希特林缺陷病分子诊断和临床表型研究
发布时间：2021-10-26 13:04
目的:希特林缺陷病（Citrin deficiency,CD）是SLC25A13双等位基因变异引起的常染色体隐性遗传病。希特林缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（Neonatal Intrahepatic Cholestasis caused by Citrin Deficiency,NICCD）是目前最主要的儿科CD临床表型。由于缺乏公认的临床和生化诊断标准,NICCD确诊依赖SLC25A13基因分析。本研究旨在识别新的SLC25A13突变类型,为NICCD患者确诊和家系遗传咨询提供实验依据;同时总结国人,尤其是广东人群的SLC25A13突变特点,为深化对SLC25A13基因突变谱特征的科学认识提供精准医学支撑。方法:研究对象是2017年5月初至2018年12月底到我院儿科就诊,并根据临床和实验室特征高度怀疑患有CD的103名婴儿及其父母。采集研究对象外周血标本,提取基因组DNA,筛查4种高频SLC25A13变异。在仅检测到一个变异的情况下,通过Sanger测序分析SLC25A13基因所有18个外显子及其侧翼序列,以寻找另一个可能的致病变异。如仍未找到致病变异,就进一步通过LA-PCR行...
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
希特林蛋白分子结构(图片引自文献[2])
暨南大学博士学位论文6图1希特林蛋白分子结构(图片引自文献[2])图2希特林蛋白的主要功能示意图A氨生成尿素的过程，B希特林在苹果酸-天冬氨酸穿梭中的作用。(注缩写说明：Arg，精氨酸；ASA，精氨酸琥珀酸；Asp，天冬氨酸；aKG，α-酮戊二酸；Cit，瓜氨酸；CP，氨基甲酰磷酸；cyt，细胞质；Fum，延胡索酸；Glc，葡萄糖；Glu,谷氨酸；Mal，苹果酸；mit，线粒体；OAA，草酰乙酸；Orn，鸟氨酸；Pyr，丙酮酸。图片引自文献[13])1.2希特林缺陷病发病机理希特林的主要功能有：作为苹果酸-天冬氨酸穿梭的关键部份，参与糖异生；将细胞质的还原性辅酶I(NADH)运输到线粒体中，作为苹果酸天冬氨酸穿梭的一部分,能够降低胞质内还原性辅酶I(NADH)与氧化型辅酶I(NAD)的比值；将天冬氨酸从线粒体转运到胞质参与蛋白质，核苷酸和尿素合成[13]，见图2。当希特林缺陷时，天冬氨酸无法从线粒体转入胞质，胞质中的天冬氨酸减少，
暨南大学博士学位论文14CO2培养箱NU智能型美国Nuaire微波炉WD700中国Galanz紫外透射仪ZF-90中国上海顾村电光仪器厂超微量分光光度计NanoDrop2000C赛默飞世尔科技全自动凝胶成像系统KodakGelLogic1500美国柯达冷冻高速离心机Sorvalllegendmicro21R型赛默飞世尔科技DNA测序仪ABI3730xl赛默飞世尔科技倒置显微镜CK40M日本OLYMPUS3研究方法3.1分子诊断技术路线图应用PCR、PCR-RFLP、Sanger测序、分子克隆等技术对疑诊CD的患儿及其家系开展SLC25A13分子诊断研究(图3)。图3CD病SLC25A13分子诊断示意图3.2SLC25A13基因高频变异筛查
【参考文献】：
期刊论文
[1]人SLC25A13基因内含子突变IVS6-11A>G导致转录子剪接异常[J]. 陈君霖,李海清,刘妍霖,李冰肖,张占会. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2018(05)
[2]Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症2例临床病理观察[J]. 张继平,程艳波,周晓军,侯晓涛,谈东风,官阳. 诊断病理学杂志. 2018(04)
[3]六例瓜氨酸血症患儿的和基因突变分析[J]. 林壹明,余科,李鹿丰,郑珍珠,林卫华,傅清流. 中华医学遗传学杂志. 2017(05)
[4]儿科遗传性胆汁淤积症诊断与治疗新进展[J]. 宋元宗. 中华实用儿科临床杂志. 2017 (08)
[5]糖化血清白蛋白分子特性及临床意义[J]. 王冰,王玉明,段勇. 实验与检验医学. 2015(06)
[6]Citrin deficiency presenting as acute liver failure in an eight-month-old infant[J]. Mei-Hong Zhang,Jing-Yu Gong,Jian-She Wang. World Journal of Gastroenterology. 2015(23)
[7]银杏达莫注射液联合低分子肝素钙治疗慢性肺心病急性加重期对棘形红细胞计数和红细胞体积变化的影响[J]. 张明洁,杨玉梅,李德仁,杨明建. 国际检验医学杂志. 2015(09)
