基于肾主骨生髓理论研究淫羊藿苷调控外泌体内miR-122-5p对BMSCs成骨、迁移的作用及机制
发布时间：2021-09-07 17:28
第一部分兔骨髓间充质干细胞的提取、鉴定及培养目的:从成年兔的四肢骨中分离提取骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,并进行传代培养,同时对骨髓间充质干细胞进行鉴定,为后续实验提供实验细胞。方法:通过Percoll密度梯度分离法提取并扩增培养BMSCs,并通过流式细胞仪、成骨及成脂分化诱导培养基对BMSCs进行鉴定。结果:BMSCs原代及传代细胞状态良好,流式细胞仪、成骨及成脂分化诱导鉴定表明分离提取的BMSCs具有BMSCs特有的特征,说明分离提取成功。结论:实验所分离提取的兔四肢骨内的细胞鉴定为BMSCs,可用于后续实验研究。第二部分兔成骨细胞的提取、鉴定及培养目的:从成年兔的四肢骨膜中分离提取成骨细胞（osteoblasts,OB）,并进行传代培养,同时对OB进行鉴定,为后续实验提供实验细胞。方法:采用骨膜源性的方法提取OB并扩增培养OB,通过吉萨姆染色、茜素红染色、扫描电镜对OB进行鉴定。结果:OB原代及传代细胞状态良好,吉萨姆染色、茜素红染色、扫描电镜对OB细胞进行鉴定,结果表明分离提取的OB细胞具有相应特性,说明分...
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：213 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
-C显示，P3代BMSCs培养24h，在显微镜下不同倍数的形态表现，其中A为4×，B为10×，C为20×
基于肾主骨生髓理论研究淫羊藿苷调控外泌体内miR-122-5p对BMSCs成骨、迁移的作用及机制27图2CD29、CD44、CD45三个细胞表型鉴定结果，其中，CD29和CD44呈阳性，CD45呈阴性。2.2成骨分化诱导鉴定图3经成骨诱导后，肉眼和微下观。A为2w培养后BMSCs经茜素红染色，肉眼可见大量的被染成红色的矿化结节出现。B、C、D为2w培养后不同数显微镜下所观察到的大量矿化结节，其中B为4×，C为10×，D为20×。2.3成脂分化诱导鉴定
基于肾主骨生髓理论研究淫羊藿苷调控外泌体内miR-122-5p对BMSCs成骨、迁移的作用及机制27图2CD29、CD44、CD45三个细胞表型鉴定结果，其中，CD29和CD44呈阳性，CD45呈阴性。2.2成骨分化诱导鉴定图3经成骨诱导后，肉眼和微下观。A为2w培养后BMSCs经茜素红染色，肉眼可见大量的被染成红色的矿化结节出现。B、C、D为2w培养后不同数显微镜下所观察到的大量矿化结节，其中B为4×，C为10×，D为20×。2.3成脂分化诱导鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪干细胞来源外泌体促进大鼠皮瓣移植后血管新生的研究[J]. 胡玄,易阳艳,朱元正,王朝慧,吴舒,张静,王江文,聂佳莹. 中国修复重建外科杂志. 2019(12)
[2]基于“肾主骨生髓”辨治脊髓型颈椎病的经验[J]. 陆洋,谢林. 上海中医药杂志. 2019(12)
[3]基于“益肾生髓”理论探讨绝经后骨质疏松症的病机及临床治疗[J]. 谢兴文,李建国,李宁,黄晋,苏积亮,丁聚贤,宋学文. 中国中医基础医学杂志. 2019(11)
[4]补肾中药促进成骨前体细胞MC3T3-E1成骨与分化研究进展[J]. 朱庭辰,华臻,殷杰,王建伟. 安徽中医药大学学报. 2019(06)
[5]外泌体研究在中医学领域的应用及前景[J]. 寿崟,马宇航,虎力,徐平,张伟波,高原,张必萌. 上海中医药大学学报. 2019(06)
[6]活血通络汤对SANFH兔造模过程中Notch2、DLL3以及PDGF表达的影响[J]. 王敏,蔡万翔,李涛,江蓉星. 时珍国医国药. 2019(10)
[7]富集自体骨髓干细胞移植与髓芯减压治疗缺血性股骨头坏死患者血清成纤维细胞生长因子2、缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的变化[J]. 张景义,海国栋,杨昊飞,范丛亮,严磊,张春雷,窦浚峰,马海龙. 中国组织工程研究. 2020(01)
