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1.ZNF471在人食管鳞状细胞癌中作用和机制研究 2.IRF4在食管鳞状细胞癌患者中的预后意义研究

发布时间:2021-11-29 01:51
  第一部分ZNF471在人食管鳞状细胞癌中作用和机制研究目的:ZNF471(Zinc finger protein 471)位于19q13.43,是一种包含KRAB结构域的锌指蛋白。已有文献报道,ZNF471在胃癌中由于启动子甲基化而表达降低,并且可以作为抑癌基因诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖和转移。但ZNF471在食管鳞状细胞癌发生发展中的具体机制仍未被明确阐述。因此,在本研究中,我们对ZNF471在食管鳞癌中的表观遗传学调控及具体的生物功能和可能的分子机制进行了进一步地探索。方法:采用RT-PCR实验检测ZNF471在人正常组织和食管鳞癌细胞株中的表达情况。通过qPCR实验检测ZNF471在食管鳞癌配对组织(癌和癌旁)中的表达情况。通过MSP实验检测ZNF471在食管鳞癌细胞株和食管鳞癌组织中的甲基化状态。质粒转染人食管鳞癌细胞KYSE150和KYSE410,筛选鉴定ZNF471稳定过表达的细胞株,用于进行细胞克隆形成、CCK-8、流式细胞术(周期和凋亡)、划痕、侵袭、迁移和裸鼠荷瘤实验,探索实验组(ZNF471过表达组)和对照组(空载质粒组)对人食管鳞癌细胞功能的影响。在人食管鳞癌细胞... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:121 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

1.ZNF471在人食管鳞状细胞癌中作用和机制研究 2.IRF4在食管鳞状细胞癌患者中的预后意义研究


ZNF471在人正常组织中的表达Figure1.1ZNF471expressioninhumannormaltissueswereassayedbyRT-PCR.

食管鳞癌,甲基化,细胞株,情况


重庆医科大学博士研究生学位论文采用RT-PCR对人食管鳞癌细胞株中ZNF471的表达情况进行检测。结果显示,ZNF471 在绝大多数食管鳞癌细胞中不表达,但是在大多数正常食管上皮细胞中高表达。MSP 实验结果显示,绝大多数食管鳞癌细胞中 ZNF471 呈高甲基化水平,而正常食管上皮细胞中 ZNF471 呈低甲基化。(图 1.2)同时,我们通过在线数据库 CpG Island Searcher 分析发现,ZNF471 含有一个典型的 CpG 岛(图 1.3)。

示意图,食管鳞癌,示意图,甲基化


71 在绝大多数食管鳞癌细胞中不表达,但是在大多数正常食管上皮细。MSP 实验结果显示,绝大多数食管鳞癌细胞中 ZNF471 呈高甲基化常食管上皮细胞中 ZNF471 呈低甲基化。(图 1.2)同时,我们通过在G Island Searcher 分析发现,ZNF471 含有一个典型的 CpG 岛(图 1.3 1.2 RT-PCR 和 MSP 检测 ZNF471 在人食管鳞癌细胞株中的表达和甲基化情re 1.2 The expression and methylation status of ZNF471 in representative humancells were assayed by RT-PCR and MSP

【参考文献】:
期刊论文
[1]Epigenetic therapy of cancer stem and progenitor cells by targeting DNA methylation machineries[J]. Patompon Wongtrakoongate.  World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]Promoter methylation of tumor suppressor genes in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Ji-Sheng Li,Jian-Ming Ying,Xiu-Wen Wang,Zhao-Hui Wang,Qian Tao,Li-Li Li.  Chinese Journal of Cancer. 2013(01)
[3]XAF1 is frequently methylated in human esophageal cancer[J]. Xiang-Yu Chen, Qiao-Yu He, Ming-Zhou Guo, Department of Gastroenterology, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China , Department of Gastroenterology and Hepatology, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(22)



本文编号:3525598

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