SZB120抑制Th17细胞分化及对小鼠类银屑病模型的治疗机制研究
发布时间：2021-10-09 09:45
目的:1.筛选能够抑制Th17细胞分化的小分子化合物;2.探讨SZB120抑制Th17细胞分化的机制研究;3.寻找SZB120的直接作用靶点,并验证其在Th17细胞分化当中的功能;4.探讨SZB120对IMQ诱导的小鼠类银屑病模型的治疗作用。方法:采用IL-17A-GFP小鼠体外提取naive CD4+细胞进行体外诱导分化,比较AKBA（11-羰基-β-乙酰乳香酸）与SZB120抑制Th17细胞的分化情况。细胞培养72h后,收集细胞,进行胞外染色后用BD Fortessa X20流式细胞仪进行检测。利用CCK-8检测小分子化合物抑制HaCaT细胞增殖的影响,细胞贴壁后,小分子处理24h后,每孔加入10 u 1 CCK-8置于培养箱中继续反应,2h后用酶标仪检测细胞在450nm处测量吸光度。采用Cell Trace Violet燃料检测Th17细胞增殖,加入0.5μM、5μM SZB120至加入了细胞示踪染料的naive CD4+T细胞中,72h后上机检测CD4+IL-17+细胞的比例后同时查看细胞增殖的情况。采用Apoptosis试剂盒检测SZB120对Th17细胞的影响,Th17 细...
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１小分子调节ＥＩＦ２Ｓ１［Ｗ］??１．４糖酵解影响Ｔｈ１７分化??静止的、幼稚的Ｔ细胞具有相对适度的生物合成和能量需求，其通常通过三羧酸??（ＴＣＡ）循环的葡萄糖氧化和具有低水平糖酵解的脂质氧化来满足
?ＳＺＢ１２０抑制Ｔｈ１７细胞分化及对小鼠类银屑病糢型的治疗机制研究???特征，故在体外细胞筛选中我们采用了人永生化角质形成细胞ＨａＣａＴ作为研究对象，??待细胞贴壁后加入了候选小分子化合物ＳＺＢ１２０，作用２４ｈ后在酶标仪上查看结果，可??得知ＳＺＢ１２０对ＨａＣａＴ细胞的增殖具有一定的抑制效果（２ｂ）。图２ｂ数据采用Ｗ法检??验，八及０５，不符合正态分布，用Ｌｅｖｅｎｅ检验方差齐性，片０．０７０＞０．?０５，方差齐。??因此将１０ｕＭ、２０ｕＭ、３〇ｙＭ与１?ｕＭ进行Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ单因素方差分析检验，??ＳＺＢ１２０的３０ｕＭ较ＤＭＳ０组，差异有统计学意义（／ＭＬ?００６５）。??ａ?ｂ??〇?９〇ｎ?Ｉ?￣?Ｉ??Ｖ?１８５－?．??、層１ｒ—。丄夢?ｉ卜，??ＨＯ．?■?Ｕｊ?－Ｌ，??ＩＩＩ?Ｉ??＾?＾?＾??图２?ＳＺＢ１２０抑制Ｔｈ１７分化和ＨａＣａｔ细胞增殖??ａ．?ＡＫＢＡ?（左）和ＳＺＢ１２０?（右）结构式；??ｂ．?ＳＺＢ１２０在３０?ｕ?Ｍ有抑制ＨａＣａｔ？细胞增殖效果。??表５?ＳＺＢ１２０抑制ＨａＣａｔ细胞增殖率比较Ｍｅｄ?ｉ?ｕｍ??浓度（ｕＭ）?ｎ?抑制率（１００％）?Ｐ???１?３?－０．３３?（－３，?１）??１０?３?１１．０?（１０．０，?１１．５）?０．９１９４??２０?３?２３．?７?（２３．０，?２４．５）?０．?１２２５???３０?３?７７．０?（７６．０，?７８．５）?０．?００６５??注：各组均与１?ｕＭ组比较。??２．?３．?２?ＳＺＢ１２０较ＡＫＢＡ有更好的抑制Ｔｈｌ７分化的效
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【参考文献】：
