HMGB1/RAGE促炎信号轴在下肢缺血再灌注血管内皮细胞损伤中的作用研究
发布时间：2021-09-16 21:10
第一章 HMGB1/RAGE信号轴在大鼠急性下肢缺血再灌注损伤中的变化1 研究背景与目的急性下肢缺血损伤由下肢动脉管腔突然闭塞导致,是血管外科常见的急重症之一。尽管目前诊治技术较前明显进步,但急性下肢缺血治疗后并发症发生率、死亡率和肢体丢失率仍然很高。尽快恢复缺血肢体的供血是恢复肢体正常功能的必要条件,但恢复供血后发生的应激反应又可诱发缺血组织的再一次损伤,称之为缺血再灌注（Ischemia/reperfusion,IR）损伤。IR会导致机体不同程度的损伤,从轻度损伤到伴随全身炎性反应综合征的系统性反应,可累及多个器官。下肢缺血再灌注损伤是一系列复杂的炎性应答过程,常见的炎性因子包括白介素（Interleukin,IL）、细胞间黏附分子（Intercellular adhesion molecule,ICAM）、血管细胞黏附分子（Vascular cell adhesion molecule,VCAM）、粒细胞集落刺激因子（Granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF）、肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor,TNF-α）、单...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２ＦＰＳ－ＺＭ１抑制缺血再灌注损伤后炎症应答??－
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?山东大学博士学位论文???ｂｌｏｔ的检测结果显示，ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ中ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１的表达均显著上??调，而３－ＭＡ抑制细胞自噬及ＦＰＳ－ＺＭ１预处理均对ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１表达无显??著影响，同时，ＦＰＳ－ＺＭ１预处理之后再用ＲＡＰＡ诱导自噬后对ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１??表达亦无显著影响（Ｐ＞〇．〇５，图３．１Ａ和Ｂ）。以上结果提示，ＨＭＧＢ１及ＲＡＧＥ??表达在ＨＲ损伤后自噬过程无显著变化。??１＿麵??／?Ｖ／?／?／，／／?／?－Ｉ：——??Ｖ／?Ｖ／?；戀??／?＾??图３．１?ＨＭＧＢ１及ＲＡＧＥ表达在ＨＲ损伤后自噬过程中变化??Ａ，?ｑＲＴ－ＰＣＲ?检测?ＨＭＧＢ１?及?ＲＡＧＥ?的?ｍＲＮＡ?表达；Ｂ，?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?检测?ＨＭＧＢ１??和ＲＡＧＥ表达??２．２?ＦＰＳ－ＺＭ１预处理能够显著抑制ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ自噬??己有的研究表明，ＦＰＳ－ＺＭ１能够特异性抑制ＨＭＧＢ１与ＲＡＧＥ的结合，但??对其表达无明显影响。为明确ＨＭＧＢ１?／ＲＡＧＥ信号轴是否参与调控ＨＲ后ＨＵＶＥＣ??的自噬过程，本研究对不同处理条件下细胞的自噬水平进行检测。Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ??研宄结果显示，ＨＲ损伤能够显著上调ＨＵＶＥＣ中ＬＣ３?ＩＩ、Ｂｅｃｌｉｎ?Ｉ、ＮＬＲＰ３、ＩＬ－６??和ＴＮＦ－ａ表达而下调Ｐ６２的表达，３－ＭＡ或ＦＰＳ－ＺＭ１处理能够部分逆转上述结??果，而ＦＰＳ－ＺＭ１和雷帕霉素共同处理细胞则进一步增强上述结果，提示ＦＰＳ－ＺＭ１??能够抑制ＨＲ损伤诱导的ＨＵＶＥＣ的自噬行为（图３．２Ａ）。电镜观察结果进一步??显示，ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ中自噬小体显著增加，而３－ＭＡ或Ｆ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy: novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Ya-Guang Huang,Wei Tao,Song-Bai Yang,Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2019(06)
[2]RAGE阻断剂FPS-ZM1对心肌缺血再灌注损伤的作用研究[J]. 屠甜甜,王向明,狄瑞杰,郭妍. 实用老年医学. 2018(05)
[3]血管紧张素转换酶2激动剂三氮脒减轻小鼠肢体缺血再灌注引发的肺损伤[J]. 李树民,王枭鹰,刘帆,杨秀红. 生理学报. 2018(02)
[4]Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J]. Fu-Cai Wang,Jing-Xuan Pei,Jun Zhu,Nan-Jin Zhou,Dong-Sheng Liu,Hui-Fang Xiong,Xiao-Qun Liu,Dong-Jia Lin,Yong Xie. World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[5]Mechanisms of hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effects of nitric oxide[J]. Lian-Yue Guan,Pei-Yao Fu,Pei-Dong Li,Zhuo-Nan Li,Hong-Yu Liu,Min-Gang Xin,Wei Li. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2014(07)
本文编号：3397301
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２ＦＰＳ－ＺＭ１抑制缺血再灌注损伤后炎症应答??－
