基于心肌缺血预适应信号转导通路的淡竹叶药效物质基础研究
发布时间：2021-09-15 11:39
中药淡竹叶Lophatheri Herba为禾本科植物淡竹叶Lophatherum gracile Brongn的干燥茎叶。本论文主要围绕淡竹叶中保护心肌缺血的物质基础及其作用机制的揭示,开展了如下的研究工作：1.淡竹叶中黄酮化合物的组成分别为碳苷黄酮和氧苷黄酮,主要包括荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、阿福豆苷、木犀草苷7个黄酮化合物。本实验建立了HPLC-MS/MS-MRM方法,测定了淡竹叶中7种黄酮化合物含量,得到2组黄酮化合物组分,分别为：异荭草苷：荭草苷：日当药黄素：牡荆苷：异牡荆苷：阿福豆苷：木犀草苷=20：15：55：5：5：2：5,异荭草苷：荭草苷：日当药黄素：牡荆苷：异牡荆苷：阿福豆苷：木犀草苷=30：25：30：10：5：2：5。2.通过整体动物实验,建立大鼠缺血再灌注损伤模型,实验结果发现,淡竹叶总黄酮通过减少心肌组织中NF-κB和TNF-α的表达,下调caspase-3蛋白表达,使心肌缺血造成的损伤减轻。因此,淡竹叶总黄酮保护缺血心肌的作用机制可能与清除氧自由基、抑制氧自由基产生、抑制脂质过氧化的作用、增加NO水平,抑制]NF-κB和TNF-a的活...
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文献综述
1. 中药淡竹叶药材的质量研究
1.1 中药淡竹叶的本草考证
1.2 中药淡竹叶与常见混伪品的鉴别
1.3 中药淡竹叶化学成分的现代研究
1.4 中药淡竹叶药材品质形成的环境影响因素
2. 心血管疾病、心肌缺血损伤与心肌缺血预适应
2.1 心血管疾病的概述
2.2 中医药对心肌缺血损伤的研究现状
2.3 碳苷黄酮保护心肌缺血损伤作用机制的研究
2.4 心肌缺血预适应的研究进展
3. 中药淡竹叶治疗心肌缺血再灌注损伤的作用研究
3.1 中药淡竹叶治疗心肌缺血损伤的中医理论依据
3.2 中药淡竹叶治疗心肌缺血损伤的药理作用
4. 结语
参考文献
第二章 淡竹叶中黄酮化合物组分比例研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
2.2 供试品溶液的制备
2.3 色谱及质谱条件
2.4 方法学考察
2.5 供试品溶液中黄酮化合物的定性与定量分析
3. 结果与讨论
3.1 方法学考察
3.2 淡竹叶样品中7种黄酮化合物的含量测定
3.3 淡竹叶样品中黄酮化合物的组成及含量配比研究
4. 结论
参考文献
第三章 淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
1. 实验材料
1.1 动物
1.2 药物与试剂
2. 实验方法
2.1 淡竹叶总黄酮提取物的制备及含量测定
2.2 分组及给药
2.3 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的制备
2.4 大鼠组织标本采集
2.5 免疫组织化学检测
3. 结果与讨论
3.1 淡竹叶总黄酮提取物的含量测定
3.2 缺血再灌注对大鼠心肌组织的影响
3.3 淡竹叶总黄酮对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织中蛋白表达的影响
4. 结论
参考文献
第四章 淡竹叶中黄酮化合物保护缺血心肌的作用机制研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 原代大鼠心肌细胞的培养
2.2 分组与给药
2.3 心肌细胞缺氧复氧模型的制备
2.4 心肌细胞存活率的测定
2.5 心肌细胞凋亡的测定
2.6 心肌细胞游离钙离子浓度检测
2.7 Western Blotting检测蛋白表达
3. 实验结果
3.1 MTT心肌细胞存活率
3.2 Annexin V FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡
3.3 心肌细胞游离钙离子浓度检测
3.4 Western blotting检测蛋白表达
