线粒体自噬-NLRP3炎症小体途径在脑缺血再灌注损伤中的作用及三七总皂苷和黄芪甲苷干预的研究
发布时间：2021-12-01 18:02
已有的研究表明,NLRP3炎症小体介导了脑缺血再灌注损伤并且NLRP3炎症小体的活化加重脑缺血再灌注损伤;脑缺血再灌注激活线粒体自噬,并且线粒体自噬的活化能减轻脑缺血再灌注损伤,线粒体自噬成为了脑缺血再灌注干预的重要潜在靶点;而且线粒体自噬是负性调控NLRP3炎症小体活化的重要因素;因此本课题探讨脑缺血再灌注中线粒体自噬对NLRP3炎症小体活化的调控作用,揭示线粒体自噬-NLRP3炎症小体途径在脑缺血再灌注病理过程中的作用。基于三七总皂苷和黄芪甲苷在脑缺血再灌注中的多靶点保护机制,基于线粒体自噬和NLRP3炎症小体在脑缺血再灌注中的作用,本课题进一步从线粒体自噬-NLRP3炎症小体途径探讨三七总皂苷和黄芪甲苷抗脑缺血再灌注机制。第一部分本部分旨在探讨本研究探讨脑缺血再灌注中线粒体自噬对NLRP3炎症小体的调控作用,揭示线粒体自噬对NLRP3炎症小体的调控在脑缺血再灌注中的作用。采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注模型,我们发现在大鼠脑缺血再灌注中存在NLRP3炎症小体的活化,并且抑制NLRP3炎症小体或或抑制其下游的Caspase-1能减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,表明在脑缺血...
【文章来源】：湖南中医药大学湖南省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
大鼠脑缺血再灌注后不同时间点皮层NLRP3、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1、Pro-IL-1β、IL-1β、Pro-IL-18、IL-18蛋白水平的变化
Ac-YVAD-CMK 和 MCC950 组脑梗死体积均显著降低（。假手术组大鼠神经功能行为正常，神经功能缺失评分 0的神经功能缺失症状，出现对侧前爪不能伸直，或行走时走时向损伤对侧倾倒，或无自发活动等神经功能障碍，神于假手术组（p<0.01，图 2C）；与模型组比较，Ac-YVAD经功能缺失评分均显著降低（p<0.01，图2C）。以上研究提化加大鼠重脑缺血再灌注损伤。
图 3 线粒体自噬介导了 RAP 对大鼠脑缺血再灌注后 NLRP3 炎症小体活化的抑制作用(A) 各组大鼠脑组织 NLRP3、Cl. Caspase-1、IL-1β、和 IL-18 的 Westernblot 条带图；（B）各组 NLRP3 蛋白表达比较；(C) 各组 Cl. Caspase-1 蛋白表达比较;（D）各组 IL-1β 蛋白表达比较; （E）各组 IL-18 蛋白表达比较。n=5，与假手术组比较，**P<0.01；与模型组比较,##P<0.01；与 RAP 组比较，&&P<0.01。3.4 RAP 激活大鼠脑缺血再灌注中 PINK1/Parkin 介导的线粒体自噬有研究报道 RAP 可以促进脑缺血再灌注中的线粒体自噬[90]，因此我们进一步观察了 RAP 对脑缺血再灌注后线粒体自噬的影响。结果如图 4 所示，与假手术组相比，模型组 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高（p < 0.05，图 4A 和 4B），P62蛋白水平显著降低（p<0.01，图 4A 和 4C），并且模型组脑组织中线粒体标志蛋白 COX4I1 和 TOMM20 的水平显著降低（p < 0.05 和 p < 0.01，图 4A、4E 和4F），这提示脑缺血再灌注后存在线粒体自噬活化。与模型组比较，RAP 组 LC3-
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪甲苷减轻大鼠脑缺血再灌损伤并抑制NF-κB磷酸化及NLRP3炎症小体活化[J]. 唐标,唐文静,唐映红,邓常清. 生理学报. 2019(03)
[2]基于系统药理学分析三七总皂苷干预脑血管疾病的作用机制[J]. 聂娟,唐标. 湖南中医药大学学报. 2018(09)
[3]NLRP3炎性小体与脑缺血性损伤[J]. 唐标,邓常清. 生命的化学. 2018(02)
[4]神经保护药治疗急性缺血性脑卒中的研究现状[J]. 杜亚明,赵志刚. 中国临床药理学杂志. 2018(06)
[5]细胞焦亡与脑卒中[J]. 唐标,邓常清. 生理学报. 2018(01)
[6]中药治疗脑缺血的用药规律研究[J]. 谢丽华,赵毅锦,林兴丽,马港圆,钟良,唐标. 中医药导报. 2017(17)
[7]黄芪甲苷和三七总皂苷配伍抗大鼠脑缺血再灌注损伤及其药动学的研究[J]. 李静娴,杨筱倩,唐标,刘晓丹,唐映红,邓常清,黄小平. 中国中药杂志. 2017(19)