期刊论文
[1]银屑病中医研究概述[J]. 尚俊良,徐佳,王莒生,周冬梅,张旭. 中医杂志. 2017(22)
[2]Chemical Abstracts[J]. Medicinal Plant. 2013(02)
[3]Extraction Technology of Ursolic Acid from Ligustrum lucidum Ait.[J]. CHEN Liang* ,XIA Xiao-fen,HOU Ren,MA Mei-gui,MEI Fang-fang,CAI Li,ZHOU Xuan College of Life Sciences,Hubei Normal University,Huangshi,Hubei 435002,China. Medicinal Plant. 2011(12)
[4]地方政府与中央政府在生态治理中的博弈分析[J]. 刘子恬. 科技促进发展. 2011(07)
[5]中国六省市银屑病流行病学调查[J]. 丁晓岚,王婷琳,沈佚葳,王晓艳,周城,田珊,刘盈,彭光辉,周俊娥,薛树旗,王仁利,唐英,孟雪梅,裴广德,白云花,刘青,李航,张建中. 中国皮肤性病学杂志. 2010(07)
[6]信息时空[J]. 文体用品与科技. 2009(10)
[7]Introduction[J]. 中国科技产业. 2005(02)
[8]全国1984年银屑病流行调查报告[J]. 全国银屑病流行调查组,邵长庚,张国威,包寅德,蒋仲元,韩国柱,顾恒. 皮肤病与性病. 1989(01)
本文编号：3426118
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１小分子调节ＥＩＦ２Ｓ１［Ｗ］??１．４糖酵解影响Ｔｈ１７分化??静止的、幼稚的Ｔ细胞具有相对适度的生物合成和能量需求，其通常通过三羧酸??（ＴＣＡ）循环的葡萄糖氧化和具有低水平糖酵解的脂质氧化来满足
?ＳＺＢ１２０抑制Ｔｈ１７细胞分化及对小鼠类银屑病糢型的治疗机制研究???特征，故在体外细胞筛选中我们采用了人永生化角质形成细胞ＨａＣａＴ作为研究对象，??待细胞贴壁后加入了候选小分子化合物ＳＺＢ１２０，作用２４ｈ后在酶标仪上查看结果，可??得知ＳＺＢ１２０对ＨａＣａＴ细胞的增殖具有一定的抑制效果（２ｂ）。图２ｂ数据采用Ｗ法检??验，八及０５，不符合正态分布，用Ｌｅｖｅｎｅ检验方差齐性，片０．０７０＞０．?０５，方差齐。??因此将１０ｕＭ、２０ｕＭ、３〇ｙＭ与１?ｕＭ进行Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ单因素方差分析检验，??ＳＺＢ１２０的３０ｕＭ较ＤＭＳ０组，差异有统计学意义（／ＭＬ?００６５）。??ａ?ｂ??〇?９〇ｎ?Ｉ?￣?Ｉ??Ｖ?１８５－?．??、層１ｒ—。丄夢?ｉ卜，??ＨＯ．?■?Ｕｊ?－Ｌ，??ＩＩＩ?Ｉ??＾?＾?＾??图２?ＳＺＢ１２０抑制Ｔｈ１７分化和ＨａＣａｔ细胞增殖??ａ．?ＡＫＢＡ?（左）和ＳＺＢ１２０?（右）结构式；??ｂ．?ＳＺＢ１２０在３０?ｕ?Ｍ有抑制ＨａＣａｔ？细胞增殖效果。??表５?ＳＺＢ１２０抑制ＨａＣａｔ细胞增殖率比较Ｍｅｄ?ｉ?ｕｍ??浓度（ｕＭ）?ｎ?抑制率（１００％）?Ｐ???１?３?－０．３３?（－３，?１）??１０?３?１１．０?（１０．０，?１１．５）?０．９１９４??２０?３?２３．?７?（２３．０，?２４．５）?０．?１２２５???３０?３?７７．０?（７６．０，?７８．５）?０．?００６５??注：各组均与１?ｕＭ组比较。??２．?３．?２?ＳＺＢ１２０较ＡＫＢＡ有更好的抑制Ｔｈｌ７分化的效
