基于FAPα和survivin的DNA疫苗抗肿瘤活性及机制研究

发布时间：2021-08-26 12:36

　　癌症已经成为威胁全人类生命的主要公共健康问题。尽管随着癌症诊断和治疗技术的进步,全球整体癌症死亡率呈小幅下降趋势,但由于发病率的逐年提高,每年因癌症致死的人数却一直居高不下,并呈现上升趋势。以免疫检查点阻断剂（ICBs）（如PD-1/PD-L1抗体）为代表的肿瘤免疫疗法的出现,为癌症治疗带来了新的希望。研究发现,肿瘤内有大量抗肿瘤T细胞浸润的病人（“热”肿瘤）通常对免疫疗法有较好的响应,而瘤内无T细胞浸润的病人（“冷”肿瘤）通常对免疫疗法无响应;并且瘤内T细胞的浸润情况与癌症病人的预后呈正相关。这提示我们,抗肿瘤T细胞的存在对癌症治疗是至关重要的。在众多免疫疗法中,肿瘤疫苗因其具有强大的肿瘤抗原特异性CD8⁺T细胞诱导能力,而受到越来越多的关注。然而,由于免疫抑制性肿瘤微环境（TME）的存在,阻止了疫苗诱导的效应CD8⁺T细胞的瘤内浸润和发挥抗肿瘤作用。因此,破坏TME促进CD8⁺T细胞浸润是提高肿瘤疫苗、ICBs等免疫治疗有效性的必要手段。肿瘤中除了癌细胞外,还包含免疫细胞、周皮细胞、上皮细胞、脂肪细胞、癌症相关成纤维... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

-3正在进行的癌症DNA疫苗的临床试验分析(A)涉及癌症DNA疫苗的临床试验中癌症类型分布情况。(B)DNA疫苗中编码的不同抗原类型占比。(C)将癌症DNA疫苗与其他疗法(如其他免疫疗法、化疗、放疗或佐剂)相结合的研究或仅使用DNA疫苗作为单一疗法的研究。

从图3.3-6A可以看出,4T1荷瘤小鼠的脾脏与na?ve小鼠相比明显增大。为了弄清楚小鼠脾脏的增大是否是由于MDSCs的积累导致的,我们将治疗实验中的小鼠脾脏处理成单细胞悬液,并用MDSCs特异性荧光抗体(CD11b和Gr-1)染色,通过流式细胞仪分析CD11b+Gr-1+MDSCs在脾细胞中的比例。结果显示,免疫Vec的荷瘤小鼠脾细胞中CD11b+Gr-1+MDSCs比例超过了50%;即使在接种了疫苗的荷瘤小鼠的脾细胞中,这一比例也达到了40%(图3.3-6B)。而免疫原性小鼠脾细胞中CD11b+Gr-1+MDSCs的比例大约只有3%(图3.3-6C)。这些结果提示荷瘤小鼠脾细胞中大量的MDSCs是由肿瘤而非疫苗诱导的产生的。并且与其他研究一致,荷瘤小鼠脾脏内的MDSCs多数为PMN-MDSCs(CD11b+Ly-6G+Ly-6Clow),而非M-MDSCs(CD11b+Ly-6G-ly-6Chi)[127,128]。3.3.4.2 MDSCs对抗肿瘤免疫的抑制

研究表明MDSCs可以抑制T细胞分泌IL-2,进而抑制T细胞的增殖和激活[36,37]。为了探究4T1小鼠脾脏中的MDSCs是否也会抑制免疫过OsFS疫苗小鼠的脾细胞分泌IL-2,我们首先使用磁珠分选的方式纯化了4T1荷瘤小鼠脾脏中的M-MDSCs和PMN-MDSCs,并将其与从免疫过OsFS疫苗的非荷瘤小鼠的脾脏中分离的脾细胞进行共培养,并通过ELISA方法检测培养上清中IL-2的浓度,以此来评价MDSCs的抑制活性。从图3.3-7可以看出,无论是M-MDSCs还是PMN-MDSCs都显著抑制了免疫原性小鼠脾细胞分泌survivin和FAPα特异性的IL-2。也就是说在4T1乳腺癌模型上,肿瘤诱导产生的MDSCs抑制了OsFS激起的survivin和FAPα特异性免疫反应。3.3.5 小结


本文编号：3364252