[8]中国不同胎龄新生儿出生体重曲线研制[J]. 朱丽,张蓉,张淑莲,石文静,严卫丽,王晓莉,吕勤,刘玲,周勤,邱全芳,李晓莺,何海英,汪吉梅,黎瑞春,陆嘉荣,尹兆青,苏萍,林新祝,郭芳,张慧,李树军,新华,韩彦青,王红云,陈冬梅,李占魁,王慧琴,邱银萍,刘华艳,杨杰,杨晓丽,李明霞,李文静,韩树萍,曹蓓,易彬,张亦慧,陈超. 中华儿科杂志. 2015 (02)
[9]Citrin缺陷所致婴儿肝内胆汁淤积症的肝胆显像特征[J]. 张梅虹,赵瑞芳,陈瑞,王建设. 中华核医学与分子影像杂志. 2014 (05)
[10]18例Citrin缺陷婴儿肝内胆汁淤积症的肝脏影像表现[J]. 蔡香然,赵新景,邓梅,吴何嘉,宋元宗,刘斯润. 中华放射学杂志. 2014 (01)
博士论文
[1]我国儿科希特林缺陷病患者分子诊断研究：SLC25A13基因突变谱及其地理分布[D]. 林伟霞.暨南大学 2017
硕士论文
[1]NICCD患儿SLC25A13基因型与生化表型，以及血清铜蓝蛋白水平与其他生化改变的相关性研究[D]. 赵新景.暨南大学 2013
本文编号：3459554
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
希特林蛋白分子结构(图片引自文献[2])
暨南大学博士学位论文6图1希特林蛋白分子结构(图片引自文献[2])图2希特林蛋白的主要功能示意图A氨生成尿素的过程，B希特林在苹果酸-天冬氨酸穿梭中的作用。(注缩写说明：Arg，精氨酸；ASA，精氨酸琥珀酸；Asp，天冬氨酸；aKG，α-酮戊二酸；Cit，瓜氨酸；CP，氨基甲酰磷酸；cyt，细胞质；Fum，延胡索酸；Glc，葡萄糖；Glu,谷氨酸；Mal，苹果酸；mit，线粒体；OAA，草酰乙酸；Orn，鸟氨酸；Pyr，丙酮酸。图片引自文献[13])1.2希特林缺陷病发病机理希特林的主要功能有：作为苹果酸-天冬氨酸穿梭的关键部份，参与糖异生；将细胞质的还原性辅酶I(NADH)运输到线粒体中，作为苹果酸天冬氨酸穿梭的一部分,能够降低胞质内还原性辅酶I(NADH)与氧化型辅酶I(NAD)的比值；将天冬氨酸从线粒体转运到胞质参与蛋白质，核苷酸和尿素合成[13]，见图2。当希特林缺陷时，天冬氨酸无法从线粒体转入胞质，胞质中的天冬氨酸减少，
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【参考文献】：
期刊论文
[1]人SLC25A13基因内含子突变IVS6-11A>G导致转录子剪接异常[J]. 陈君霖,李海清,刘妍霖,李冰肖,张占会. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2018(05)
[2]Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症2例临床病理观察[J]. 张继平,程艳波,周晓军,侯晓涛,谈东风,官阳. 诊断病理学杂志. 2018(04)
[3]六例瓜氨酸血症患儿的和基因突变分析[J]. 林壹明,余科,李鹿丰,郑珍珠,林卫华,傅清流. 中华医学遗传学杂志. 2017(05)
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[5]糖化血清白蛋白分子特性及临床意义[J]. 王冰,王玉明,段勇. 实验与检验医学. 2015(06)
[6]Citrin deficiency presenting as acute liver failure in an eight-month-old infant[J]. Mei-Hong Zhang,Jing-Yu Gong,Jian-She Wang. World Journal of Gastroenterology. 2015(23)
[7]银杏达莫注射液联合低分子肝素钙治疗慢性肺心病急性加重期对棘形红细胞计数和红细胞体积变化的影响[J]. 张明洁,杨玉梅,李德仁,杨明建. 国际检验医学杂志. 2015(09)
[8]中国不同胎龄新生儿出生体重曲线研制[J]. 朱丽,张蓉,张淑莲,石文静,严卫丽,王晓莉,吕勤,刘玲,周勤,邱全芳,李晓莺,何海英,汪吉梅,黎瑞春,陆嘉荣,尹兆青,苏萍,林新祝,郭芳,张慧,李树军,新华,韩彦青,王红云,陈冬梅,李占魁,王慧琴,邱银萍,刘华艳,杨杰,杨晓丽,李明霞,李文静,韩树萍,曹蓓,易彬,张亦慧,陈超. 中华儿科杂志. 2015 (02)
[9]Citrin缺陷所致婴儿肝内胆汁淤积症的肝胆显像特征[J]. 张梅虹,赵瑞芳,陈瑞,王建设. 中华核医学与分子影像杂志. 2014 (05)
[10]18例Citrin缺陷婴儿肝内胆汁淤积症的肝脏影像表现[J]. 蔡香然,赵新景,邓梅,吴何嘉,宋元宗,刘斯润. 中华放射学杂志. 2014 (01)
博士论文
[1]我国儿科希特林缺陷病患者分子诊断研究：SLC25A13基因突变谱及其地理分布[D]. 林伟霞.暨南大学 2017
硕士论文
[1]NICCD患儿SLC25A13基因型与生化表型，以及血清铜蓝蛋白水平与其他生化改变的相关性研究[D]. 赵新景.暨南大学 2013
本文编号：3459554
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