miR-181a和miR-27b分别调节结直肠癌血管生成和化疗耐药性的机制研究

发布时间：2021-12-19 18:22

　　结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是一类常见的消化道恶性肿瘤,具有高发病率高和死亡率高的特点。仔细发掘结直肠癌背后的致病因素,改进结直肠癌的预防、诊断、治疗及预后措施,是研究者们面临的一大严峻课题。microRNAs（miRNAs）是一类长约19-23nt的单链非编码小RNA。miRNAs主要通过结合靶基因的mRNA,抑制mRNA翻译或者引起mRNA的降解,从而抑制靶基因的表达,影响各种生理病理活动。在癌症发生时,癌细胞中多种miRNAs的表达会发生变化,进而影响下游靶基因的表达,最终影响癌症的发生发展。研究癌症中异常变化的miRNAs及其参与癌症进程调控的机理,对于癌症的研究和治疗具有重要的意义。本研究中,我们分别探讨了结直肠癌中两个重要的癌症相关miRNAs（原癌miRNA miR-181a和抑癌miRNA miR-27b）通过抑制各自靶基因（抑癌基因SRCIN1和癌基因ATG10）在结直肠癌血管生成以及在奥沙利铂耐药中发挥作用的机制,为结直肠癌血管生成治疗以及逆转奥沙利铂耐药寻找新的思路。研究内容主要分为两部分。论文第一部分开展了miR-181a通过下调抑癌基... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：125 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

（A）两组芯片结果交集；（B）miR-181下游靶基因功能富集

图1.2（A）高表达miR-181a的结直肠癌患者总生存率更低；（B）14对结直肠癌组织中miR-181a含量显著升高；（C）HT29细胞中转染miR-181a mimic或inhibitor后含量改变；（DE）转染miR-181a mimic的HT29细胞培养液可以促进HUVEC细胞成环, miR-181a inhibitor的HT29细胞培养液可以抑制进HUVEC细胞成环。比例尺：100μm。*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。1.2.2 miR-181a 促进体内血管生成以上结果证明miR-181a在体外构建的共培养系统中发挥促进血管生成的作用，接下来在体内实验中继续探索过表达miR-181a的肿瘤细胞是否更容易促进血管的生长。首先我们利用慢病毒构建了稳定高表达miR-181a的HT29细胞系,如图1.3A。同时我们也检测了慢病毒的转染效率，如图1.3B所示，慢病毒有效的提高了HT29细胞中miR-181a的表达水平。

我们将构建的稳定过表达miR-181a的细胞系与基质胶混合后，进行裸鼠腋下植瘤。7天之后，取肿瘤进行分析。结果显示，相对于对照组，miR-181a过表达组血红蛋白含量升高（图1.4A）。我们提取了移植瘤的RNA，检测了miR-181a含量，如图1.4B所示，感染了miR-181a过表达慢病毒组，miR-181a含量升高。图 1.4(A)移植瘤形态（n=5）,比例尺：1cm；（B）qPCR 检测移植瘤中 miR-181a的含量。***P<0.001


本文编号：3544846