4. 结论
参考文献
第五章 淡竹叶抗氧化作用的物质基础研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 淡竹叶总黄酮提取工艺的优化
2.2 总黄酮含量测定
2.3 抗氧化活性测定
2.4 BBD响应面实验设计
2.5 统计学分析
2.6 柱前DPPH反应与HPLC-PAD联用
3. 结果与讨论
3.1 自变量的最优化试验
3.2 响应面模型的建立及分析
3.3 预测模型的验证试验
3.4 柱前DPPH反应抗氧化活性的HPLC-PAD联用技术
4. 结论
参考文献
第六章 淡竹叶中黄酮化合物体内传输过程研究
1. 仪器与试剂
2. 实验方法
2.1 荧光分光光度法测定黄酮化合物对BSA荧光光谱的影响
2.2 紫外-可见光谱法测定黄酮化合物对BSA紫外光谱的影响
2.3 淡竹叶中黄酮化合物的物理常数计算
2.4 淡竹叶中黄酮化合物的优势构象计算
2.5 分子模拟对接试验
3. 结果与讨论
3.1 淡竹叶中黄酮类化合物对BSA荧光光谱的影响
3.2 淡竹叶中黄酮类化合物导致的BSA荧光猝灭类型
3.3 淡竹叶中黄酮化合物与BSA的结合模式 (作用力类型)
3.4 淡竹叶中黄酮类化合物对BSA构象的影响
3.5 淡竹叶中黄酮化合物的优势构象计算
3.6 分子模拟对接
4. 结论
参考文献
第七章 淡竹叶中黄酮化合物的大鼠体内分布研究
1. 淡竹叶中黄酮化合物的大鼠体内分布研究
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.3 结果与讨论
2. ~(131)I标记异荭草苷的标记合成及其体内外摄取试验
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.3 结果与讨论
3. 结论
参考文献
结语
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
作者简介
附表
参考文献
【参考文献】：
期刊论文
[1]碳苷黄酮保护心肌缺血损伤作用的研究进展[J]. 邵莹,吴启南,乐巍,王红,蒋征. 中草药. 2015(01)
[2]COX-2在心肌缺血预适应中的作用及其机制探讨[J]. 周秀传,陈海龙,陈茜,冯伟镜,曹孟,朱晓琴. 临床医学工程. 2014(11)
[3]重庆市永川区淡竹叶资源群落特征研究[J]. 银福军,舒抒,周华蓉,瞿显友,潘瑞,周益权,孙伟. 中国中药杂志. 2014(22)
[4]清热泻火的淡竹叶[J]. 崔国静,吴政慧. 首都医药. 2014(17)
[5]淡竹叶红外光谱的多级鉴定与分析[J]. 邵莹,吴启南,谷巍,乐巍,吴达维,樊修和. 中国中药杂志. 2014(09)
[6]淡竹叶中一个新的黄酮碳苷[J]. 赵慧男,陈梅,范春林,王英,李药兰,叶文才. 中国中药杂志. 2014(02)
[7]枳壳总黄酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷在大鼠体内的组织分布[J]. 陈海芳,张武岗,袁金斌,魏莹,骆利平,杨武亮. 中国新药杂志. 2014(01)
[8]超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱分析黄酮类化合物及小毛茛茎叶的成分[J]. 池玉梅,李瑶,张瑜,王琴霞,崔小兵. 色谱. 2013(09)
[9]淡竹叶品质与主导气候因子的灰色关联度分析[J]. 邵莹,吴启南,乐巍,周婧. 中国现代中药. 2013(06)
[10]超声萃取-响应面法优化淡竹叶多糖提取方法研究[J]. 张海容,白娟,魏增云,刘勇麟,陈金娥,王迎进. 化学研究与应用. 2013(03)
博士论文
[1]大鼠心肌缺血再灌注损伤心室重构及芒果苷对其作用和机制的研究[D]. 郑德志.第三军医大学 2012
[2]牡荆素对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其作用机制[D]. 董六一.安徽医科大学 2007
[3]竹叶提取物及荭草苷抗心肌缺血作用及其机制探讨[D]. 付晓春.沈阳药科大学 2005
[4]玉米须化学成分及其抗氧化作用研究[D]. 王英平.吉林农业大学 2004