？树?＾??ＥＲＫ１／２?：、＝，＝二＝＝＝＝Ｓ?Ｓｉ??Ｐ－ＥＲＫ１／２?；?＇ｓｓｓｒ；；鵁??ｐ－Ｐ６５?；＊＊＊？?ｍｍｕｍ?＇＜ｒｎｍｍ?＾＾＇■＇ｍｍｍ??Ｐ６５?＇？；Ｗ?—，?一?？—??ｐ－｜ＫＢａ??ＩＫＢａ?——?—?—?—？？—?■—－??ｎｌｒｐ３?ｒａｎｎｎｇｗ——□—ｉ??ＧＡＰＤＨ??Ｐ６５?ｉｎ?ｎｕｃｌｅｕｓ?￣????Ｌａｍｉｎ?Ａ／Ｃ?．■?＾?ｍｍ＾．ｍｍｍ?＊＂＊＊?ＴＴ＾?＊＊？：．一??图１．３?ＦＰＳ－ＺＭ１阻断ＭＡＰＫ－ＮＦ－ｋＢ通路介导炎症反应??３讨论??肢体发生急性缺血后，组织中主要发生三种病理变化：１、栓子远端动脉形??成继发性血栓堵塞动脉分支；２、微小血管缺血水肿，加重血液微循环阻力；３、??缺血局部肌肉水肿造成肌筋膜室内压力增高诱发骨筋膜室综合征的发生［４９＿５１］。??在此过程中由于缺氧导致细胞厌氧代谢增加，细胞内ＡＴＰ合成减少伴随大量乳??酸堆积，引起细胞酸中毒，进而诱导细胞凋亡坏死［５２，５３］。然而，当组织恢复供??氧，会刺激细胞合成释放一系列炎症介质，包括超氧化物、脂质介质和多肽类介??质，这些炎症介质诱导炎症反应不仅对初始局部缺血器官或组织造成损伤，还可??能导致远端多个器官功能障碍，临床称之为多器官功能障碍综合征（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ??ｏｒｇａｎ?ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ?ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＭＯＤＳ），是造成重症患者死亡的主要原因［３４，３８’??５４＿５７］。因此，如何有效降低再灌注引起的瀑式炎症反应对降低缺血再灌注损伤程??度、提高患者预后具有重要意义。??目前，下肢缺血再灌注损伤的体内研宄
?山东大学博士学位论文???ｂｌｏｔ的检测结果显示，ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ中ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１的表达均显著上??调，而３－ＭＡ抑制细胞自噬及ＦＰＳ－ＺＭ１预处理均对ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１表达无显??著影响，同时，ＦＰＳ－ＺＭ１预处理之后再用ＲＡＰＡ诱导自噬后对ＲＡＧＥ和ＨＭＧＢ１??表达亦无显著影响（Ｐ＞〇．〇５，图３．１Ａ和Ｂ）。以上结果提示，ＨＭＧＢ１及ＲＡＧＥ??表达在ＨＲ损伤后自噬过程无显著变化。??１＿麵??／?Ｖ／?／?／，／／?／?－Ｉ：——??Ｖ／?Ｖ／?；戀??／?＾??图３．１?ＨＭＧＢ１及ＲＡＧＥ表达在ＨＲ损伤后自噬过程中变化??Ａ，?ｑＲＴ－ＰＣＲ?检测?ＨＭＧＢ１?及?ＲＡＧＥ?的?ｍＲＮＡ?表达；Ｂ，?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?检测?ＨＭＧＢ１??和ＲＡＧＥ表达??２．２?ＦＰＳ－ＺＭ１预处理能够显著抑制ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ自噬??己有的研究表明，ＦＰＳ－ＺＭ１能够特异性抑制ＨＭＧＢ１与ＲＡＧＥ的结合，但??对其表达无明显影响。为明确ＨＭＧＢ１?／ＲＡＧＥ信号轴是否参与调控ＨＲ后ＨＵＶＥＣ??的自噬过程，本研究对不同处理条件下细胞的自噬水平进行检测。Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ??研宄结果显示，ＨＲ损伤能够显著上调ＨＵＶＥＣ中ＬＣ３?ＩＩ、Ｂｅｃｌｉｎ?Ｉ、ＮＬＲＰ３、ＩＬ－６??和ＴＮＦ－ａ表达而下调Ｐ６２的表达，３－ＭＡ或ＦＰＳ－ＺＭ１处理能够部分逆转上述结??果，而ＦＰＳ－ＺＭ１和雷帕霉素共同处理细胞则进一步增强上述结果，提示ＦＰＳ－ＺＭ１??能够抑制ＨＲ损伤诱导的ＨＵＶＥＣ的自噬行为（图３．２Ａ）。电镜观察结果进一步??显示，ＨＲ损伤后ＨＵＶＥＣ中自噬小体显著增加，而３－ＭＡ或Ｆ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy: novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Ya-Guang Huang,Wei Tao,Song-Bai Yang,Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2019(06)
[2]RAGE阻断剂FPS-ZM1对心肌缺血再灌注损伤的作用研究[J]. 屠甜甜,王向明,狄瑞杰,郭妍. 实用老年医学. 2018(05)
[3]血管紧张素转换酶2激动剂三氮脒减轻小鼠肢体缺血再灌注引发的肺损伤[J]. 李树民,王枭鹰,刘帆,杨秀红. 生理学报. 2018(02)
[4]Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J]. Fu-Cai Wang,Jing-Xuan Pei,Jun Zhu,Nan-Jin Zhou,Dong-Sheng Liu,Hui-Fang Xiong,Xiao-Qun Liu,Dong-Jia Lin,Yong Xie. World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[5]Mechanisms of hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effects of nitric oxide[J]. Lian-Yue Guan,Pei-Yao Fu,Pei-Dong Li,Zhuo-Nan Li,Hong-Yu Liu,Min-Gang Xin,Wei Li. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2014(07)
本文编号：3397301
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