长链非编码RNA MEG3通过ceRNA机制调控肝脏糖异生的研究
发布时间：2021-10-08 20:51
研究背景:糖尿病及其并发症的流行对全球健康构成严重威胁。全球约4.25亿成年人患有糖尿病,其中超过90%是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）。因此,研究糖尿病的发病机制、寻找有效的糖尿病控制方法仍然是目前糖尿病相关研究的重点。肝脏是机体胰岛素和能量代谢调控的主要靶器官之一,它通过控制糖异生及糖原分解过程控制着肝葡萄糖释放水平,并以此方式在维持血浆葡萄糖稳态中发挥重要作用。肝脏糖异生紊乱引起葡萄糖输出异常增加是T2DM重要的病理基础之一。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指长度在200个碱基对以上但是不具备蛋白质编码功能的RNA。LncRNA在细胞代谢中主要起调节作用,其发现为研究糖尿病的分子机制开辟了新领域。研究显示lncRNA参与了很多调控糖尿病病理生理的过程,包括影响胰岛功能、调节肝脏代谢、在脂肪组织中调节糖代谢及分化等等,但lncRNA在糖尿病中的相关研究仍然没有得到充分重视,目前为止只有少量lncRNA在糖尿病中的异常表达被检测出来,并且仅有更少的lncRNA在糖尿病发展中的作用得到探究。因此,探讨l...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：139 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２?ＨＦＤ喂养的小鼠和ｏｂ／ｏｂ小鼠表现出ＭＥＧ３和ＡＴＦ４上调，ｍｉＲ－２１４下调Ｄ?（Ａ）与??５２??
?山东大学博士学位论文???３－１?Ｂ?ｃ?１．５－??１?：千！??？?：ｌｌ?１１：１．．．：?Ｉ：：??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??ｃ?２?Ｄ?八二丨—－．．．．．．￣＂Ｊ??．１?１?＊?ｔ?１?－ｆ?Ｔ??ｙ?｜２．?凡二??＾?＊??；??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图３棕榈酸酯时间依赖性地增加肝细胞中的ＭＥＧ３和ＡＴＦ４，但降低ｍｉＲ－２１４。采用０．５??ｍＭ棕榈酸酯处理小鼠原代肝细胞不同时间（０、２、４、１０?ｈ）。ｑＲＴ－ＰＣＲ结果表明棕榈酸酯??时间依赖性地增加（Ａ）ＭＥＧ３表达和（Ｃ）ＡＴＦ４ｍＲＮＡ表达，但降低（Ｂ）肝细胞中ｍｉＲ－２１４??表达。（Ｄ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ表明棕榈酸酯时间依赖性地增加肝细胞中ＡＴＦ４蛋白的表达。＾？＜０．０５??０?ｈ?ｇｒｏｕｐ。实验重复三次。??３．３?ＭＥＧ３可作为ｍｉＲ－２１４的ｃｅＲＮＡ来上调ＡＴＦ４的表达??为了研宄ＭＥＧ３表达对ｍｉＲ－２１４和ＡＴＦ４表达的影响，通过分别用??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３或ｓｉ－ＭＥＧ３转染肝细胞来过表达或敲低ＭＥＧ３。ｑＲＴ－ＰＣＲ证实??ＭＥＧ３的过表达和敲低效率（图４Ａ）。ＭＥＧ３过表达下调ｍｉＲ－２１４表达，但上调??ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表达。相反，ＭＥＧ３敲低可显著上调ｍｉＲ－２１４表达，但下??调ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表达（图４Ｂ－４Ｄ）。接下来，我们探讨了?ｍｉＲ－２１４的表??５４??