硕士论文
[1]荭草素-2"-O-β-D-半乳糖苷抑制小胶质细胞炎症反应及其机制研究[D]. 周翔.苏州大学 2013
[2]石南藤的化学成分研究[D]. 赵国伟.山东大学 2012
[3]霞草花化学成分的研究[D]. 武海艳.济南大学 2012
[4]淡竹叶品质评价及心血管药理作用研究[D]. 邵莹.南京中医药大学 2012
[5]淡竹叶和水竹叶化学成分研究[D]. 张慧艳.北京中医药大学 2010
[6]酸枣仁化学成分及其配伍制剂天王补心丹质量标准的研究[D]. 王慧.沈阳药科大学 2009
本文编号：3396012
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文献综述
1. 中药淡竹叶药材的质量研究
1.1 中药淡竹叶的本草考证
1.2 中药淡竹叶与常见混伪品的鉴别
1.3 中药淡竹叶化学成分的现代研究
1.4 中药淡竹叶药材品质形成的环境影响因素
2. 心血管疾病、心肌缺血损伤与心肌缺血预适应
2.1 心血管疾病的概述
2.2 中医药对心肌缺血损伤的研究现状
2.3 碳苷黄酮保护心肌缺血损伤作用机制的研究
2.4 心肌缺血预适应的研究进展
3. 中药淡竹叶治疗心肌缺血再灌注损伤的作用研究
3.1 中药淡竹叶治疗心肌缺血损伤的中医理论依据
3.2 中药淡竹叶治疗心肌缺血损伤的药理作用
4. 结语
参考文献
第二章 淡竹叶中黄酮化合物组分比例研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
2.2 供试品溶液的制备
2.3 色谱及质谱条件
2.4 方法学考察
2.5 供试品溶液中黄酮化合物的定性与定量分析
3. 结果与讨论
3.1 方法学考察
3.2 淡竹叶样品中7种黄酮化合物的含量测定
3.3 淡竹叶样品中黄酮化合物的组成及含量配比研究
4. 结论
参考文献
第三章 淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
1. 实验材料
1.1 动物
1.2 药物与试剂
2. 实验方法
2.1 淡竹叶总黄酮提取物的制备及含量测定
2.2 分组及给药
2.3 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的制备
2.4 大鼠组织标本采集
2.5 免疫组织化学检测
3. 结果与讨论
3.1 淡竹叶总黄酮提取物的含量测定
3.2 缺血再灌注对大鼠心肌组织的影响
3.3 淡竹叶总黄酮对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织中蛋白表达的影响
4. 结论
参考文献
第四章 淡竹叶中黄酮化合物保护缺血心肌的作用机制研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 原代大鼠心肌细胞的培养
2.2 分组与给药
2.3 心肌细胞缺氧复氧模型的制备
2.4 心肌细胞存活率的测定
2.5 心肌细胞凋亡的测定
2.6 心肌细胞游离钙离子浓度检测
2.7 Western Blotting检测蛋白表达
3. 实验结果
3.1 MTT心肌细胞存活率
3.2 Annexin V FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡
3.3 心肌细胞游离钙离子浓度检测
3.4 Western blotting检测蛋白表达
4. 结论
参考文献
第五章 淡竹叶抗氧化作用的物质基础研究
1. 实验材料
2. 实验方法
2.1 淡竹叶总黄酮提取工艺的优化
2.2 总黄酮含量测定
2.3 抗氧化活性测定
2.4 BBD响应面实验设计
2.5 统计学分析
2.6 柱前DPPH反应与HPLC-PAD联用
3. 结果与讨论
3.1 自变量的最优化试验
3.2 响应面模型的建立及分析
3.3 预测模型的验证试验
3.4 柱前DPPH反应抗氧化活性的HPLC-PAD联用技术
4. 结论
参考文献
第六章 淡竹叶中黄酮化合物体内传输过程研究
1. 仪器与试剂
2. 实验方法
2.1 荧光分光光度法测定黄酮化合物对BSA荧光光谱的影响