[8]The fate of medications evaluated for ischemic stroke pharmacotherapy over the period 1995–2015[J]. Xiaoling Chen,Kewei Wang. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(06)
[9]三七总皂苷抗脑缺血再灌注损伤的药理研究进展[J]. 杨鹏飞,宋修云,陈乃宏. 药学学报. 2016(07)
[10]缺血性脑损伤中的自噬——研究进展与挑战[J]. 张翔南,陈忠. 中国科学:生命科学. 2014(04)
本文编号：3526803
【文章来源】：湖南中医药大学湖南省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
大鼠脑缺血再灌注后不同时间点皮层NLRP3、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1、Pro-IL-1β、IL-1β、Pro-IL-18、IL-18蛋白水平的变化
Ac-YVAD-CMK 和 MCC950 组脑梗死体积均显著降低（。假手术组大鼠神经功能行为正常，神经功能缺失评分 0的神经功能缺失症状，出现对侧前爪不能伸直，或行走时走时向损伤对侧倾倒，或无自发活动等神经功能障碍，神于假手术组（p<0.01，图 2C）；与模型组比较，Ac-YVAD经功能缺失评分均显著降低（p<0.01，图2C）。以上研究提化加大鼠重脑缺血再灌注损伤。
图 3 线粒体自噬介导了 RAP 对大鼠脑缺血再灌注后 NLRP3 炎症小体活化的抑制作用(A) 各组大鼠脑组织 NLRP3、Cl. Caspase-1、IL-1β、和 IL-18 的 Westernblot 条带图；（B）各组 NLRP3 蛋白表达比较；(C) 各组 Cl. Caspase-1 蛋白表达比较;（D）各组 IL-1β 蛋白表达比较; （E）各组 IL-18 蛋白表达比较。n=5，与假手术组比较，**P<0.01；与模型组比较,##P<0.01；与 RAP 组比较，&&P<0.01。3.4 RAP 激活大鼠脑缺血再灌注中 PINK1/Parkin 介导的线粒体自噬有研究报道 RAP 可以促进脑缺血再灌注中的线粒体自噬[90]，因此我们进一步观察了 RAP 对脑缺血再灌注后线粒体自噬的影响。结果如图 4 所示，与假手术组相比，模型组 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高（p < 0.05，图 4A 和 4B），P62蛋白水平显著降低（p<0.01，图 4A 和 4C），并且模型组脑组织中线粒体标志蛋白 COX4I1 和 TOMM20 的水平显著降低（p < 0.05 和 p < 0.01，图 4A、4E 和4F），这提示脑缺血再灌注后存在线粒体自噬活化。与模型组比较，RAP 组 LC3-
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪甲苷减轻大鼠脑缺血再灌损伤并抑制NF-κB磷酸化及NLRP3炎症小体活化[J]. 唐标,唐文静,唐映红,邓常清. 生理学报. 2019(03)
[2]基于系统药理学分析三七总皂苷干预脑血管疾病的作用机制[J]. 聂娟,唐标. 湖南中医药大学学报. 2018(09)
[3]NLRP3炎性小体与脑缺血性损伤[J]. 唐标,邓常清. 生命的化学. 2018(02)
[4]神经保护药治疗急性缺血性脑卒中的研究现状[J]. 杜亚明,赵志刚. 中国临床药理学杂志. 2018(06)
[5]细胞焦亡与脑卒中[J]. 唐标,邓常清. 生理学报. 2018(01)
[6]中药治疗脑缺血的用药规律研究[J]. 谢丽华,赵毅锦,林兴丽,马港圆,钟良,唐标. 中医药导报. 2017(17)
[7]黄芪甲苷和三七总皂苷配伍抗大鼠脑缺血再灌注损伤及其药动学的研究[J]. 李静娴,杨筱倩,唐标,刘晓丹,唐映红,邓常清,黄小平. 中国中药杂志. 2017(19)
[8]The fate of medications evaluated for ischemic stroke pharmacotherapy over the period 1995–2015[J]. Xiaoling Chen,Kewei Wang. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(06)
[9]三七总皂苷抗脑缺血再灌注损伤的药理研究进展[J]. 杨鹏飞,宋修云,陈乃宏. 药学学报. 2016(07)
[10]缺血性脑损伤中的自噬——研究进展与挑战[J]. 张翔南,陈忠. 中国科学:生命科学. 2014(04)
本文编号：3526803
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