针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠PI3K、p-AKT、Bax影响的研究

发布时间：2017-05-06 05:02

  本文关键词：针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠PI3K、p-AKT、Bax影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织PI3K、p-AKT以及Bax表达的影响,探讨其对脑组织细胞凋亡及神经保护的作用机制。方法：选取健康雄性Wistar大鼠144只,随机分为三组：模型组、针刺组(模型+针刺组)、假手术组,每组48只大鼠。每组再随机分为6h、1d、3d、7d四个亚组,每个亚组12只大鼠,制备脑出血模型。假手术组大鼠接受类似模型组的各项手术操作,但不进行注血。针刺组大鼠在脑出血造模成功后,立即针刺“百会”透“曲鬓”进行治疗。各组大鼠神经功能缺损体征应用Berder son评分法以及Rosenberg评分法进行综合评价；光镜下采用HE染色法对各组大鼠脑组织形态学改变进行观察；各组大鼠脑出血半暗带区细胞凋亡情况应用TUNEL法进行检测；运用免疫组织化学及蛋白免疫印记法分别检测各组ICH模型大鼠不同时间点脑组织中PI3Kp-AKT以及Bax的表达情况。结果：1.针刺组大鼠较模型组大鼠神经功能缺损体征有明显恢复,在1d,3d,7d时针刺组大鼠评分明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。2.HE染色显示：针刺组出血灶明显小于同时间点模型组,炎性细胞数量较模型组减少,水肿程度低于模型组,脑组织破坏情况远轻于模型组大鼠,细胞形态排列较规整。3. TUNEL法检测结果：针刺组各时段细胞凋亡数量均较模型组减少,术后3d、7d时,针刺组出血灶周半暗带区的TUNEL阳性细胞数明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)；4.PI3K免疫组化结果：模型组术后6h时,出血灶周围即出现较高的PI3K阳性细胞表达,至术后1d时达到最高值；针刺组术后各时间点PI3K的阳性细胞数高于模型组, 均有显著性差异(P0.05)。5.p-AKT免疫组化结果：模型组术后6h时,在半暗带区即有相当数量的p-AKT阳性细胞表达,术后1d时达到高峰；针刺组术后各时段p-AKT阳性细胞表达数量均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)6.Bax免疫组化结果：模型组术后6h时,Bax阳性细胞数即出现表达增多,术后3d时达到最高值；针刺组Bax每个时间点阳性细胞表达数量均低于模型组,各时间点差异均有统计学意义(P0.05)7.PI3K蛋白免疫印记结果：模型组术后6h时,PI3K蛋白表达量已明显增加,术后1d时达到最高值；针刺组大鼠术后各个时间点脑组织PI3K蛋白的表达量均增多, 差异具有统计学意义(P0.05)8.p-AKT蛋白免疫印记结果：模型组p-AKT蛋白表达量在术后6h已有较明显增多,于术后1d时达到高峰；针刺组大鼠各时段p-AKT蛋白表达量都高于模型组,差异均具有统计学意义(P0.05)9.Bax蛋白免疫印记结果：在术后6h时,模型组大鼠即有Bax蛋白明显表达,术后3d时达到高峰；针刺组大鼠各时间点Bax蛋白表达含量均低于模型组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论：1.针刺“百会”透“曲鬓”可以对脑出血模型大鼠神经功能缺损程度评分起到明显的改善作用,减轻其神经功能缺损症状；2. 针刺“百会”透“曲鬓”,可以明显改善脑出血模型大鼠脑水肿程度,减轻炎性细胞浸润,修复神经细胞损伤,从而对其脑组织起到保护作用；3.针刺“百会”透“曲鬓”可以显著降低脑出血模型大鼠半暗带区脑组织凋亡细胞的数量,起到抗细胞凋亡的作用；4.针刺“百会”透“曲鬓”可能通过提高ICH模型大鼠脑出血半暗带区PI3K的表达水平,发挥PI3K的抗细胞凋亡作用,从而使半暗带区神经细胞的调亡数量减少,对脑出血后继发性损伤起到保护作用。5.针刺“百会”透“曲鬓”能够增加ICH模型大鼠脑出血半暗带区p-AKT的表达数量,增强其抗细胞凋亡作用,减少半暗带区神经细胞的调亡数量,从而起到保护脑出血灶周神经元,减少继发性损伤的作用。6.针刺“百会”透“曲鬓”能够降低IC H模型大鼠脑出血半暗带区Bax的表达数量,抑制其促细胞凋亡作用,从而起到保护脑出血灶周围神经细胞,减轻大鼠脑出血后继发性损伤程度的作用。
【关键词】：针刺“百会”透“曲鬓” 脑出血 细胞凋亡 PI3K p-AKT Bax
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245
【目录】：

• 缩略语表4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 文献综述15-43
• 1. 中医学对脑出血的研究15-34
• 1.1 中医学对本病证病名的记载和描述15
• 1.2 中医学对本病证的病因病机认识15-18
• 1.3 中医学对本病证的治疗研究进展18-30
• 1.4 针灸对本病证的治疗研究进展30-34
• 2. 现代医学对脑出血的研究34-38
• 2.1 脑出血的病因34
• 2.2 脑出血发病机制34-35
• 2.3 脑出血后血肿周围组织损伤的机制35-37
• 2.4 脑出血后的细胞凋亡机制37-38
• 3. PI3K/AKT信号转导通路关键因子的研究进展38-43
• 3.1 PI3K的研究进展38-40
• 3.2 p-AKT的研究进展40-41
• 3.3 Bax的研究进展41-43
• 实验研究43-64
• 1. 实验材料与实验方法43-53
• 1.1 实验材料43-44
• 1.2 实验方法44-53
• 2. 实验结果53-64
• 2.1 各组大鼠神经功能缺损体征评分53-54
• 2.2 各组大鼠脑组织形态学的光镜观察结果54-55
• 2.3 各组大鼠脑组织不同时间点TUNEL法检测细胞凋亡结果55-56
• 2.4 各组大鼠脑组织中PI3K免疫组织化学检测结果56-57
• 2.5 各组大鼠脑组织中p-AKT免疫组织化学检测结果57-58
• 2.6 各组大鼠脑组织中Bax免疫组织化学检测结果58-59
• 2.7 各组大鼠脑组织PI3K蛋白免疫印迹检测结果59-60
• 2.8 各组大鼠脑组织p-AKT蛋白免疫印迹检测结果60-62
• 2.9 各组大鼠脑组织Bax蛋白免疫印迹检测结果62-64
• 讨论64-78
• 1. 脑出血的实验动物模型及实验动物的选择64-65
• 2. 针刺“百会”透“曲鬓”的选穴依据65-69
• 3. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠神经功能缺损体征评分影响69-70
• 4. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织病理形态学影响70-71
• 5. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠半暗带区细胞凋亡的影响71-72
• 6. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织PI3K表达的影响72-74
• 7. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织p-AKT表达的影响74-75
• 8. 针刺“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织Bax表达的影响75-78
• 结论78-79
• 致谢79-80
• 参考文献80-93
• 附图93-103
• 攻读博士学位期间发表论文情况103-105
• 个人简介105

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：347745