡,最终造成肝脏结构和功能的损伤。最近有研究报道IL-17在自噬和凋亡过程中发挥重要的作用。然而,IL-17在氟诱导肝损伤中的作用机制尚不清楚。因此,本论文建立了氟中毒小鼠模型,细胞模型,IL-17基因敲除小鼠模型,运用流式细胞术、组织染色、电镜、ELISA、qRT-PCR、western blotting、荧光染色、相关试剂盒检测各个模型中肝脏IL-17及其信号通路、凋亡、自噬情况,探索IL-17及其信号通路在氟致小鼠肝脏细胞自噬和凋亡中的作用机制。（1）氟中毒模型试验结果:试验通过0、25、50、100mg/LNaF处理150天,氟中毒模型的建立后发现氟暴露后PAS染色阳性区域减小,HE和TEM结果显示肝脏形态学和超微结构发生改变,ALT和AST含量在血清中增加,结果表明氟暴露诱导了肝脏结构和功能的损伤。进一步运用qRT-PCR、免疫组织化学和免疫印迹结果表明,氟暴露导致肝脏IL-17信号通路相关基因和蛋白表达含量改变,凋亡相关基因蛋白Caspase12、p53、Apaf-1、Caspase3和... 

【文章来源】：山西农业大学山西省

【文章页数】：154 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１?ＩＬ－１７信号转导通路??

２．?３?ＮａＦ对血清中ＡＬＴ和ＡＳＴ水平的影响??血清ＡＬＴ和ＡＳＴ水平用于反映肝损伤情况。如图２．２所示，小鼠暴露于５０和１００??１＾几的犯？１５０天后，血清中八１＾和八８丁水平显著高于对照组４＜０．０５，卩＜０．０１），??但在２５?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ组中无显著变化。??８０ｎ?８０－??｜?．?？?．．??Ｉ?６〇－?４－?ｔ?Ｉ?６〇－?丁??ＪｌｌＬｉｋｌＬ??／?＾?＾?＾?＾?＾?＾??ｃ＇／?／?／?Ｃ〇?／＇?／??图２．?２?ＮａＦ暴露１５０天后对雄性小鼠血清中ＡＬＴ和ＡＳＴ水平的影响（ｎ＝６，＊ｐ＜０．?０５，＊＊ｐ＜０．?０１，与??对照组相比）??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＮａＦ?ｏｎ?ｓｅｒｕｍ?ＡＬＴ?ａｎｄ?ＡＳＴ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｅｘｐｏｓｕｒｅ?ＮａＦ?ｆｏｒ?１５０?ｄａｙｓ?ｉｎ?ｍａｌｅ?ｍｉｃｅ?（ｎ??＝６，?＊ｐ＜０．０５，?＊＊ｐ＜０．０１，?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ）??２．?４?ＮａＦ对肝脏细胞凋亡的影响??试验评估了凋亡相关基因ｍＲＮＡ和蛋白质表达水平，以确定ＮａＦ对肝细胞凋亡的??影响（图２．３）。如图２．３?Ａ所示，与对照组相比，在２５、５０和１００?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ组中Ｃａｓｐａｓｅ３、??Ｃａｓｐａｓｅｌ２?和?ｐ５３?ｍＲＮＡ?表达水平显著升高（ｐ＜０＿０５，ｐ＜０．０１），Ｃｙｔ－ｃ?和?Ａｐａｆ－１?ｍＲＮＡ??表达水平在５０和１００ｍｇ／ＬＮａＦ组中显著升高（ｐ＜０．０５，ｐ＜０．０１）。然而，与对照组相??比，２５、５０和１００１１＾／１＾３？组中８（：１－２的１１１

???／?令?＾?＾?＾?＾?＾?＾??ｃ?／?／?／?＂?／?／Ｖ＇??Ｃ??２．０－１?３－．?１．５－??１１?＾?Ｘ?ｉ｜?：■?ｉ?ｉ．?Ｊ?ｌｌ?？?干??ＨＪｌｌｉ：■■?１１?ｉｌｌ－．?ｉ］ｉｌｌｉ???／》＾?＾?／者＾ｊ者＾??Ｗ?ＣＶ＇Ｖ７＇?Ｗ??Ｄ?１２?３?４??ｐ６２?一?＿＿?－?■一?■一＿??Ｂｅｃｌｉｎ?１?＿■？?＿Ｐ?＿■？?嫺＿｜??ＬＣ３－Ｉ?，??ＬＣ３－ＩＩ?一??Ｐ－ａｃｔｉｎ?■ＩＰ??图２．４?ＮａＦ对肝脏细胞自噬相关基因蛋白表达的影响。（Ｄ）中的１、２、３、４分别为Ｃｏｎｔｒｏｌ、２５??ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ、５０?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ、１００?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ?组。（＊ｐ〈０．?０５，＊＊ｐ＜０．?０１，与对照组相比）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＮａＦ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｍＲＮＡ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ａｕｔｏｐｈａｇｙ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｍｉｃｅ??ｌｉｖｅｒ．?（Ｄ）?１，?２，?３，?４?ａｒｅ?Ｃｏｎｔｒｏｌ，?２５?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ，?５０?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ?ａｎｄ?１００?ｍｇ／Ｌ?ＮａＦ?ｇｒｏｕｐｓ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ??（＊ｐ＜０．０５，?＊＊ｐ＜０．０１，?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ）．??ＭＤＣ染色和自噬相关基因的ｍＲＮＡ和蛋白质表达水平检测用于研究ＮａＦ对肝脏??细胞自噬的影响（图２．４）。在图２．４Ａ中，与对照组相比，氟暴露后肝脏ＭＤＣ染色出??４４??

【参考文献】：
期刊论文
[1]氟对大鼠肝脏氧化应激及超微结构的影响[J]. 郭晓英,陈爱莉,孙贵范.  中国医科大学学报. 2005(04)
[2]氟中毒大鼠肝细胞损伤的电镜形态计量学分析[J]. 郑淑芳,郭剑锋,刘振虹,郭连璧,张乃鑫.  中国地方病学杂志. 1998(02)
[3]实验性慢性氟中毒家兔肝、肾动态超微病理学研究[J]. 曲连东,褚桂芳,滕国麟,张伟木,杨贵军.  东北农业大学学报. 1994(04)



本文编号：3267138