星形胶质细胞铁代谢异常参与帕金森病细胞模型神经元铁沉积的机制研究
发布时间：2021-10-08 11:23
帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种多发于中老年的中枢神经系统退行性疾病,以运动不能、肌僵直、静止性震颤及姿势反射障碍为特征性表现,其病理学特征是中脑黑质致密带多巴胺能神经元脱失,纹状体多巴胺（dopamine,DA）释放减少。研究显示遗传因素、环境因素和氧化应激等可能参与PD的发病,但其发病机制并不明确。脑内高铁导致黑质-纹状体系统DA能神经元功能的损伤已成为越来越受到神经科学家关注的热点问题。目前PD铁沉积的研究主要集中在DA能神经元,实际上脑内多种胶质细胞在铁稳态调节中也发挥重要作用。星形胶质细胞对铁有极高的耐受能力,铁负载时,神经元、小胶质细胞和少突胶质细胞铁沉积,而星形胶质细胞却在同样的情况下没有铁的沉积。本室前期研究显示,6-OHDA激活神经元铁调节蛋白（iron regulatory protein,IRP1）,使二价金属离子转运蛋白1（divalent metal transporter1,DMT1）上调,铁转出蛋白Ferroportin1（FPN1）下调,铁转入加快,铁转出减慢,导致铁的沉积。6-OHDA激活星形胶质细胞缺氧诱导因子-2α（h...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Transwell工作示意图
材料与方法11检测星形胶质细胞和VM神经元共培养体系，星形胶质细胞和神经元的Fe2+，实验一处理方法如下：10μM6-OHDA分别预孵育原代培养的星形胶质细胞和原代培养的VM神经元24h,1mMFAC孵育原代培养的星形胶质细胞30min，上下室同时更换为原代培养的VM神经元的培养基，将上室放置下室的孔板中共培养30min，检测原代培养的VM神经元中Fe2+的含量。如图所示：图2实验一干预示意图具体分组如下：单共培养组（AS/N）：星形胶质细胞和VM神经元共培养30min;星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，与星形胶质细胞共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，与VM神经元共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，下上室共培养30min；FAC处理星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+FAC/N）：1MmFAC处理星形胶质细胞30min，与VM神经元共培养30min；FAC处理星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，1mMFAC星形胶质细胞30min，上下室共培养30min；
青岛大学博士学位论文12FAC处理6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA+FAC/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，1mMFAC处理6-OHDA预孵育的星形胶质细胞30min，与VM神经元共培养30min。FAC处理6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，1mMFAC处理6-OHDA预孵育的星形胶质细胞30min，上下室共培养30min。实验二处理方法如下：10μM6-OHDA分别预孵育原代培养的星形胶质细胞和原代培养的中脑背腹侧神经元24h,1mMFAC孵育原代培养的星形胶质细胞30min，上下室同时更换为原代培养的VM神经元的培养基，将上室放置下室的孔板中共培养30min，检测原代培养的VM神经元中Fe2+的含量。如图所示：图3实验二干预示意图具体分组如下：单共培养组（AS/N）：星形胶质细胞和VM神经元共培养共培养30min;星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，与星形胶质细胞共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，与VM神经元共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，下上室共培养30min；星形胶质细胞和FAC处理VM神经元共培养组（AS/N+FAC）：1MmFAC处
【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧诱导因子对铁代谢的调节（英文）[J]. 许曼曼,王俊,谢俊霞. 生理学报. 2017(05)
本文编号：3424062
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Transwell工作示意图
材料与方法11检测星形胶质细胞和VM神经元共培养体系，星形胶质细胞和神经元的Fe2+，实验一处理方法如下：10μM6-OHDA分别预孵育原代培养的星形胶质细胞和原代培养的VM神经元24h,1mMFAC孵育原代培养的星形胶质细胞30min，上下室同时更换为原代培养的VM神经元的培养基，将上室放置下室的孔板中共培养30min，检测原代培养的VM神经元中Fe2+的含量。如图所示：图2实验一干预示意图具体分组如下：单共培养组（AS/N）：星形胶质细胞和VM神经元共培养30min;星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，与星形胶质细胞共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，与VM神经元共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，下上室共培养30min；FAC处理星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+FAC/N）：1MmFAC处理星形胶质细胞30min，与VM神经元共培养30min；FAC处理星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，1mMFAC星形胶质细胞30min，上下室共培养30min；
青岛大学博士学位论文12FAC处理6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA+FAC/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，1mMFAC处理6-OHDA预孵育的星形胶质细胞30min，与VM神经元共培养30min。FAC处理6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，1mMFAC处理6-OHDA预孵育的星形胶质细胞30min，上下室共培养30min。实验二处理方法如下：10μM6-OHDA分别预孵育原代培养的星形胶质细胞和原代培养的中脑背腹侧神经元24h,1mMFAC孵育原代培养的星形胶质细胞30min，上下室同时更换为原代培养的VM神经元的培养基，将上室放置下室的孔板中共培养30min，检测原代培养的VM神经元中Fe2+的含量。如图所示：图3实验二干预示意图具体分组如下：单共培养组（AS/N）：星形胶质细胞和VM神经元共培养共培养30min;星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，与星形胶质细胞共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，与VM神经元共培养30min；6-OHDA预孵育星形胶质细胞和6-OHDA预孵育VM神经元共培养组（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA预孵育星形胶质细胞24h，10μM6-OHDA预孵育VM神经元24h，下上室共培养30min；星形胶质细胞和FAC处理VM神经元共培养组（AS/N+FAC）：1MmFAC处
【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧诱导因子对铁代谢的调节（英文）[J]. 许曼曼,王俊,谢俊霞. 生理学报. 2017(05)
本文编号：3424062
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3424062.html
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