??ＤＭＳＯ?＇?＾?ｒＳｉ?，?ｐ＾ｉ??，?＾－°?１?＾１０－?ｈｒｈ?？？??—Ｉ????＿＞．?■■＊■ｎ１?＿＿?ｉ?■＿＿■，＿■，？?＿＿■＿■■．帽一＿?丨丨，．．?…，?＾ｍ０??Ｏ?．?ＳＺＢ１２０－１｜｜Ｍ?ＳＺＢ１２０－５ｍＭ?Ｅ?－?＾??＜?????５．６６?１．７７?Ｏ?＾５＂?ｍ??５?＊?－?ｌ?〇ｉｌ，．．ｌ?１，１１，１?－Ｕｌ?Ｊ?＾??ＣＤ４?＊１＾－｜—［ｗ－??ＡＫＢＡ?ＳＺＢ１２０??图３?ＡＫＢＡ与ＳＺＢ１２０抑制Ｔｈ１７细胞分化比较??ａ．中间１－１１号小鼠为ＩＬ－１７Ａ－ＧＦＰ小鼠；??ｂ．各组均与ＤＭＳ０组比较，Ｐ〈０．?０５被认为在统计学上有显著性差异。每次实验至少重复两到三??次，＊?Ｐ＜０．?０５：林?Ｐ＜０＿０１；?＊林?ＰＣ０．００１，?ｎｓ：无统计学意义。??２．?３．?３?ＳＺＢ１２０?促进?ＣＤ４＋／ＩＬ－１７＋细胞凋亡??首先我们用细胞示踪的紫色标记幼稚ＣＤ４＋?Ｔ细胞，在诱导Ｔｈｌ７细胞分化的同时??加上不同浓度的ＳＺＢＩ２０或ＤＭＳ０。如图４ａ所示，我们发现ＳＺＢ１２０不会影响低于５ｕ??Ｍ的⑶４＋?Ｔ细胞的增殖。接下来我们想知道ＳＺＢ１２０是否会导致Ｔ细胞死亡，因此我??们使用来自ＩＬ－１７Ａ－ＧＦＰ小鼠的幼稚⑶４＋Ｔ细胞来观察Ｔｈｌ７细胞分化条件下活细胞的??百分比。但值得注意的是，在我们使用的所有浓度中，即使最小浓度（０．５?ＵＭ）也具??有诱导ＣＤ４＋ＩＬ－１７—细胞凋亡的倾向（图４ｂ）。这些数据表明，ＳＺＢ１２０引起的Ｔｈｌ７分化??减少与其增殖没有很大关联，至于与其诱导细胞凋亡的潜在
【参考文献】：
期刊论文
[1]银屑病中医研究概述[J]. 尚俊良,徐佳,王莒生,周冬梅,张旭. 中医杂志. 2017(22)
[2]Chemical Abstracts[J]. Medicinal Plant. 2013(02)
[3]Extraction Technology of Ursolic Acid from Ligustrum lucidum Ait.[J]. CHEN Liang* ,XIA Xiao-fen,HOU Ren,MA Mei-gui,MEI Fang-fang,CAI Li,ZHOU Xuan College of Life Sciences,Hubei Normal University,Huangshi,Hubei 435002,China. Medicinal Plant. 2011(12)
[4]地方政府与中央政府在生态治理中的博弈分析[J]. 刘子恬. 科技促进发展. 2011(07)
[5]中国六省市银屑病流行病学调查[J]. 丁晓岚,王婷琳,沈佚葳,王晓艳,周城,田珊,刘盈,彭光辉,周俊娥,薛树旗,王仁利,唐英,孟雪梅,裴广德,白云花,刘青,李航,张建中. 中国皮肤性病学杂志. 2010(07)
[6]信息时空[J]. 文体用品与科技. 2009(10)
[7]Introduction[J]. 中国科技产业. 2005(02)
[8]全国1984年银屑病流行调查报告[J]. 全国银屑病流行调查组,邵长庚,张国威,包寅德,蒋仲元,韩国柱,顾恒. 皮肤病与性病. 1989(01)
本文编号：3426118
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