?山东大学博士学位论文???达对ＭＥＧ３和ＡＴＦ４表达的影响。ｑＲＴ－ＰＣＲ证实了?ｍｉＲ－２１４的过表达和敲低效??率（图４Ｅ）。结果表明，与相应的对照相比，ｍｉＲ－２１４ｍｉｍｉｃ显著下调ＭＥＧ３和??ＡＴＦ４表达水平，而ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ显著上调ＭＥＧ３和ＡＴＦ４的表达水平（图??４Ｆ－４Ｈ）。??ＡＴＦ４?１???１??Ａｃｔｉｎ?｜?ｍｍｍ?ｗｉｗｗ?｜??Ａ?１０－．?＊?？?ｇ?２．５－｜?Ｃ?３－ｊ?〇?＾?２．〇ｉ??ｉ：?ａ?！；：?｜ｔ＾?ｉ?卜．｜??ｉＨｊｋｕＵｔｊＭｉｉ??／?／?／?／?／（，／＂／／?＂?／?／??ＡＴＦ４?｜?－??Ｅ?Ａｃｔｉｎ?｜ｉＷ—？?ｍｍｍ?＇ｍｒｎｍ＾?｜??ｉＬｌｊＬｉｊＬｉｊＬｌ??＂／＊＜／??／?／?／?／?／?／?，，??图４?ＭＥＧ３和ｍｉＲ－２１４过表达和敲低对原代肝细胞中ＡＴＦ４表达的影响。川??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３、ｓｉ－ＭＥＧ３和相应对照，以及ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ／ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ和相应对照转染小??鼠原代肝细胞。（Ａ）通过ｑＲＴ－ＰＣＲ确认ＭＥＧ３的过表达和敲低效书。ｑＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ??ｂｌｏｔ结果表明，ＭＥＧ３过表达下调（Ｂ）?ｍｉＲ－２１４表达，但增加ＡＴＦ４的（Ｃ）?ｍＲＮＡ和（Ｄ）??蛋白的表达。ＭＥＧ３敲低发挥相反作用。（Ｅ）?ｑＲＴ－ＰＣＲ结果表明ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ增加了??ｍｉＲ－２１４?的表达，而?ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?减少了?ｍｉＲ－２１４?的表达。ｑＲＴ－ＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?结??果表明，ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ
【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA-Co7Rik的表达特征及其对糖异生的影响[J]. 张凡,崔县伟,袁雪雯,孙春涛,朱子阳,顾威,周亚慧,孙亚洲,刘倩琦. 中华内分泌代谢杂志. 2016 (11)
[2]mTOR/S6K1信号通路与有氧运动改善小鼠高脂饮食诱导胰岛素抵抗间的关系[J]. 苑红,牛燕媚,刘彥辉,苏照鹏,李慧阁,姜宁,傅力. 中国康复医学杂志. 2009(04)
硕士论文
[1]转录因子Nrf2对高脂饮食诱导小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及机制[D]. 倪阵.第四军医大学 2013
本文编号：3424937
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：139 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２?ＨＦＤ喂养的小鼠和ｏｂ／ｏｂ小鼠表现出ＭＥＧ３和ＡＴＦ４上调，ｍｉＲ－２１４下调Ｄ?（Ａ）与??５２??
?山东大学博士学位论文???３－１?Ｂ?ｃ?１．５－??１?：千！??？?：ｌｌ?１１：１．．．：?Ｉ：：??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??ｃ?２?Ｄ?八二丨—－．．．．．．￣＂Ｊ??．１?１?＊?ｔ?１?－ｆ?Ｔ??ｙ?｜２．?凡二??＾?＊??；??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图３棕榈酸酯时间依赖性地增加肝细胞中的ＭＥＧ３和ＡＴＦ４，但降低ｍｉＲ－２１４。采用０．５??ｍＭ棕榈酸酯处理小鼠原代肝细胞不同时间（０、２、４、１０?ｈ）。ｑＲＴ－ＰＣＲ结果表明棕榈酸酯??时间依赖性地增加（Ａ）ＭＥＧ３表达和（Ｃ）ＡＴＦ４ｍＲＮＡ表达，但降低（Ｂ）肝细胞中ｍｉＲ－２１４??表达。（Ｄ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ表明棕榈酸酯时间依赖性地增加肝细胞中ＡＴＦ４蛋白的表达。＾？＜０．０５??０?ｈ?ｇｒｏｕｐ。实验重复三次。??３．３?ＭＥＧ３可作为ｍｉＲ－２１４的ｃｅＲＮＡ来上调ＡＴＦ４的表达??为了研宄ＭＥＧ３表达对ｍｉＲ－２１４和ＡＴＦ４表达的影响，通过分别用??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３或ｓｉ－ＭＥＧ３转染肝细胞来过表达或敲低ＭＥＧ３。ｑＲＴ－ＰＣＲ证实??ＭＥＧ３的过表达和敲低效率（图４Ａ）。ＭＥＧ３过表达下调ｍｉＲ－２１４表达，但上调??ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表达。相反，ＭＥＧ３敲低可显著上调ｍｉＲ－２１４表达，但下??调ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表达（图４Ｂ－４Ｄ）。接下来，我们探讨了?ｍｉＲ－２１４的表??５４??
