人骨髓间充质干细胞外泌体减轻肝纤维化作用及机制研究
发布时间：2021-11-15 12:33
研究背景:间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）被广泛地应用于治疗肝纤维化。基于外泌体与亲本细胞功能的相似,外泌体是一种安全有效的无细胞试剂,在临床治疗中更加安全有效。目的:本研究的目的是探索人骨髓间充质干细胞来源的外泌体（human bone mesenchymal stem cells-derived exosomes,hBM-MSCs-Ex）治疗肝纤维化的效果和分子作用机制。方法:本实验中建立了CCl4诱导8周的大鼠肝纤维化模型,然后注射hBM-MSCs-Ex治疗4周,实验中将人骨髓间充质干细胞（human bone mesenchymal stem cells,hBM-MSCs）作为阳性治疗组。通过组织病理学分析,肝功能和检测炎性细胞因子表达验证hBM-MSCs-Ex治疗肝纤维化效果。此外,我们通过Western Blot实验研究了hBM-MSCs-Ex在肝星状细胞（Hepatic stellate cells,HSCs）和肝纤维化组织中的抗纤维化机制,并检测Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达。结果:研究结果表...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
显微镜下人骨髓间充质干细胞的形态（Bar=100μm）
第3章人骨髓间充质干细胞外泌体提取及鉴定55落贴壁生长，传代后细胞增殖明显。图3.1显微镜下人骨髓间充质干细胞的形态（Bar=100μm）3.3.2电镜下观察hBM-MSCs-Ex的形态和结构使用超速离心法从hBM-MSCs成功分离出hBM-MSCs-Ex，新鲜提纯的外泌体经磷钨酸着色后，在透射电子显微镜镜下可见直径不一、双凹圆盘状的囊形小泡，囊内能够看到低密度光亮区；图3.2透射电子显微镜观察纯化的外泌体形态（Bar=100nm和200nm）
吉林大学博士学位论文563.3.3NTA检测hBM-MSCs-Ex的粒径分布和浓度运用NTA对提取的hBM-MSCs-Ex进行粒径分析发现，提取出的样本颗粒直径多集中于50-100nm之间，峰值在65nm；图3.3通过纳米粒子跟踪与相应视频帧在流动条件下外泌体的尺寸分布测量。3.3.4WesternBlot鉴定hBM-MSCs-Ex表面标志蛋白Westernblotting结果证实，分离得到的hBM-MSCs-Ex表达外泌体特异性标志蛋白：CD9、CD63、TSG101和Alix，而不表达GAPDH；
【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells[J]. Claudia Lange,Philipp Bassler,Michael V. Lioznov,Helge Bruns,Dietrich Kluth,Axel R. Zander,Henning C. Fiegel. World Journal of Gastroenterology. 2005(29)
[2]Hepatic differentiation capability of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells[J]. Sai-Nan Shu Lai Wei Jiang-Hua Wang Yu-Tao Zhan Hong-Song Chen Yu Wang Institute of Hepatology,People’s Hospital,Peking University,Beijing 100044,ChinaGastroenterology Department,Tong-Ren Hospital,Capital Medical University,Beijing 100730,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(19)
本文编号：3496786
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
显微镜下人骨髓间充质干细胞的形态（Bar=100μm）
第3章人骨髓间充质干细胞外泌体提取及鉴定55落贴壁生长，传代后细胞增殖明显。图3.1显微镜下人骨髓间充质干细胞的形态（Bar=100μm）3.3.2电镜下观察hBM-MSCs-Ex的形态和结构使用超速离心法从hBM-MSCs成功分离出hBM-MSCs-Ex，新鲜提纯的外泌体经磷钨酸着色后，在透射电子显微镜镜下可见直径不一、双凹圆盘状的囊形小泡，囊内能够看到低密度光亮区；图3.2透射电子显微镜观察纯化的外泌体形态（Bar=100nm和200nm）
吉林大学博士学位论文563.3.3NTA检测hBM-MSCs-Ex的粒径分布和浓度运用NTA对提取的hBM-MSCs-Ex进行粒径分析发现，提取出的样本颗粒直径多集中于50-100nm之间，峰值在65nm；图3.3通过纳米粒子跟踪与相应视频帧在流动条件下外泌体的尺寸分布测量。3.3.4WesternBlot鉴定hBM-MSCs-Ex表面标志蛋白Westernblotting结果证实，分离得到的hBM-MSCs-Ex表达外泌体特异性标志蛋白：CD9、CD63、TSG101和Alix，而不表达GAPDH；
【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells[J]. Claudia Lange,Philipp Bassler,Michael V. Lioznov,Helge Bruns,Dietrich Kluth,Axel R. Zander,Henning C. Fiegel. World Journal of Gastroenterology. 2005(29)
[2]Hepatic differentiation capability of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells[J]. Sai-Nan Shu Lai Wei Jiang-Hua Wang Yu-Tao Zhan Hong-Song Chen Yu Wang Institute of Hepatology,People’s Hospital,Peking University,Beijing 100044,ChinaGastroenterology Department,Tong-Ren Hospital,Capital Medical University,Beijing 100730,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(19)
本文编号：3496786
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3496786.html
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