[8]外泌体分离技术及其临床应用研究进展[J]. 高方园,焦丰龙,张养军,秦伟捷,钱小红. 色谱. 2019(10)
[9]基于“脾主肉、肾主骨”理论探讨绝经后骨质疏松症的OPG/RANK/RANKL信号调控机制[J]. 石敏,赵继荣,薛旭,马同. 中国骨质疏松杂志. 2019(09)
[10]大鼠骨髓间充质干细胞培养方法改良与鉴定[J]. 黄可欣,于军,石搏. 中国老年学杂志. 2019(14)
本文编号：3389956
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：213 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
-C显示，P3代BMSCs培养24h，在显微镜下不同倍数的形态表现，其中A为4×，B为10×，C为20×
基于肾主骨生髓理论研究淫羊藿苷调控外泌体内miR-122-5p对BMSCs成骨、迁移的作用及机制27图2CD29、CD44、CD45三个细胞表型鉴定结果，其中，CD29和CD44呈阳性，CD45呈阴性。2.2成骨分化诱导鉴定图3经成骨诱导后，肉眼和微下观。A为2w培养后BMSCs经茜素红染色，肉眼可见大量的被染成红色的矿化结节出现。B、C、D为2w培养后不同数显微镜下所观察到的大量矿化结节，其中B为4×，C为10×，D为20×。2.3成脂分化诱导鉴定
基于肾主骨生髓理论研究淫羊藿苷调控外泌体内miR-122-5p对BMSCs成骨、迁移的作用及机制27图2CD29、CD44、CD45三个细胞表型鉴定结果，其中，CD29和CD44呈阳性，CD45呈阴性。2.2成骨分化诱导鉴定图3经成骨诱导后，肉眼和微下观。A为2w培养后BMSCs经茜素红染色，肉眼可见大量的被染成红色的矿化结节出现。B、C、D为2w培养后不同数显微镜下所观察到的大量矿化结节，其中B为4×，C为10×，D为20×。2.3成脂分化诱导鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪干细胞来源外泌体促进大鼠皮瓣移植后血管新生的研究[J]. 胡玄,易阳艳,朱元正,王朝慧,吴舒,张静,王江文,聂佳莹. 中国修复重建外科杂志. 2019(12)
[2]基于“肾主骨生髓”辨治脊髓型颈椎病的经验[J]. 陆洋,谢林. 上海中医药杂志. 2019(12)
[3]基于“益肾生髓”理论探讨绝经后骨质疏松症的病机及临床治疗[J]. 谢兴文,李建国,李宁,黄晋,苏积亮,丁聚贤,宋学文. 中国中医基础医学杂志. 2019(11)
[4]补肾中药促进成骨前体细胞MC3T3-E1成骨与分化研究进展[J]. 朱庭辰,华臻,殷杰,王建伟. 安徽中医药大学学报. 2019(06)
[5]外泌体研究在中医学领域的应用及前景[J]. 寿崟,马宇航,虎力,徐平,张伟波,高原,张必萌. 上海中医药大学学报. 2019(06)
[6]活血通络汤对SANFH兔造模过程中Notch2、DLL3以及PDGF表达的影响[J]. 王敏,蔡万翔,李涛,江蓉星. 时珍国医国药. 2019(10)
[7]富集自体骨髓干细胞移植与髓芯减压治疗缺血性股骨头坏死患者血清成纤维细胞生长因子2、缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的变化[J]. 张景义,海国栋,杨昊飞,范丛亮,严磊,张春雷,窦浚峰,马海龙. 中国组织工程研究. 2020(01)
[8]外泌体分离技术及其临床应用研究进展[J]. 高方园,焦丰龙,张养军,秦伟捷,钱小红. 色谱. 2019(10)
[9]基于“脾主肉、肾主骨”理论探讨绝经后骨质疏松症的OPG/RANK/RANKL信号调控机制[J]. 石敏,赵继荣,薛旭,马同. 中国骨质疏松杂志. 2019(09)
[10]大鼠骨髓间充质干细胞培养方法改良与鉴定[J]. 黄可欣,于军,石搏. 中国老年学杂志. 2019(14)
本文编号：3389956
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