?山东大学博士学位论文???达对ＭＥＧ３和ＡＴＦ４表达的影响。ｑＲＴ－ＰＣＲ证实了?ｍｉＲ－２１４的过表达和敲低效??率（图４Ｅ）。结果表明，与相应的对照相比，ｍｉＲ－２１４ｍｉｍｉｃ显著下调ＭＥＧ３和??ＡＴＦ４表达水平，而ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ显著上调ＭＥＧ３和ＡＴＦ４的表达水平（图??４Ｆ－４Ｈ）。??ＡＴＦ４?１???１??Ａｃｔｉｎ?｜?ｍｍｍ?ｗｉｗｗ?｜??Ａ?１０－．?＊?？?ｇ?２．５－｜?Ｃ?３－ｊ?〇?＾?２．〇ｉ??ｉ：?ａ?！；：?｜ｔ＾?ｉ?卜．｜??ｉＨｊｋｕＵｔｊＭｉｉ??／?／?／?／?／（，／＂／／?＂?／?／??ＡＴＦ４?｜?－??Ｅ?Ａｃｔｉｎ?｜ｉＷ—？?ｍｍｍ?＇ｍｒｎｍ＾?｜??ｉＬｌｊＬｉｊＬｉｊＬｌ??＂／＊＜／??／?／?／?／?／?／?，，??图４?ＭＥＧ３和ｍｉＲ－２１４过表达和敲低对原代肝细胞中ＡＴＦ４表达的影响。川??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３、ｓｉ－ＭＥＧ３和相应对照，以及ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ／ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ和相应对照转染小??鼠原代肝细胞。（Ａ）通过ｑＲＴ－ＰＣＲ确认ＭＥＧ３的过表达和敲低效书。ｑＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ??ｂｌｏｔ结果表明，ＭＥＧ３过表达下调（Ｂ）?ｍｉＲ－２１４表达，但增加ＡＴＦ４的（Ｃ）?ｍＲＮＡ和（Ｄ）??蛋白的表达。ＭＥＧ３敲低发挥相反作用。（Ｅ）?ｑＲＴ－ＰＣＲ结果表明ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ增加了??ｍｉＲ－２１４?的表达，而?ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?减少了?ｍｉＲ－２１４?的表达。ｑＲＴ－ＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?结??果表明，ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ
【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA-Co7Rik的表达特征及其对糖异生的影响[J]. 张凡,崔县伟,袁雪雯,孙春涛,朱子阳,顾威,周亚慧,孙亚洲,刘倩琦. 中华内分泌代谢杂志. 2016 (11)
[2]mTOR/S6K1信号通路与有氧运动改善小鼠高脂饮食诱导胰岛素抵抗间的关系[J]. 苑红,牛燕媚,刘彥辉,苏照鹏,李慧阁,姜宁,傅力. 中国康复医学杂志. 2009(04)
硕士论文
[1]转录因子Nrf2对高脂饮食诱导小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及机制[D]. 倪阵.第四军医大学 2013
本文编号：3424937
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