2.2 紫外-可见光谱法测定黄酮化合物对BSA紫外光谱的影响
2.3 淡竹叶中黄酮化合物的物理常数计算
2.4 淡竹叶中黄酮化合物的优势构象计算
2.5 分子模拟对接试验
3. 结果与讨论
3.1 淡竹叶中黄酮类化合物对BSA荧光光谱的影响
3.2 淡竹叶中黄酮类化合物导致的BSA荧光猝灭类型
3.3 淡竹叶中黄酮化合物与BSA的结合模式 (作用力类型)
3.4 淡竹叶中黄酮类化合物对BSA构象的影响
3.5 淡竹叶中黄酮化合物的优势构象计算
3.6 分子模拟对接
4. 结论
参考文献
第七章 淡竹叶中黄酮化合物的大鼠体内分布研究
1. 淡竹叶中黄酮化合物的大鼠体内分布研究
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.3 结果与讨论
2. ~(131)I标记异荭草苷的标记合成及其体内外摄取试验
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.3 结果与讨论
3. 结论
参考文献
结语
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
作者简介
附表
参考文献
【参考文献】：
期刊论文
[1]碳苷黄酮保护心肌缺血损伤作用的研究进展[J]. 邵莹,吴启南,乐巍,王红,蒋征. 中草药. 2015(01)
[2]COX-2在心肌缺血预适应中的作用及其机制探讨[J]. 周秀传,陈海龙,陈茜,冯伟镜,曹孟,朱晓琴. 临床医学工程. 2014(11)
[3]重庆市永川区淡竹叶资源群落特征研究[J]. 银福军,舒抒,周华蓉,瞿显友,潘瑞,周益权,孙伟. 中国中药杂志. 2014(22)
[4]清热泻火的淡竹叶[J]. 崔国静,吴政慧. 首都医药. 2014(17)
[5]淡竹叶红外光谱的多级鉴定与分析[J]. 邵莹,吴启南,谷巍,乐巍,吴达维,樊修和. 中国中药杂志. 2014(09)
[6]淡竹叶中一个新的黄酮碳苷[J]. 赵慧男,陈梅,范春林,王英,李药兰,叶文才. 中国中药杂志. 2014(02)
[7]枳壳总黄酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷在大鼠体内的组织分布[J]. 陈海芳,张武岗,袁金斌,魏莹,骆利平,杨武亮. 中国新药杂志. 2014(01)
[8]超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱分析黄酮类化合物及小毛茛茎叶的成分[J]. 池玉梅,李瑶,张瑜,王琴霞,崔小兵. 色谱. 2013(09)
[9]淡竹叶品质与主导气候因子的灰色关联度分析[J]. 邵莹,吴启南,乐巍,周婧. 中国现代中药. 2013(06)
[10]超声萃取-响应面法优化淡竹叶多糖提取方法研究[J]. 张海容,白娟,魏增云,刘勇麟,陈金娥,王迎进. 化学研究与应用. 2013(03)
博士论文
[1]大鼠心肌缺血再灌注损伤心室重构及芒果苷对其作用和机制的研究[D]. 郑德志.第三军医大学 2012
[2]牡荆素对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其作用机制[D]. 董六一.安徽医科大学 2007
[3]竹叶提取物及荭草苷抗心肌缺血作用及其机制探讨[D]. 付晓春.沈阳药科大学 2005
[4]玉米须化学成分及其抗氧化作用研究[D]. 王英平.吉林农业大学 2004
硕士论文
[1]荭草素-2"-O-β-D-半乳糖苷抑制小胶质细胞炎症反应及其机制研究[D]. 周翔.苏州大学 2013
[2]石南藤的化学成分研究[D]. 赵国伟.山东大学 2012
[3]霞草花化学成分的研究[D]. 武海艳.济南大学 2012
[4]淡竹叶品质评价及心血管药理作用研究[D]. 邵莹.南京中医药大学 2012
[5]淡竹叶和水竹叶化学成分研究[D]. 张慧艳.北京中医药大学 2010
[6]酸枣仁化学成分及其配伍制剂天王补心丹质量标准的研究[D]. 王慧.沈阳药科大学 2009
本文编号：3396012
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