血浆外泌体miRNA作为早期肺腺癌诊断标记物研究

发布时间：2021-07-08 20:08

　　研究背景:肺癌是目前世界上发病率高,死亡率高的恶性肿瘤之一。近年在肺癌的治疗,尤其在是靶向治疗和免疫治疗上取得了较大的进展,但仍不能改善肺癌愈后较差的现状。早期诊断是改善恶性肿瘤愈后的有效办法。目前肺癌的早期筛查的手段主要为影像诊断,没有敏感度和特异度均满意的外周血肿瘤标记物。近年,对外泌体和Micro RNA（简称miRNA）的研究有了突破性的进展,诸多研究发现二者几乎参与了肿瘤发生、发展的每一个环节。因此外泌体内的miRNA具有成为新的肿瘤标记物的潜能。研究目的:1.掌握从外周血中分离提取外泌体,以及从外泌体中提取miRNA的实验方法。2.明确早期肺腺癌患者手术前、术后7天以及正常人血浆外泌体中miRNA的表达情况。3.筛选出差异性表达的miRNA,并验证其在早期肺腺癌及正常人中的差异性表达;4.探讨筛选出的miRNA作为早期肺腺癌肿瘤标记物的可能性;5.初步预测筛选出的miRNA的靶基因以及可能参与的信号通路。研究方法:1.采用超速低温离心的方法从血浆中分离提取外泌体,再使用miRNA提取试剂盒的从外泌体中提取miRNA。2.应用二代测序技术（Illumina Genome An... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：64 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１透视电镜下组样本中提取的外泌体情况

图４术前及术后样本ｍｉＲＮＡ差异性表达热图（实验组两两比较，差异性不显著）??

图５所有样本ｍｉＲＮＡ差异性表达热图（实验组合对照组的表达差异显著）??６．３实验组（术前、术后）、对照组交叉对比分析结果。??肺腺癌术前样本与正常人对比后，上调的ｍｉＲＮＡ共有５０２个，其的ｍｉＲＮＡ?Ｂａｓｅ?Ｍｅａｎ读数大于１０００，且较正常人Ｂａｓｅ?Ｍｅａｎ读数上升５的?ｍｉＲＮＡ?共有?３８?个（表?６）。其中，ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－２６ａ－５ｐ、ｍｉＲ四个ｍｉＲＮＡ的ｂａｓｅ?ｍｅａｎ在肺癌中的读数超过１０万，说明其丰度非常明显，可作为备选。另夕卜，ｍｉＲ－９６－５ｐ、ｍｉＲ－１５１ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６－５ｐ在肺升倍数超过１００倍，并且其ｂａｓｅ?ｍｅａｎ在肺癌中的读数也很高，可作为备选（表６、图６）??


本文编号：3272248